恶性疟原虫HT1基因荧光真核表达载体的构建及细胞内表达
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中山医科大学寄生虫学教研室 广州510089 徐劲；余新炳；叶苓；陆家海
绿色荧光蛋白|DNA疫苗|基因转染|恶性疟原虫|已糖转运体|基因表达
参见附件(114kb)。
中山医科大学寄生虫学教研室 广州510089 徐劲；余新炳；叶苓；陆家海
关键词：绿色荧光蛋白；DNA疫苗；基因转染；恶性疟原虫；已糖转运体；基因表达
摘要：目的 体外扩增恶性疟原虫海南分离株的已糖转运体基因 (pfHT1) ,构建恶性疟原虫HT1基因真核融合表达载体并检测其表达情况 ,为用于DNA免疫作准备。方法 特定PCR引物的设计 ,扩增 ,基因组DNA提取 ,连接 ,鉴定 ,细胞培养 ,脂质体转染 ,荧光显微镜观察。结果 从恶性疟原虫海南分离株基因组DNA中扩增特异的编码 pfHT1的基因序列 ,片断大小为 15 16bp ,经酶切鉴定证实成功构建 pEGFP -HT1融合表达质粒 ,将其转染体外培养的细胞后 ,可见融合蛋白表达产生的明亮的绿色荧光。结论 成功构建 pEGFP -HT1融合表达质粒 ,并实现在细胞内的表达。为进行动物体内的 ...
中山医科大学寄生虫学教研室 广州510089 徐劲；余新炳；叶苓；陆家海
关键词：绿色荧光蛋白；DNA疫苗；基因转染；恶性疟原虫；已糖转运体；基因表达
摘要：目的 体外扩增恶性疟原虫海南分离株的已糖转运体基因 (pfHT1) ,构建恶性疟原虫HT1基因真核融合表达载体并检测其表达情况 ,为用于DNA免疫作准备。方法 特定PCR引物的设计 ,扩增 ,基因组DNA提取 ,连接 ,鉴定 ,细胞培养 ,脂质体转染 ,荧光显微镜观察。结果 从恶性疟原虫海南分离株基因组DNA中扩增特异的编码 pfHT1的基因序列 ,片断大小为 15 16bp ,经酶切鉴定证实成功构建 pEGFP -HT1融合表达质粒 ,将其转染体外培养的细胞后 ,可见融合蛋白表达产生的明亮的绿色荧光。结论 成功构建 pEGFP -HT1融合表达质粒 ,并实现在细胞内的表达。为进行动物体内的 ...
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