Eu标记RT-PCR检测丙型肝炎病毒RNA
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南京医科大学第一附属医院临床检验中心 江苏南京210029 赵智凝；童明庆；潘世扬；黄珮珺；赵旺胜
时间分辨荧光法|铕螯合物|逆转录聚合酶链反应|杂交
参见附件(39kb)。
南京医科大学第一附属医院临床检验中心 江苏南京210029 赵智凝；童明庆；潘世扬；黄珮珺；赵旺胜
关键词：时间分辨荧光法；铕螯合物；逆转录聚合酶链反应；杂交
摘要：目的 采用一种新的铕螯合物BHHCT ,制备高灵敏度荧光标记物 ,建立检测丙型肝炎病毒 (HCV)RNA的方法。方法 采用柱层析纯化的方法抽提血清中HCVRNA。以 5′端带有生物素的引物进行RT PCRTth酶一步法扩增 ,通过固定于微孔板上的捕获探针与带有生物素的PCR扩增产物杂交后 ,利用标记有铕的链霉亲合素与生物素的特异性结合 ,将铕连接到待测核酸上 ,在特定波长的激发光激发下发出荧光 ,进行检测。结果 铕标记检测法与酶标法的变异系数、敏感性、特异性分别为10 .43%、10 0 %,10 0 %与 16 .2 5 %,94%,10 0 %。结论 Eu标记RT PCRTth酶一步法检测HCVRNA ,具...
南京医科大学第一附属医院临床检验中心 江苏南京210029 赵智凝；童明庆；潘世扬；黄珮珺；赵旺胜
关键词：时间分辨荧光法；铕螯合物；逆转录聚合酶链反应；杂交
摘要：目的 采用一种新的铕螯合物BHHCT ,制备高灵敏度荧光标记物 ,建立检测丙型肝炎病毒 (HCV)RNA的方法。方法 采用柱层析纯化的方法抽提血清中HCVRNA。以 5′端带有生物素的引物进行RT PCRTth酶一步法扩增 ,通过固定于微孔板上的捕获探针与带有生物素的PCR扩增产物杂交后 ,利用标记有铕的链霉亲合素与生物素的特异性结合 ,将铕连接到待测核酸上 ,在特定波长的激发光激发下发出荧光 ,进行检测。结果 铕标记检测法与酶标法的变异系数、敏感性、特异性分别为10 .43%、10 0 %,10 0 %与 16 .2 5 %,94%,10 0 %。结论 Eu标记RT PCRTth酶一步法检测HCVRNA ,具...
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