重组人胰岛素样生长因子Ⅰ的纯化及鉴定
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军事医学科学院基础医学研究所；北京100850 聂尚海；刘宝英；王芳；刘农乐；杜清友；丁红梅；王会信
重组人胰岛素样生长因子Ⅰ|纯化|复性|氨基酸序列
参见附件(52kb)。
军事医学科学院基础医学研究所；北京100850 聂尚海；刘宝英；王芳；刘农乐；杜清友；丁红梅；王会信
关键词：重组人胰岛素样生长因子Ⅰ；纯化；复性；氨基酸序列
摘要：目的 :纯化在大肠杆菌中表达的重组人胰岛素样生长因子Ⅰ (rhIGF Ⅰ ) ,并对其性质进行鉴定。方法 :发酵表达菌株 ,提取包涵体 ,采用离子交换和凝胶过滤两步纯化 ,从相对分子质量、免疫学性质、荧光光谱、N端 15个氨基酸的序列分析等方面进行鉴定。另外 ,对重组蛋白进行了复性和生物学功能的检测。结果与结论 :纯化后rhIGF Ⅰ纯度可达 99%以上 ,相对分子质量、免疫印迹、荧光光谱及N端 15个氨基酸的分析结果与预计的相同 ,rhIGF Ⅰ促细胞生长的ED50 为 3～ 10ng/ml。
军事医学科学院基础医学研究所；北京100850 聂尚海；刘宝英；王芳；刘农乐；杜清友；丁红梅；王会信
关键词：重组人胰岛素样生长因子Ⅰ；纯化；复性；氨基酸序列
摘要：目的 :纯化在大肠杆菌中表达的重组人胰岛素样生长因子Ⅰ (rhIGF Ⅰ ) ,并对其性质进行鉴定。方法 :发酵表达菌株 ,提取包涵体 ,采用离子交换和凝胶过滤两步纯化 ,从相对分子质量、免疫学性质、荧光光谱、N端 15个氨基酸的序列分析等方面进行鉴定。另外 ,对重组蛋白进行了复性和生物学功能的检测。结果与结论 :纯化后rhIGF Ⅰ纯度可达 99%以上 ,相对分子质量、免疫印迹、荧光光谱及N端 15个氨基酸的分析结果与预计的相同 ,rhIGF Ⅰ促细胞生长的ED50 为 3～ 10ng/ml。
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