日本血吸虫中国大陆株肝期童虫cDNA文库的构建及鉴定
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安徽医科大学寄生虫学教研室 合肥230032 童畅;沈际佳;蒋作君;汪学龙
日本血吸虫童虫|cDNA文库|λTriplEx2噬菌体
参见附件(54kb)。
安徽医科大学寄生虫学教研室 合肥230032 童畅;沈际佳;蒋作君;汪学龙
关键词:日本血吸虫童虫;cDNA文库;λTriplEx2噬菌体
摘要:目的 构建日本血吸虫肝期童虫的cDNA文库 ,以从中寻找新的抗病疫苗和诊断分子。方法 阳性钉螺逸出尾蚴 ,人工感染家兔 ,15d后剖杀家兔 ,门静脉灌洗收集童虫。提取其总RNA ,并反转录PCR合成cDNA ,将cDNA片段定向重组入噬菌体载体 ,包装后构建成cDNA文库。结果 反转录PCR产生的cDNA经电泳 ,分子量大小位于 4 0 0~ 35 0 0bp之间 ,经含有IPTG和x -Gal颜色选择平皿测定 ,初步提示重组效率为 90 %以上。随机挑取 6个重组克隆经自身环化成质粒后双酶切鉴定提示插入片段 4 0 0~ 12 0 0 pb不等。 结论 首次成功构建日本血吸虫肝期童虫cDNA文库...
安徽医科大学寄生虫学教研室 合肥230032 童畅;沈际佳;蒋作君;汪学龙
关键词:日本血吸虫童虫;cDNA文库;λTriplEx2噬菌体
摘要:目的 构建日本血吸虫肝期童虫的cDNA文库 ,以从中寻找新的抗病疫苗和诊断分子。方法 阳性钉螺逸出尾蚴 ,人工感染家兔 ,15d后剖杀家兔 ,门静脉灌洗收集童虫。提取其总RNA ,并反转录PCR合成cDNA ,将cDNA片段定向重组入噬菌体载体 ,包装后构建成cDNA文库。结果 反转录PCR产生的cDNA经电泳 ,分子量大小位于 4 0 0~ 35 0 0bp之间 ,经含有IPTG和x -Gal颜色选择平皿测定 ,初步提示重组效率为 90 %以上。随机挑取 6个重组克隆经自身环化成质粒后双酶切鉴定提示插入片段 4 0 0~ 12 0 0 pb不等。 结论 首次成功构建日本血吸虫肝期童虫cDNA文库...
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