抗HFRS病毒单抗1A8鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体的构建及表达
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第四军医大学基础部微生物学教研室 陕西西安710033 白文涛;徐志凯;阎岩;张芳琳;吴兴安;赵茜;尹文;王
肾综合征出血热病毒|嵌合抗体|抗体|单克隆
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第四军医大学基础部微生物学教研室 陕西西安710033 白文涛;徐志凯;阎岩;张芳琳;吴兴安;赵茜;尹文;王海涛;薛小平
关键词:肾综合征出血热病毒;嵌合抗体;抗体;单克隆
摘要:目的 构建抗 HFRS病毒 m Ab 1 A8鼠 /人嵌合 Fab噬菌体抗体表达载体 ,并进行表达 .方法 将抗 HFRS病毒m Ab1 A8的 VH 基因和人重链 CH1基因连接 ,VL 基因和人Cκ 基因连接 ,分别构建了鼠 /人嵌合重链 Fd基因和轻链基因 ,将它们克隆入 p Comb3,构建了鼠 /人嵌合 Fab噬菌体抗体表达载体 .用辅噬菌体 VCSM1 3超感染 ,EL ISA间接夹心法检测抗体活性 .结果 经多种限制性内切酶酶切鉴定载体构建正确 ,ELISA间接夹心法检测超感染上清为阳性 .结论 成功构建了鼠 /人嵌合 Fab噬菌体抗体表达载体 ,并在噬菌体表面表达出可结合 HFRS病毒抗原的鼠 /人嵌合 Fab抗。
第四军医大学基础部微生物学教研室 陕西西安710033 白文涛;徐志凯;阎岩;张芳琳;吴兴安;赵茜;尹文;王海涛;薛小平
关键词:肾综合征出血热病毒;嵌合抗体;抗体;单克隆
摘要:目的 构建抗 HFRS病毒 m Ab 1 A8鼠 /人嵌合 Fab噬菌体抗体表达载体 ,并进行表达 .方法 将抗 HFRS病毒m Ab1 A8的 VH 基因和人重链 CH1基因连接 ,VL 基因和人Cκ 基因连接 ,分别构建了鼠 /人嵌合重链 Fd基因和轻链基因 ,将它们克隆入 p Comb3,构建了鼠 /人嵌合 Fab噬菌体抗体表达载体 .用辅噬菌体 VCSM1 3超感染 ,EL ISA间接夹心法检测抗体活性 .结果 经多种限制性内切酶酶切鉴定载体构建正确 ,ELISA间接夹心法检测超感染上清为阳性 .结论 成功构建了鼠 /人嵌合 Fab噬菌体抗体表达载体 ,并在噬菌体表面表达出可结合 HFRS病毒抗原的鼠 /人嵌合 Fab抗。
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