用噬菌体肽库筛选重组日本血吸虫线粒体相关蛋白的表位
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山东滨州医学院免疫学教研室;分子免疫寄生虫学研究室;南京医科大学分子生物学研究所;分子免疫寄生虫学研
噬菌体肽库|表位|日本血吸虫|线粒体|融合蛋白
参见附件(84kb)。
山东滨州医学院免疫学教研室;分子免疫寄生虫学研究室;南京医科大学分子生物学研究所;分子免疫寄生虫学研究室 胡雪梅;张兆松;吴海玮;李春林;苏川;季旻珺;王诗宁;王勇;吴观陵
关键词:噬菌体肽库;表位;日本血吸虫;线粒体;融合蛋白
摘要:目的 筛选和鉴定重组的日本血吸虫 (中国大陆株 )线粒体相关蛋白rSj338的表位。方法 用纯化的rSj338 2 6GST免疫家兔获得抗rSj338 2 6GST的多克隆抗体IgG ,将抗体进一步纯化 ,获得抗rSj338单特异多克隆抗体IgG。用纯化抗rSj338抗体对噬菌体 12肽库进行 5轮免疫学筛选 ,挑取克隆 ;采用Westernblot免疫识别 ,核苷酸序列测定分析其获得的表位并与rSj338 2 6GST进行同源性比较。将获得的不同表位的阳性克隆分别免疫小鼠 ,并采用Westernblot及dot ELISA方法筛选能刺激小鼠产生较高滴度抗rSj338抗体的阳性克隆。并将阳性噬菌体免疫的小鼠血清对纯化的rSj338 ...
山东滨州医学院免疫学教研室;分子免疫寄生虫学研究室;南京医科大学分子生物学研究所;分子免疫寄生虫学研究室 胡雪梅;张兆松;吴海玮;李春林;苏川;季旻珺;王诗宁;王勇;吴观陵
关键词:噬菌体肽库;表位;日本血吸虫;线粒体;融合蛋白
摘要:目的 筛选和鉴定重组的日本血吸虫 (中国大陆株 )线粒体相关蛋白rSj338的表位。方法 用纯化的rSj338 2 6GST免疫家兔获得抗rSj338 2 6GST的多克隆抗体IgG ,将抗体进一步纯化 ,获得抗rSj338单特异多克隆抗体IgG。用纯化抗rSj338抗体对噬菌体 12肽库进行 5轮免疫学筛选 ,挑取克隆 ;采用Westernblot免疫识别 ,核苷酸序列测定分析其获得的表位并与rSj338 2 6GST进行同源性比较。将获得的不同表位的阳性克隆分别免疫小鼠 ,并采用Westernblot及dot ELISA方法筛选能刺激小鼠产生较高滴度抗rSj338抗体的阳性克隆。并将阳性噬菌体免疫的小鼠血清对纯化的rSj338 ...
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