在翻译水平上提高人干扰素α1基因的原核表达
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同济医科大学微生物教研室；中国预防医学科学院病毒学研究所 武汉430030 王晶；朱千政；陈望秋；陈秀珠；侯
干扰素α|基因表达|RNA|信使|翻译|遗传|聚合酶链反应
参见附件(71kb)。
同济医科大学微生物教研室；中国预防医学科学院病毒学研究所 武汉430030 王晶；朱千政；陈望秋；陈秀珠；侯云德
关键词：干扰素α；基因表达；RNA；信使；翻译；遗传；聚合酶链反应
摘要：目的 根据翻译起始调控的定量理论及利用翻译增强子序列 ,提高人干扰素α1型变种IFN α1C基因的原核表达。方法 采用"步移式"聚合酶链反应 (PCR) ,对IFN α1C基因 5′端核苷酸序列进行三种不同程度的碱基突变 ,使IFN α1C在pBV2 2 0载体中形成的翻译起始区域 (TIR)的二级结构自由能 (△G)逐渐降低 ,同时 ,采用PCR技术 ,将翻译增强子cDNA序列引入pBV2 2 0中的SD序列上游 ,构建一种新型载体pBVE。结果 三种IFN α1C改造基因的表达量均有所提高 ,而且随△G从原有的 - 5 0 2 4 1.6J mol降至 - 2 2 190 .0J mol(绝对值 ,下同 ) ,其表达量有逐渐升高趋势...
同济医科大学微生物教研室；中国预防医学科学院病毒学研究所 武汉430030 王晶；朱千政；陈望秋；陈秀珠；侯云德
关键词：干扰素α；基因表达；RNA；信使；翻译；遗传；聚合酶链反应
摘要：目的 根据翻译起始调控的定量理论及利用翻译增强子序列 ,提高人干扰素α1型变种IFN α1C基因的原核表达。方法 采用"步移式"聚合酶链反应 (PCR) ,对IFN α1C基因 5′端核苷酸序列进行三种不同程度的碱基突变 ,使IFN α1C在pBV2 2 0载体中形成的翻译起始区域 (TIR)的二级结构自由能 (△G)逐渐降低 ,同时 ,采用PCR技术 ,将翻译增强子cDNA序列引入pBV2 2 0中的SD序列上游 ,构建一种新型载体pBVE。结果 三种IFN α1C改造基因的表达量均有所提高 ,而且随△G从原有的 - 5 0 2 4 1.6J mol降至 - 2 2 190 .0J mol(绝对值 ,下同 ) ,其表达量有逐渐升高趋势...
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