免疫磁珠法分离白血病转基因小鼠骨髓造血干细胞
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上海第二医科大学附属瑞金医院分子医学诊断中心；上海铁路中心医院血液科；上海转基因动物实验中心；上海血
转基因小鼠|骨髓|造血干细胞|磁吸附细胞分选(免疫磁珠法)|流式细胞术
参见附件(33kb)。
上海第二医科大学附属瑞金医院分子医学诊断中心；上海铁路中心医院血液科；上海转基因动物实验中心；上海血液学研究所上海200072 曹文俊；王立；周隽；孟秀琴；成国祥；陈竺；陈赛娟
关键词：转基因小鼠；骨髓；造血干细胞；磁吸附细胞分选(免疫磁珠法)；流式细胞术
摘要：本文分离转基因小鼠骨髓造血干细胞。运用针对小鼠干细胞表面特异表达的干细胞抗原 1(stemcellantigen 1,Sca 1)的单克隆抗体和包被于磁颗粒表面的第二抗体 ,采用磁吸附细胞分选方法 (MACS )分离小鼠骨髓造血干细胞 ,用流式细胞术 (FACS )检测MACS分离后骨髓细胞中干细胞 (Sca 1阳性细胞 )比例 ,监测细胞分选效果。结果显示MACS分离后骨髓细胞中Sca 1阳性细胞所占比例达 85 %以上 ,涂片观察发现细胞组成和细胞形态学特征与FACS所得结果一致。MACS可以从转基因小鼠全骨髓细胞中分离出Sca 1阳性的骨髓造血干细胞 ,细胞纯度可达 85 %以上。
上海第二医科大学附属瑞金医院分子医学诊断中心；上海铁路中心医院血液科；上海转基因动物实验中心；上海血液学研究所上海200072 曹文俊；王立；周隽；孟秀琴；成国祥；陈竺；陈赛娟
关键词：转基因小鼠；骨髓；造血干细胞；磁吸附细胞分选(免疫磁珠法)；流式细胞术
摘要：本文分离转基因小鼠骨髓造血干细胞。运用针对小鼠干细胞表面特异表达的干细胞抗原 1(stemcellantigen 1,Sca 1)的单克隆抗体和包被于磁颗粒表面的第二抗体 ,采用磁吸附细胞分选方法 (MACS )分离小鼠骨髓造血干细胞 ,用流式细胞术 (FACS )检测MACS分离后骨髓细胞中干细胞 (Sca 1阳性细胞 )比例 ,监测细胞分选效果。结果显示MACS分离后骨髓细胞中Sca 1阳性细胞所占比例达 85 %以上 ,涂片观察发现细胞组成和细胞形态学特征与FACS所得结果一致。MACS可以从转基因小鼠全骨髓细胞中分离出Sca 1阳性的骨髓造血干细胞 ,细胞纯度可达 85 %以上。
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