酵母表达的戊型肝炎病毒结构区ORF_2蛋白的免疫原性研究
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中国预防医学科学院病毒学研究所肝炎室 100094.北京 佟玉品；詹美云；鲁健；白玉；毕胜利
肝炎病毒|戊型|重组蛋白质类|免疫原性|聚合酶链反应|半数有效量
参见附件(51kb)。
中国预防医学科学院病毒学研究所肝炎室 100094.北京 佟玉品；詹美云；鲁健；白玉；毕胜利
关键词：肝炎病毒；戊型；重组蛋白质类；免疫原性；聚合酶链反应；半数有效量
摘要：目的 研究巴氏毕赤酵母表达系统表达的戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)结构区ORF2蛋白的免疫原性。方法 将重组蛋白免疫BALB c小鼠,首先通过亲和捕获反转录PCR鉴定免疫小鼠抗血清是否能结合感染HEV恒河猴粪便及胆汁中的病毒颗粒。其次将重组蛋白分别以不同免疫途径、不同佐剂免疫小鼠,通过检测小鼠血清中抗 HEVORF2抗体阳转率及抗体滴度,观察其免疫原性。结果 亲和捕获反转录PCR阳性,表明免疫鼠抗血清可以捕获感染恒河猴粪便及胆汁样品中的HEV。在小鼠免疫实验中,肌内免疫优于腹腔免疫,抗原联合铝佐剂及CpG佐剂优于抗原联合铝佐剂。以抗原联合铝佐剂和CpG佐剂经股四头肌免疫小鼠,4周后加强一次的免疫效果最佳,ED50为0 023μg。实验表明,巴氏毕赤酵母表达的重组HEVORF2蛋白刺激小鼠产生的抗体,不仅可以特异性结合天然HEV,而且该蛋白在小鼠体内可以有效地诱发体液免疫反应。结论 巴氏毕赤酵母表达系统表达的HEVORF2蛋白具有良好的免疫原性,这为新型戊型肝炎疫苗的研制奠定了基础。
中国预防医学科学院病毒学研究所肝炎室 100094.北京 佟玉品；詹美云；鲁健；白玉；毕胜利
关键词：肝炎病毒；戊型；重组蛋白质类；免疫原性；聚合酶链反应；半数有效量
摘要：目的 研究巴氏毕赤酵母表达系统表达的戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)结构区ORF2蛋白的免疫原性。方法 将重组蛋白免疫BALB c小鼠,首先通过亲和捕获反转录PCR鉴定免疫小鼠抗血清是否能结合感染HEV恒河猴粪便及胆汁中的病毒颗粒。其次将重组蛋白分别以不同免疫途径、不同佐剂免疫小鼠,通过检测小鼠血清中抗 HEVORF2抗体阳转率及抗体滴度,观察其免疫原性。结果 亲和捕获反转录PCR阳性,表明免疫鼠抗血清可以捕获感染恒河猴粪便及胆汁样品中的HEV。在小鼠免疫实验中,肌内免疫优于腹腔免疫,抗原联合铝佐剂及CpG佐剂优于抗原联合铝佐剂。以抗原联合铝佐剂和CpG佐剂经股四头肌免疫小鼠,4周后加强一次的免疫效果最佳,ED50为0 023μg。实验表明,巴氏毕赤酵母表达的重组HEVORF2蛋白刺激小鼠产生的抗体,不仅可以特异性结合天然HEV,而且该蛋白在小鼠体内可以有效地诱发体液免疫反应。结论 巴氏毕赤酵母表达系统表达的HEVORF2蛋白具有良好的免疫原性,这为新型戊型肝炎疫苗的研制奠定了基础。
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