血管内皮生长因子部分多肽抗血管生成的研究
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第一军医大学细胞生物教研室;南方医院消化病研究所 510515广州 李先茂;曾位森;张亚历
血管内皮生长因子|基因克隆|基因表达|聚合酶链反应|DNA序列分析
参见附件(42kb)。
第一军医大学细胞生物教研室;南方医院消化病研究所 510515广州 李先茂;曾位森;张亚历
关键词:血管内皮生长因子;基因克隆;基因表达;聚合酶链反应;DNA序列分析
摘要:目的 观察血管内皮生长因子 (VEGF)部分多肽 (3 4外显子 )抗血管生成的作用。方法抽提LoVo细胞总RNA ,进行RT PCR ,克隆VEGF部分多肽cDNA ,构建VEGF部分多肽原核表达载体 ,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定 ;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分析表达产物。表达产物经亲和层析纯化后 ,以人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)和鸡胚尿囊膜 (CAM)血管测定其生物学活性。结果 表达产物以可溶性分子形式存在于菌体中 ,具有良好的抗原性和特异性 ,并具有抑制HUVEC增殖及CAM血管形成的活性。结论 VEGF部分多肽具有竞争抑制血管生成的功能 ,在肿瘤生物靶向治疗中具有一 .
第一军医大学细胞生物教研室;南方医院消化病研究所 510515广州 李先茂;曾位森;张亚历
关键词:血管内皮生长因子;基因克隆;基因表达;聚合酶链反应;DNA序列分析
摘要:目的 观察血管内皮生长因子 (VEGF)部分多肽 (3 4外显子 )抗血管生成的作用。方法抽提LoVo细胞总RNA ,进行RT PCR ,克隆VEGF部分多肽cDNA ,构建VEGF部分多肽原核表达载体 ,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定 ;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分析表达产物。表达产物经亲和层析纯化后 ,以人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)和鸡胚尿囊膜 (CAM)血管测定其生物学活性。结果 表达产物以可溶性分子形式存在于菌体中 ,具有良好的抗原性和特异性 ,并具有抑制HUVEC增殖及CAM血管形成的活性。结论 VEGF部分多肽具有竞争抑制血管生成的功能 ,在肿瘤生物靶向治疗中具有一 .
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