日本血吸虫Calpain序列分析及DNA疫苗体系的构建

http://www.100md.com 深圳市卫生防疫站；华中科技大学同济医学院；华南农业大学 深圳518020 周爱琴；张仁利；石淑华；龙彩虹；高

日本血吸虫|DNA疫苗|Calpain

    参见附件(75kb)。

     深圳市卫生防疫站；华中科技大学同济医学院；华南农业大学 深圳518020 周爱琴；张仁利；石淑华；龙彩虹；高世同；林敏；吴少庭

    关键词：日本血吸虫；DNA疫苗；Calpain

    摘要：目的 探讨日本血吸虫疫苗候选分子 -钙离子激活的中性蛋白激酶 (Calpain)在抗日本血吸虫感染的保护性作用及其保护性免疫机制。方法 从日本血吸虫成虫中提取RNA ,用RT -PCR扩增Calpain含多个B ,T细胞表位的片段 ,引物中包含BamHI和EcoRI的酶切位点 ,PCR扩增产物经纯化后TA克隆 ,转化的阳性TA克隆经PCR筛选后 ,液体培养大肠杆菌并回收质粒DNA ,质粒DNA经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切 ,目的基因亚克隆到真核表达质粒pVAC载体 ,构建 pVAC -Cal pain真核表达体系 ,转化的阳性亚克隆经PCR筛选 ,液体培养大肠杆菌并回收pVAC -Calpain质粒DNA ,质粒DNA经BamHⅠ和Eco ...

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