大鼠脑组织中CNTF基因克隆及其探针制备
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南通医学院遗传学教研室；南通226001 刘梅；丁斐；顾晓松
CNTF基因|T-A克隆|地高辛标记|原位杂交
参见附件(73kb)。
南通医学院遗传学教研室；南通226001 刘梅；丁斐；顾晓松
关键词：CNTF基因；T-A克隆；地高辛标记；原位杂交
摘要：目的 克隆大鼠CNTF基因并制备地高辛标记的CNTF探针。方法 采用RT PCR法,从大鼠脑组织mRNA中扩增CNTF基因ORF区片段,克隆入T载体,并经序列测定。以地高辛素标记CNTF基因片段为探针,对成年大鼠脊髓组织切片进行原位杂交。结果 RT PCR法扩增出一特异产物与预期长度616bp相符,序列测定与CNTF基因100%同源。原位杂交显示阳性信号出现在成年大鼠脊髓白质的前索及侧索的周边部分,为杵棒形和三角形带有纤细突起的胶质细胞。结论 采用RT PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织中的CNTF基因克隆,地高辛标记的CNTF探针原位杂交显示正常大鼠脊髓白质的部分胶质细胞中表达CNTFmRNA。
南通医学院遗传学教研室；南通226001 刘梅；丁斐；顾晓松
关键词：CNTF基因；T-A克隆；地高辛标记；原位杂交
摘要：目的 克隆大鼠CNTF基因并制备地高辛标记的CNTF探针。方法 采用RT PCR法,从大鼠脑组织mRNA中扩增CNTF基因ORF区片段,克隆入T载体,并经序列测定。以地高辛素标记CNTF基因片段为探针,对成年大鼠脊髓组织切片进行原位杂交。结果 RT PCR法扩增出一特异产物与预期长度616bp相符,序列测定与CNTF基因100%同源。原位杂交显示阳性信号出现在成年大鼠脊髓白质的前索及侧索的周边部分,为杵棒形和三角形带有纤细突起的胶质细胞。结论 采用RT PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织中的CNTF基因克隆,地高辛标记的CNTF探针原位杂交显示正常大鼠脊髓白质的部分胶质细胞中表达CNTFmRNA。
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