致肾盂肾炎大肠杆菌粘附素papG基因克隆及序列分析
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天津医科大学微生物教研室；福建医科大学基因工程研究室 天津300070 郑铃；陈锦英；陈贻锴；詹丽钦
肾盂肾炎|大肠杆菌|papG|序列分析
参见附件(90kb)。
天津医科大学微生物教研室；福建医科大学基因工程研究室 天津300070 郑铃；陈锦英；陈贻锴；詹丽钦
关键词：肾盂肾炎；大肠杆菌；papG；序列分析
摘要：目的 克隆F13型致肾盂肾炎大肠杆菌 (UPEC) 132株的粘附素基因papG并作序列分析。 方法 根据Ⅰ型papG(papGJ96 )和Ⅱ型 papG(papGIA2 )基因序列设计 3条引物 ,PG2和PG3分别为下游 3'端引物 ,PG1为两型papG上游 5'端共用引物 ,并在各引物 5'端加入限制性内切酶位点。以UPEC132染色体DNA为模板进行PCR扩增 ,将扩增产物克隆入质粒载体 ,筛选阳性重组质粒作序列分析。结果 UPEC132株以Ⅰ型 papG引物扩增时为阴性结果 ,以Ⅱ型 papG引物扩增时可获得约 110 0bp的DNA片段。扩增产物经克隆获得阳性重组质粒 pGC39和pGC10 3,对其序列分析显示 papG132编码3...
天津医科大学微生物教研室；福建医科大学基因工程研究室 天津300070 郑铃；陈锦英；陈贻锴；詹丽钦
关键词：肾盂肾炎；大肠杆菌；papG；序列分析
摘要：目的 克隆F13型致肾盂肾炎大肠杆菌 (UPEC) 132株的粘附素基因papG并作序列分析。 方法 根据Ⅰ型papG(papGJ96 )和Ⅱ型 papG(papGIA2 )基因序列设计 3条引物 ,PG2和PG3分别为下游 3'端引物 ,PG1为两型papG上游 5'端共用引物 ,并在各引物 5'端加入限制性内切酶位点。以UPEC132染色体DNA为模板进行PCR扩增 ,将扩增产物克隆入质粒载体 ,筛选阳性重组质粒作序列分析。结果 UPEC132株以Ⅰ型 papG引物扩增时为阴性结果 ,以Ⅱ型 papG引物扩增时可获得约 110 0bp的DNA片段。扩增产物经克隆获得阳性重组质粒 pGC39和pGC10 3,对其序列分析显示 papG132编码3...
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