肾上腺素能β1受体亚型特异性抗体的制备及鉴定
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广州军区广州总医院药学部;中山医科大学药理教研室;广州市药检所 广东广州510089;广东广州510010 任京力
受体|肾上腺素能|β1|多克隆抗体,分离和提纯
参见附件(63kb)。
广州军区广州总医院药学部;中山医科大学药理教研室;广州市药检所 广东广州510089;广东广州510010 任京力;赵树进;杨太成;陈汝筑;孙桂玲
关键词:受体;肾上腺素能;β1;多克隆抗体/分离和提纯
摘要:【目的】制备和鉴定β1受体亚型特异性抗体。【方法】人工合成β1受体细胞膜外第二环197 222位氨基酸序列作为抗原。连接钥孔冒贝血蓝蛋白(KLH)增加抗原性后免疫兔获得抗血清。通过凝胶双扩散实验和ELISA法鉴定其效价;通过免疫荧光法及ELISA法鉴定其特异性;通过离体蛙心灌流实验鉴定其药理活性。【结果】该抗血清效价高(分别为1∶64和1∶106)、特异性强,能和心肌β1受体发生特异性结合(1∶104~1∶105),为异丙肾上腺素的非竞争性拮抗剂。(pD2′=1 62)。【结论】成功制备的β1受体亚型特异性抗体可能成为进一步研究β1受体分布、功能和定量的有力工具。
广州军区广州总医院药学部;中山医科大学药理教研室;广州市药检所 广东广州510089;广东广州510010 任京力;赵树进;杨太成;陈汝筑;孙桂玲
关键词:受体;肾上腺素能;β1;多克隆抗体/分离和提纯
摘要:【目的】制备和鉴定β1受体亚型特异性抗体。【方法】人工合成β1受体细胞膜外第二环197 222位氨基酸序列作为抗原。连接钥孔冒贝血蓝蛋白(KLH)增加抗原性后免疫兔获得抗血清。通过凝胶双扩散实验和ELISA法鉴定其效价;通过免疫荧光法及ELISA法鉴定其特异性;通过离体蛙心灌流实验鉴定其药理活性。【结果】该抗血清效价高(分别为1∶64和1∶106)、特异性强,能和心肌β1受体发生特异性结合(1∶104~1∶105),为异丙肾上腺素的非竞争性拮抗剂。(pD2′=1 62)。【结论】成功制备的β1受体亚型特异性抗体可能成为进一步研究β1受体分布、功能和定量的有力工具。
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