结肠癌患者淋巴结构建抗结肠癌噬菌体Fab抗体库
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第一军医大学南方医院全军消化内科研究所 吴保平;肖冰;万田谟;张亚历;张振书;周殿元;高春芳;赖卓胜
参见附件(52kb)。
第一军医大学南方医院全军消化内科研究所 吴保平;肖冰;万田谟;张亚历;张振书;周殿元;高春芳;赖卓胜
关键词:结肠癌;噬菌体表面呈现;抗体库
摘要:目的 构建 2个结肠癌患者自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库。方法 取 2个结肠癌患者转移淋巴结 ,提取淋巴结总RNA ,逆转录PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物插入载体 pComb3的相应部位 ,噬菌体VCSM13辅助感染。以点印迹检测噬菌体表面Fab的表达。 结果 所选 2种Ig亚类的重链Fd片段、2种κ轻链cDNA得到扩增。Fd片段和κ轻链均插入 pComb3的重组率为 40 %,Fab噬菌体表达库容量达 1.48× 10 6。噬菌体悬液的点印迹免疫染色显示有Fab表达。结论 构建了 2个结肠癌患者自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库 ,为筛选结肠癌相关抗体奠定了基础 ...
第一军医大学南方医院全军消化内科研究所 吴保平;肖冰;万田谟;张亚历;张振书;周殿元;高春芳;赖卓胜
关键词:结肠癌;噬菌体表面呈现;抗体库
摘要:目的 构建 2个结肠癌患者自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库。方法 取 2个结肠癌患者转移淋巴结 ,提取淋巴结总RNA ,逆转录PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物插入载体 pComb3的相应部位 ,噬菌体VCSM13辅助感染。以点印迹检测噬菌体表面Fab的表达。 结果 所选 2种Ig亚类的重链Fd片段、2种κ轻链cDNA得到扩增。Fd片段和κ轻链均插入 pComb3的重组率为 40 %,Fab噬菌体表达库容量达 1.48× 10 6。噬菌体悬液的点印迹免疫染色显示有Fab表达。结论 构建了 2个结肠癌患者自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库 ,为筛选结肠癌相关抗体奠定了基础 ...
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