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编号:10201099
棉铃虫单核衣壳核多角体病毒几丁质酶基因的克隆与表达
http://www.100md.com 中国科学院武汉病毒研究所无脊椎动物病毒学联合实验室 湖北武汉430071 吴东;王华林;邓菲;陈新文;彭辉银
棉铃虫单核衣壳核多角体病毒|几丁质酶|克隆|表达
    参见附件(63kb)。

     中国科学院武汉病毒研究所无脊椎动物病毒学联合实验室 湖北武汉430071 吴东;王华林;邓菲;陈新文;彭辉银;胡志红

    关键词:棉铃虫单核衣壳核多角体病毒;几丁质酶;克隆;表达

    摘要:根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒 (HaSNPV)几丁质酶基因的序列 ,设计引物 ,引入适当的酶切位点 ,利用PCR扩增出不含N末端信号肽以及C末端内质网定位肽的几丁质酶基因片段。将该基因片断克隆至原核表达载体 pProEXHTb ,经IPTG诱导 ,在大肠杆菌DH5α中获得了高效表达 ,表达产物的大小为 6 0kD ,含量占菌体总蛋白量的 4 0 %。利用来源于AcMNPV几丁质酶的抗体对表达蛋白进行检测 ,获得特异性的显色信号 ,证实所获原核表达产物与杆状病毒的几丁质酶具有同源性...

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