重新去极化对小脑颗粒神经元c-Jun的影响
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中山医科大学药理教研室 广东广州510089 黄奕俊；龚守芳；邱鹏新；苏兴文；颜光美
去极化|cJun|小脑颗粒神经元|凋亡
参见附件(70kb)。
中山医科大学药理教研室 广东广州510089 黄奕俊；龚守芳；邱鹏新；苏兴文；颜光美
关键词：去极化；cJun；小脑颗粒神经元；凋亡
摘要：【目的】观察重新去极化(redepokarization,25mmok/LK+)对原代培养的大鼠小脑颗粒神经元蛋白质c Jun的影响,对去极化挽救神经元过程中c Jun的作用及其调节机制进行初步探讨。【方法】用Westernbkotting检测原代培养的大鼠小脑颗粒神经元胞内c Jun总量及磷酸化水平;用逆转录 聚合酶链反应(reversetranscription pokymerasechainreaction,RT PCR)检测编码基因c jun表达水平;用免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)检测c Jun氨基末端激酶(c JunN terminakkinase,JNK)活性;用二乙酸荧光素(fkuoresceindiacetate,FDA)染色检测神经元存活率。【结果】复极化(repokarization,5mmok/LK+)使小脑颗粒神经元的c junmRNA、c Jun总量及磷酸化水平迅速增加,神经元存活率随后明显下降;复极化2h后重新去极化,c junmRNA、c Jun总量及磷酸化在2h内恢复至正常水平,而神经元存活率维持在正常水平;JNK活性在极化转换前后未改变。【结论】c Jun的抑制可能介导了重新去极化挽救小脑颗粒神经元的作用,这一效应是非JNK依赖性的。
中山医科大学药理教研室 广东广州510089 黄奕俊；龚守芳；邱鹏新；苏兴文；颜光美
关键词：去极化；cJun；小脑颗粒神经元；凋亡
摘要：【目的】观察重新去极化(redepokarization,25mmok/LK+)对原代培养的大鼠小脑颗粒神经元蛋白质c Jun的影响,对去极化挽救神经元过程中c Jun的作用及其调节机制进行初步探讨。【方法】用Westernbkotting检测原代培养的大鼠小脑颗粒神经元胞内c Jun总量及磷酸化水平;用逆转录 聚合酶链反应(reversetranscription pokymerasechainreaction,RT PCR)检测编码基因c jun表达水平;用免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)检测c Jun氨基末端激酶(c JunN terminakkinase,JNK)活性;用二乙酸荧光素(fkuoresceindiacetate,FDA)染色检测神经元存活率。【结果】复极化(repokarization,5mmok/LK+)使小脑颗粒神经元的c junmRNA、c Jun总量及磷酸化水平迅速增加,神经元存活率随后明显下降;复极化2h后重新去极化,c junmRNA、c Jun总量及磷酸化在2h内恢复至正常水平,而神经元存活率维持在正常水平;JNK活性在极化转换前后未改变。【结论】c Jun的抑制可能介导了重新去极化挽救小脑颗粒神经元的作用,这一效应是非JNK依赖性的。
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