乙肝病毒核心启动子部分缺失对其活性及X蛋白转式激活作用的影响
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第一军医大学南方医院感染内科 510515广州 彭劼;骆抗先;郭亚兵;侯金林;陈金军
乙型肝炎病毒|核心启动子|缺失变异|表达载体|转染
参见附件(40kb)。
第一军医大学南方医院感染内科 510515广州 彭劼;骆抗先;郭亚兵;侯金林;陈金军
关键词:乙型肝炎病毒;核心启动子;缺失变异;表达载体;转染
摘要:目的 研究乙型肝炎病毒 (HBV) 2 0 / 2 1bp缺失 (nt 174 8/ 174 7~nt 176 7)的核心启动子(CP)的活性及CP部分缺失对X蛋白转式激活作用的影响。方法 将HBVCPnt16 0 1~ 186 0区段克隆到氯霉素乙酰转移酶 (CAT)报告基因表达载体 (pCAT3 Basic)上 ,构建重组pCAT3质粒 (2 0d pCAT3、2 1d pCAT3、wt pCAT3)转染HepG2细胞以检测CP活性。将wt pCAT3与野毒株型或CP 2 0 / 2 1bp部分缺失的含 1.2拷贝HBV全基因重组质粒 (P3.8Ⅰ、2 0d P3.8Ⅰ、2 1d P3.8Ⅰ )共转染HepG2细胞以检测X蛋白的转式激活作用。ELISA方法检测CAT表达量。结果 PCR扩增和双酶切初步筛选...
第一军医大学南方医院感染内科 510515广州 彭劼;骆抗先;郭亚兵;侯金林;陈金军
关键词:乙型肝炎病毒;核心启动子;缺失变异;表达载体;转染
摘要:目的 研究乙型肝炎病毒 (HBV) 2 0 / 2 1bp缺失 (nt 174 8/ 174 7~nt 176 7)的核心启动子(CP)的活性及CP部分缺失对X蛋白转式激活作用的影响。方法 将HBVCPnt16 0 1~ 186 0区段克隆到氯霉素乙酰转移酶 (CAT)报告基因表达载体 (pCAT3 Basic)上 ,构建重组pCAT3质粒 (2 0d pCAT3、2 1d pCAT3、wt pCAT3)转染HepG2细胞以检测CP活性。将wt pCAT3与野毒株型或CP 2 0 / 2 1bp部分缺失的含 1.2拷贝HBV全基因重组质粒 (P3.8Ⅰ、2 0d P3.8Ⅰ、2 1d P3.8Ⅰ )共转染HepG2细胞以检测X蛋白的转式激活作用。ELISA方法检测CAT表达量。结果 PCR扩增和双酶切初步筛选...
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