β-NGF在真核细胞蛋白表达系统中的表达及活性鉴定

http://www.100md.com 天津武警医学院；牡丹江医学院 李贤慧；王桂云；王育强；郭新民

真核表达系统|神经生长因子|生物活性

    参见附件(67kb)。

     天津武警医学院；牡丹江医学院 李贤慧；王桂云；王育强；郭新民

    关键词：真核表达系统；神经生长因子；生物活性

    摘要：目的 :得到较高表达 ,且表达产物具有良好生物学活性的神经生长因子。方法 :将神经胶质源 β -NGF基因克隆于DNA转移载体pBacPAK8中 ,获得重组DNA转移载体pBacPAK -NGF ,与线性化Bm -BacPAK6修饰病毒基因组DNA共转染Bm -N细胞 ,经过体内重组 ,筛选到重组病毒。用重组病毒感染家蚕幼虫 ,经SDS-PAGE检测及利用PC12细胞进行NGF生物活力测定。结果 :感染重组病毒BmNPV -NGF5d的家蚕血淋巴有一条与天然NGF单体分子易相近的蛋白组分 ,且有类似于小鼠 2 .5gNGF的活性。结论 :神经生长因子在家蚕幼虫中得到较高表达 ,且表达产物具有良好的生物学活性 。

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