人B7-2(CD86)IgV+C段高效原核表达及活性测定
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西安交通大学医学院免疫病理研究室 闫晓彩；司履生；王一理；来宝长；耿宜萍
B7-2分子|共刺激|基因表达|融合蛋白
参见附件(40kb)。
西安交通大学医学院免疫病理研究室 闫晓彩；司履生；王一理；来宝长；耿宜萍
关键词：B7-2分子；共刺激；基因表达；融合蛋白
摘要：目的 克隆、表达B7 2 (IgV +C)并进行体外功能测定。方法 用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7 2cDNA中克隆B7 2 (IgV +C) ,在此基础上构建表达B7 2 (IgV +C)的原核表达载体pGEX 4T 3 hB7 2 (IgV +C) ;SDS PAGE检测蛋白表达 ,蛋白经变性、复性后在体外协同抗CD3单抗刺激人T细胞 ,3 H TdR掺入法检测T细胞的活化程度。结果 在原核表达载体中成功地克隆了B7 2 (IgV +C) ,SDS PAGE表明在相对分子质量 (Mr) 5 5× 10 3 处有hB7 2 (IgV +C) GST融合蛋白的高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白的 33%。体外实验证明 ,此融合蛋白可协同抗CD3单抗刺激人T细胞活化。结论 ...
西安交通大学医学院免疫病理研究室 闫晓彩；司履生；王一理；来宝长；耿宜萍
关键词：B7-2分子；共刺激；基因表达；融合蛋白
摘要：目的 克隆、表达B7 2 (IgV +C)并进行体外功能测定。方法 用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7 2cDNA中克隆B7 2 (IgV +C) ,在此基础上构建表达B7 2 (IgV +C)的原核表达载体pGEX 4T 3 hB7 2 (IgV +C) ;SDS PAGE检测蛋白表达 ,蛋白经变性、复性后在体外协同抗CD3单抗刺激人T细胞 ,3 H TdR掺入法检测T细胞的活化程度。结果 在原核表达载体中成功地克隆了B7 2 (IgV +C) ,SDS PAGE表明在相对分子质量 (Mr) 5 5× 10 3 处有hB7 2 (IgV +C) GST融合蛋白的高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白的 33%。体外实验证明 ,此融合蛋白可协同抗CD3单抗刺激人T细胞活化。结论 ...
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