逆转录病毒载体介导人载脂蛋白与卵磷脂胆固醇酰基转移酶基因在骨骼肌的异源性共表达
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南京医科大学动脉粥样硬化研究中心 江苏省南京市210029 于书真;范乐明;陈琪;王南;陈秀英;魏恩会
逆转录病毒|载脂蛋白AI|卵磷脂胆固醇酰基转移酶|基因治疗
参见附件(88kb)。
南京医科大学动脉粥样硬化研究中心 江苏省南京市210029 于书真;范乐明;陈琪;王南;陈秀英;魏恩会
关键词:逆转录病毒;载脂蛋白AI;卵磷脂胆固醇酰基转移酶;基因治疗
摘要:为探讨人载脂蛋白AI和卵磷脂胆固醇酰基转移酶基因在肌源性细胞中异源共表达的可能性 ,构建含上述基因和新霉素磷酸转移酶基因的多顺反子重组逆转录病毒载体 ,以此制备重组病毒颗粒并转染小鼠原代肌母细胞及C2C12肌源性细胞株。酶联免疫吸附法和免疫组织化学检测证实转染后的细胞均具有异源共表达人载脂蛋白AI与卵磷脂胆固醇酰基转移酶的能力。经G418筛选则获得稳定转化的C2C12细胞株 ,6 0天后仍能有效共表达人载脂蛋白AI与卵磷脂胆固醇酰基转移酶。聚合酶链反应法检测显示人载脂蛋白AIcDNA与IRES序列均有效整合于靶细胞基因组中。提示以重组逆转录病毒...
南京医科大学动脉粥样硬化研究中心 江苏省南京市210029 于书真;范乐明;陈琪;王南;陈秀英;魏恩会
关键词:逆转录病毒;载脂蛋白AI;卵磷脂胆固醇酰基转移酶;基因治疗
摘要:为探讨人载脂蛋白AI和卵磷脂胆固醇酰基转移酶基因在肌源性细胞中异源共表达的可能性 ,构建含上述基因和新霉素磷酸转移酶基因的多顺反子重组逆转录病毒载体 ,以此制备重组病毒颗粒并转染小鼠原代肌母细胞及C2C12肌源性细胞株。酶联免疫吸附法和免疫组织化学检测证实转染后的细胞均具有异源共表达人载脂蛋白AI与卵磷脂胆固醇酰基转移酶的能力。经G418筛选则获得稳定转化的C2C12细胞株 ,6 0天后仍能有效共表达人载脂蛋白AI与卵磷脂胆固醇酰基转移酶。聚合酶链反应法检测显示人载脂蛋白AIcDNA与IRES序列均有效整合于靶细胞基因组中。提示以重组逆转录病毒...
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