突变型端粒酶逆转录酶基因转染对膀胱癌细胞T24增殖的影响

http://www.100md.com 第四军医大学西京医院泌尿外科 符伟军；黄君健；徐兵；邵国兴；王禾；黄翠芬

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     第四军医大学西京医院泌尿外科 符伟军；黄君健；徐兵；邵国兴；王禾；黄翠芬

    关键词：膀胱肿瘤；端粒酶；转染；基因

    摘要：目的 探讨转染缺失突变的人端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因对膀胱癌细胞株T2 4端粒酶活性和体外增殖的影响 ,为膀胱肿瘤基因治疗提供新的基因靶点。 方法 采用DNA 磷酸钙共沉淀法 ,将绿色荧光蛋白基因标记的含突变型hTERT真核表达载体 pEGFP hTERT导入人膀胱癌细胞株T2 4中。应用荧光显微镜、端粒酶PCR ELISA法、与衰老相关的 β 半乳糖苷酶染色、软琼脂集落形成试验、裸鼠皮下成瘤试验等方法动态观察转染细胞中端粒酶活性及对细胞恶性表型的影响。 结果 在转染 pEGFP hTERT细胞中可见与突变型hTERT基因融合的绿色荧光蛋白稳定表达于细胞核内 ,转染细...

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