p33~(ING1b)真核表达载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制作用
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第二军医大学附属长海医院病理科 200433上海 祝峙;朱明华;倪灿荣;李芳梅
肝肿瘤|p33~(ING1b)基因|基因治疗|转染
参见附件(132kb)。
第二军医大学附属长海医院病理科 200433上海 祝峙;朱明华;倪灿荣;李芳梅
关键词:肝肿瘤;p33~(ING1b)基因;基因治疗;转染
摘要:目的 构建pCDNA3/ p33ING1b真核表达质粒并探讨其对肝癌细胞SMMU772 1生长的抑制作用。方法 将 p33ING1bcDNA正反义亚克隆至pCDNA3真核表达载体上 ,并经磷酸钙共沉淀法分别转染至SMMU772 1细胞中。转染后 48h,用 0 .8g/LG41 8筛选出阳性克隆 ,检测转染后细胞的生长曲线和软琼脂克隆形成率的变化及应用流式细胞仪分析细胞凋亡率的改变。结果 重组 pCDNA3/ p33ING1b正反义表达质粒构建成功。经正义 p33ING1b质粒转染的SMMU772 1细胞生长速度减慢 ,快速增长期比对照组推迟 2d ,软琼脂克隆形成率为 (69.0± 1 2 .0 )‰ ,较转染空载体(90 .0± 1 0 .5)‰...
第二军医大学附属长海医院病理科 200433上海 祝峙;朱明华;倪灿荣;李芳梅
关键词:肝肿瘤;p33~(ING1b)基因;基因治疗;转染
摘要:目的 构建pCDNA3/ p33ING1b真核表达质粒并探讨其对肝癌细胞SMMU772 1生长的抑制作用。方法 将 p33ING1bcDNA正反义亚克隆至pCDNA3真核表达载体上 ,并经磷酸钙共沉淀法分别转染至SMMU772 1细胞中。转染后 48h,用 0 .8g/LG41 8筛选出阳性克隆 ,检测转染后细胞的生长曲线和软琼脂克隆形成率的变化及应用流式细胞仪分析细胞凋亡率的改变。结果 重组 pCDNA3/ p33ING1b正反义表达质粒构建成功。经正义 p33ING1b质粒转染的SMMU772 1细胞生长速度减慢 ,快速增长期比对照组推迟 2d ,软琼脂克隆形成率为 (69.0± 1 2 .0 )‰ ,较转染空载体(90 .0± 1 0 .5)‰...
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