荧光定量ＰＣＲ检测鼻咽部脱落细胞内ＥＢＶ ＤＮＡ
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南京医科大学第一附属医院临床检验中心,南京210029 张明,童明庆,潘世扬,黄王君,赵旺胜
荧光定量ＰＣＲ|细胞内参照|β珠蛋白|ＥＢＶＤＮＡ|鼻咽癌 ,荧光定量ＰＣＲ检测鼻咽部脱落细胞内ＥＢＶＤＮＡ
参见附件(33kb)。
南京医科大学第一附属医院临床检验中心,南京210029 张明,童明庆,潘世扬,黄王君,赵旺胜
关键词：荧光定量PCR；细胞内参照；β 珠蛋白；EBV DNA；鼻咽癌
摘要：目的 建立荧光定量PCR(FQ PCR)检测鼻咽部脱落细胞中EBV DNA的方法。方法 以患者鼻咽部脱落细胞内DNA作为样本,以EB病毒基因序列中EBNA1(核抗原1)基因片段作为扩增的靶DNA,同时以人β 珠蛋白DNA片段作为内参照,合成了两对引物,并设计了两个特异的荧光探针,优化了FQ PCR反应体系,同时对这两个片段进行扩增,每一标本得到两个Ct值:CtE和Ctβ,计算CtE/Ctβ,得到单位细胞EB病毒的相对量。结果 临床标本29例中,阳性22例,阴性7例,临床资料证实阳性者全部为鼻咽癌(NPC),阴性者全部为非鼻咽癌。结论 建立的FQ PCR检测鼻咽部脱落细胞中EBV DNA的方法,能反映单位细胞病毒的复制情况,可用于NPC的筛查,并可能应用于该病的风险评估和疗效观察。
南京医科大学第一附属医院临床检验中心,南京210029 张明,童明庆,潘世扬,黄王君,赵旺胜
关键词：荧光定量PCR；细胞内参照；β 珠蛋白；EBV DNA；鼻咽癌
摘要：目的 建立荧光定量PCR(FQ PCR)检测鼻咽部脱落细胞中EBV DNA的方法。方法 以患者鼻咽部脱落细胞内DNA作为样本,以EB病毒基因序列中EBNA1(核抗原1)基因片段作为扩增的靶DNA,同时以人β 珠蛋白DNA片段作为内参照,合成了两对引物,并设计了两个特异的荧光探针,优化了FQ PCR反应体系,同时对这两个片段进行扩增,每一标本得到两个Ct值:CtE和Ctβ,计算CtE/Ctβ,得到单位细胞EB病毒的相对量。结果 临床标本29例中,阳性22例,阴性7例,临床资料证实阳性者全部为鼻咽癌(NPC),阴性者全部为非鼻咽癌。结论 建立的FQ PCR检测鼻咽部脱落细胞中EBV DNA的方法,能反映单位细胞病毒的复制情况,可用于NPC的筛查,并可能应用于该病的风险评估和疗效观察。
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