AAV载体质粒介导的荧光素酶shRNA抑制其在哺乳动物细胞中的表达

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RNA干扰|荧光素酶|短发夹环RNA|U6snRNA启动子

    参见附件(45kb)。

     广州南方医院血液科；中国预防医学科学院病毒学研究所基因室；解放军总医院老年心内科；本元正阳基因技术股份有限公司 马鑫；鲁晓春；彭建强；谭淑萍；袁振华；尹芳；王宏；吴小兵；侯云德

    关键词：RNA干扰；荧光素酶；短发夹环RNA；U6snRNA启动子

    摘要：目的 构建荧光素酶短发夹环产生质粒在BHK 2 1细胞中抑制荧光素酶的表达。方法 从人基因组DNA中用PCR方法调出人U6snRNA启动子 ,接以被 9bp序列间隔的 2 1bp荧光素酶靶序列的反向重复序列 ,置于AAV载体质粒pSNAV中 ,构建成荧光素酶短发夹环RNA(shRNA)产生质粒pSNAV U6 Luc。与pMAMneoLuc质粒共转染BHK 2 1细胞 ,检测其对荧光素酶表达的影响。并且单独转染荧光素酶细胞株 ,检测其抑制荧光素酶表达的效果。结果 pSNAV U6 Luc对共转染的pMAMneoLuc中荧光素酶的表达抑制 5 0 % ,而对荧光素酶细胞株中荧光素酶的表达抑制 70 %。结论 实验表明荧光素酶s...

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