PCR-RFLP法检测肿瘤坏死因子受体基因多态性

http://www.100md.com 南通医学院附属医院检验科 江苏南通226001；南通医学院微生物学与免疫学教研室 王小飞；钱绩虎；王惠民

肿瘤坏死因子受体|多态性|聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析

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     南通医学院附属医院检验科 江苏南通226001；南通医学院微生物学与免疫学教研室 王小飞；钱绩虎；王惠民

    关键词：肿瘤坏死因子受体；多态性；聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析

    摘要：目的 建立聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 (PCR -RFLP)检测肿瘤坏死因子受体Ⅱ (TNFR2 )第 6外显子基因多态性的方法。方法 用碘化钾法从外周血白细胞中提取基因组DNA ,PCR扩增其TNFR2包括编码 196位氨基酸残基在内的第 6外显子基因 ,扩增产物用限制性内切酶NIaⅢ酶切后干含溴化乙锭的 35 g/L琼脂糖凝胶中电泳 ,紫外灯下直接观察TNFR2的基因型。结果 通过观察电泳条带可确定TNFR2的三种基因型 ,196R/R纯合子、196M/M纯合子、196M/R杂合子分别出现一、二、三条条带 ;江苏地区健康汉族人TNFR2第 6外显子各基因型的频率为 :196M /M 6 1 6 %,19 ...

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