卡托普利对大鼠肥厚心肌组织血管紧张素Ⅱ与一氧化氮合酶的影响
作者：马玉华 夏志银 吴翔 祝玉成
单位：南通医学院附属医院心内科 226001
关键词：卡托普利；心肌肥厚；血管紧张素Ⅱ；一氧化氮合成酶。
高血压杂志000228
摘要 目的： 观察卡托普利对压力负荷性心肌肥厚大鼠心肌组织中的血管紧张素Ⅱ(MAngⅡ)及一氧化氮合成酶(NOS)含量的影响。
方法:本实验采用腹主动脉缩窄法建立大鼠压力负荷性心肌肥厚模型，用放免法测定MAngⅡ及比色法测定NOS含量。结果:腹主动脉缩窄后4周，心脏重量与MAngⅡ含量显著增加，NOS也代偿性增加，而血浆AngⅡ(PAngⅡ)变化不明显；卡托普利能降低全心重/体重比值，增加NOS活性，降低MAngⅡ含量。结论 心脏肾素-血管紧张素系统(RAS)与NO/NOS系统参与了心肌肥厚的发生发展，卡托普利通过作用上述环节逆转心肌肥厚。
, 百拇医药
中图分类号：R544.1;R541.3;Q2 文献标识码：A 文章编号：1006-2866(2000)06-0174-02
Effect of Captopril on the Myocardium
Angiotensin Ⅱ and Nitric Oxide
Synthase in Rats with Pressured
Overload Cardiac Hypertrophy
MA Yu-hua , XIA Zhi-yin , WU Xiang , et al
(Department of Cardiology, Affiliated Hospital
, 百拇医药
of Nantong Medical College; Nantong 226001,China)
ABSTRACT Aim:To investigate the effect of captopril on the myocardium angiotensinⅡ (MAngⅡ) and nitric oxide synthase (NOS) in rats with pressure overload cardiac hypertrophy.
Methods: The pressure overload cardiac hypertrophy model was produced by constriction of abdominal aorta. MAngⅡ was measured by radioimmunoassay, and NOS by colorimetric method.
, 百拇医药
Results:Four weeks after abdominal aorta-constriction, the ratio of heart weight to body weight(HW/BW) and the level of MAngⅡ and NOS was increased, but no significant changes in plasma AngⅡ(PAngⅡ) were observed; captopril reduced the HW/BW ratio and the level of MAngⅡ, increased the myocardium NOS.
Conclusion:A localized cardiac renin-angiotensin system(RAS) and NO/NOS system involved in the cardiac hypertrophy, The reversal of cardiac hypertrophy by captopril was associated with the lowering of MAngⅡ and increase in MNOS.
, 百拇医药
Key Words:captopril; cardiac hypertrophy; angiotensinⅡ; nitric oxide synthase
诱发心肌肥厚的因素很多，非血流动力学因素，尤其是心脏局部RAS与心肌肥厚关系密切[1]。Pollock[2]等证明ACEI能逆转一氧化氮合成酶(NOS)抑制剂引起的高血压。本文应用大鼠腹主动脉狭窄法建立心肌肥厚模型,观察卡托普利对心肌组织中NOS与AngⅡ的影响，进一步探讨卡托普利对心肌肥厚防治作用的机理。
对象与方法
1 材料与方法:
1.1 动物模型的制备：取体重195±24g纯种SD大鼠，雌雄不拘，随机分成三组：对照组(n=6),心肌肥厚组(n=7),卡托普利组(n=9)。用戊巴比妥钠(30 mg/kg) 腹腔内注射，进行麻醉，开腹，在双侧肾动脉上方游离出腹主动脉，穿过一条丝线，沿腹主动脉长轴置一直径为0.7 mm的小园棒(7号针头磨制)，将腹主动脉与小园棒一起结扎，随后立即抽出小园棒，使腹主动脉狭窄直径为0.7 mm。对照组行假手术。药物剂量：管饲卡托普利60 mg/kg/d。
, http://www.100md.com
1.2 生化测定及其方法：术后各组大鼠喂养4周后取血，断头处死，快速取出心脏，称重，以全心重/体重(HW/BW)比值为指标，判断心肌肥厚发展程度。部分左心室肌标本在4℃生理盐水中匀浆(w∶v=1∶10)，离心5分钟(3000 r/min)取上清液，用比色法测定NOS，以u/mg/蛋白表示，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。测定AngⅡ左心室肌标本在100℃生理盐水中煮沸10分钟，用4℃生理盐水(w:v=1:10)制成匀浆，4℃下10000 r/min离心20分钟，取上清液用放射免疫分析法测定MAngⅡ含量，以pg/g湿重表示。PAngⅡ测定按试剂盒说明进行。AngⅡ放射免疫测定药盒由北京北方生物技术研究所提供(灵敏度10pg/ml，可测范围10～2000 pg/ml，批内变异系数CVw<5%，批间变异系数CVb<10%)。γ计数仪SIV-682型
1.3 统计学分析：数据以均数±标准差(
±s)表示，采用多个样本均数比较和方差分析。
, 百拇医药
结果
腹主动脉缩窄后4周，HW/BW, MAngⅡ含量和NOS活性的改变，与对照组相比，HW/BW与MAngⅡ含量显著升高，NOS活性也增加，而PAngⅡ 变化不明显。卡托普利能防治心肌肥厚的发生，使MAngⅡ含量降低，显著增加NOS活性，降低HW/BW比值。见表 1。
表 1 各组动物HW/BW.PAngⅡ.MangⅡ与NOS含量比较
对照组
(n=6)
心肌肥厚组
(n=7)
卡托普利组
(n=9)
, 百拇医药
HW/BWg/kg
3.52±0.26
4.54±0.59**
3.63±0.34△△
PAngⅡpg/ml
1681.62±55.46
1747.16±29.21
1678.75±82.38
MAngⅡpg/g
262.08±98.23
508.30±195.42*
, 百拇医药
261.29±201.66△
NOSU/mg蛋白
0.156±0.028
0.206±0.068
0.268±0.058**
注:HW/BW=全心重/体重,PAngⅡ=血浆AngⅡ ,MAngⅡ=心肌组织AngⅡ,NOS为心肌组织内的含量。与对照组比较*P<0.05,**P<0.01;与心肌肥厚组比较△P<0.05,△△:P<0.001讨论
目前，压力负荷增加致心肌肥厚的发生机制尚不十分清楚。近年来有证据表明，心脏局部存在的RAS在心肌肥厚的发生中起重要作用[3,4]。已知AngⅡ具有生长因子的作用，在心脏局部以自分泌，旁分泌和胞内分泌的形式调节心脏功能，可直接促进心肌细胞核酸和蛋白质的合成，引起心肌肥厚[5,6]，卡托普利是血管紧张素转换酶抑制剂，通过减少AngⅡ的形成，可防治或逆转心肌肥厚，而不依赖于血流动力学的改变[3]。本文结果表明，心肌肥厚组HW/BW与心肌组织AngⅡ含量较对照组明显增加，而血浆AngⅡ则变化不明显；卡托普利能显著降低心肌组织AngⅡ含量与HW/BW，对血浆AngⅡ无明显影响。可见，心脏局部RAS与心肌肥厚关系密切，与Baker[3]等人报道一致。
, http://www.100md.com
一氧化氮(NO)是由NOS合成并释放至周围。NO具有扩血管、降低血压、抑制血小板粘附、聚集等作用，是抗高血压的保护因子[7]。腹主动脉缩窄后4周，肥厚心肌组织内NOS活性呈代偿性增加，但其变化无统计学意义；与对照组比较，卡托普利能显著提高NOS活性(P<0.001)。
结论
卡托普利可逆转心肌肥厚，不仅与心脏局部RAS有关，而且与NO/NOS系统也有密切关系。卡托普利调控NO/NOS系统的可能机制：(1)通过增加缓激肽而促进NO的合成与释放[8]；(2)通过上调血管紧张素Ⅱ-1型(AT1)受体，促进NO合成和释放，其机制可能与增加NOS转录有关；卡托普利含巯基对NO/NOS具有保护作用。因此，早期应用卡托普利，对防治心肌肥厚有重要意义。
参考文献
, http://www.100md.com [1] Baker KM, Booz GW, Dostal DE. Cardiac actions of angiotensinⅡ:Role of an intracardiac renin-angiotensin system[J].Annu Rev Physiol 1992，54:227.
[2] Pollock DM, Polakowski JS, Divish BJ, et al. AngiotensinⅡ blockade reverses hypertension during long term nitric oxide synthase inhibition[J].Hypertension 1993，21:660.
[3] Baker KM, Mitchell IC, Sally KW,et al.Renin-angiotensin system involvement in pressure-overload cardiac hypertrophy in rats[J].Am J Physiol 1990，259(28):H 324.
, 百拇医药
[4] 章有华，徐守春.大鼠压力负荷性心肌肥厚时心脏肾素-血管紧张素Ⅱ及心肌组织离子含量的改变[J].中国循环杂志 1994，9(4):225.
[5] Baker KM,Aceto JF. Angiotensin Ⅱ stimulation of protein synthesis and cell growth in chicken heart cells[J].Am J Physiol 1990，259(28):H 610.
[6] Ding XL, Zhou CY, Li YX. [Sar]'angiotensinⅡ stimulates protein synthesis and hypertrophy of neonatal rat cardiac myocytes in culture by cintraction independent mechanisms[J].Chinese J Physi Sci 1993，9(2):97.
[7] 唐跃明，王宪.一氧化氮及其合酶与心血管疾病[J].心血管病学进展 1995，16(5):227-279.
[8] Boulanger CM, Caputo L, Bernard IL. Endothelial AT1-mediated release of nitric oxide decrease angiotensinⅡ contractions in rat carotid artery[J].Hypertension 1995，26:752.
收稿日期：1999-06-28, 百拇医药
单位：南通医学院附属医院心内科 226001
关键词：卡托普利；心肌肥厚；血管紧张素Ⅱ；一氧化氮合成酶。
高血压杂志000228
摘要 目的： 观察卡托普利对压力负荷性心肌肥厚大鼠心肌组织中的血管紧张素Ⅱ(MAngⅡ)及一氧化氮合成酶(NOS)含量的影响。
方法:本实验采用腹主动脉缩窄法建立大鼠压力负荷性心肌肥厚模型，用放免法测定MAngⅡ及比色法测定NOS含量。结果:腹主动脉缩窄后4周，心脏重量与MAngⅡ含量显著增加，NOS也代偿性增加，而血浆AngⅡ(PAngⅡ)变化不明显；卡托普利能降低全心重/体重比值，增加NOS活性，降低MAngⅡ含量。结论 心脏肾素-血管紧张素系统(RAS)与NO/NOS系统参与了心肌肥厚的发生发展，卡托普利通过作用上述环节逆转心肌肥厚。
, 百拇医药
中图分类号：R544.1;R541.3;Q2 文献标识码：A 文章编号：1006-2866(2000)06-0174-02
Effect of Captopril on the Myocardium
Angiotensin Ⅱ and Nitric Oxide
Synthase in Rats with Pressured
Overload Cardiac Hypertrophy
MA Yu-hua , XIA Zhi-yin , WU Xiang , et al
(Department of Cardiology, Affiliated Hospital
, 百拇医药
of Nantong Medical College; Nantong 226001,China)
ABSTRACT Aim:To investigate the effect of captopril on the myocardium angiotensinⅡ (MAngⅡ) and nitric oxide synthase (NOS) in rats with pressure overload cardiac hypertrophy.
Methods: The pressure overload cardiac hypertrophy model was produced by constriction of abdominal aorta. MAngⅡ was measured by radioimmunoassay, and NOS by colorimetric method.
, 百拇医药
Results:Four weeks after abdominal aorta-constriction, the ratio of heart weight to body weight(HW/BW) and the level of MAngⅡ and NOS was increased, but no significant changes in plasma AngⅡ(PAngⅡ) were observed; captopril reduced the HW/BW ratio and the level of MAngⅡ, increased the myocardium NOS.
Conclusion:A localized cardiac renin-angiotensin system(RAS) and NO/NOS system involved in the cardiac hypertrophy, The reversal of cardiac hypertrophy by captopril was associated with the lowering of MAngⅡ and increase in MNOS.
, 百拇医药
Key Words:captopril; cardiac hypertrophy; angiotensinⅡ; nitric oxide synthase
诱发心肌肥厚的因素很多，非血流动力学因素，尤其是心脏局部RAS与心肌肥厚关系密切[1]。Pollock[2]等证明ACEI能逆转一氧化氮合成酶(NOS)抑制剂引起的高血压。本文应用大鼠腹主动脉狭窄法建立心肌肥厚模型,观察卡托普利对心肌组织中NOS与AngⅡ的影响，进一步探讨卡托普利对心肌肥厚防治作用的机理。
对象与方法
1 材料与方法:
1.1 动物模型的制备：取体重195±24g纯种SD大鼠，雌雄不拘，随机分成三组：对照组(n=6),心肌肥厚组(n=7),卡托普利组(n=9)。用戊巴比妥钠(30 mg/kg) 腹腔内注射，进行麻醉，开腹，在双侧肾动脉上方游离出腹主动脉，穿过一条丝线，沿腹主动脉长轴置一直径为0.7 mm的小园棒(7号针头磨制)，将腹主动脉与小园棒一起结扎，随后立即抽出小园棒，使腹主动脉狭窄直径为0.7 mm。对照组行假手术。药物剂量：管饲卡托普利60 mg/kg/d。
, http://www.100md.com
1.2 生化测定及其方法：术后各组大鼠喂养4周后取血，断头处死，快速取出心脏，称重，以全心重/体重(HW/BW)比值为指标，判断心肌肥厚发展程度。部分左心室肌标本在4℃生理盐水中匀浆(w∶v=1∶10)，离心5分钟(3000 r/min)取上清液，用比色法测定NOS，以u/mg/蛋白表示，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。测定AngⅡ左心室肌标本在100℃生理盐水中煮沸10分钟，用4℃生理盐水(w:v=1:10)制成匀浆，4℃下10000 r/min离心20分钟，取上清液用放射免疫分析法测定MAngⅡ含量，以pg/g湿重表示。PAngⅡ测定按试剂盒说明进行。AngⅡ放射免疫测定药盒由北京北方生物技术研究所提供(灵敏度10pg/ml，可测范围10～2000 pg/ml，批内变异系数CVw<5%，批间变异系数CVb<10%)。γ计数仪SIV-682型
1.3 统计学分析：数据以均数±标准差(
±s)表示，采用多个样本均数比较和方差分析。, 百拇医药
结果
腹主动脉缩窄后4周，HW/BW, MAngⅡ含量和NOS活性的改变，与对照组相比，HW/BW与MAngⅡ含量显著升高，NOS活性也增加，而PAngⅡ 变化不明显。卡托普利能防治心肌肥厚的发生，使MAngⅡ含量降低，显著增加NOS活性，降低HW/BW比值。见表 1。
表 1 各组动物HW/BW.PAngⅡ.MangⅡ与NOS含量比较
对照组
(n=6)
心肌肥厚组
(n=7)
卡托普利组
(n=9)
, 百拇医药
HW/BWg/kg
3.52±0.26
4.54±0.59**
3.63±0.34△△
PAngⅡpg/ml
1681.62±55.46
1747.16±29.21
1678.75±82.38
MAngⅡpg/g
262.08±98.23
508.30±195.42*
, 百拇医药
261.29±201.66△
NOSU/mg蛋白
0.156±0.028
0.206±0.068
0.268±0.058**
注:HW/BW=全心重/体重,PAngⅡ=血浆AngⅡ ,MAngⅡ=心肌组织AngⅡ,NOS为心肌组织内的含量。与对照组比较*P<0.05,**P<0.01;与心肌肥厚组比较△P<0.05,△△:P<0.001讨论
目前，压力负荷增加致心肌肥厚的发生机制尚不十分清楚。近年来有证据表明，心脏局部存在的RAS在心肌肥厚的发生中起重要作用[3,4]。已知AngⅡ具有生长因子的作用，在心脏局部以自分泌，旁分泌和胞内分泌的形式调节心脏功能，可直接促进心肌细胞核酸和蛋白质的合成，引起心肌肥厚[5,6]，卡托普利是血管紧张素转换酶抑制剂，通过减少AngⅡ的形成，可防治或逆转心肌肥厚，而不依赖于血流动力学的改变[3]。本文结果表明，心肌肥厚组HW/BW与心肌组织AngⅡ含量较对照组明显增加，而血浆AngⅡ则变化不明显；卡托普利能显著降低心肌组织AngⅡ含量与HW/BW，对血浆AngⅡ无明显影响。可见，心脏局部RAS与心肌肥厚关系密切，与Baker[3]等人报道一致。
, http://www.100md.com
一氧化氮(NO)是由NOS合成并释放至周围。NO具有扩血管、降低血压、抑制血小板粘附、聚集等作用，是抗高血压的保护因子[7]。腹主动脉缩窄后4周，肥厚心肌组织内NOS活性呈代偿性增加，但其变化无统计学意义；与对照组比较，卡托普利能显著提高NOS活性(P<0.001)。
结论
卡托普利可逆转心肌肥厚，不仅与心脏局部RAS有关，而且与NO/NOS系统也有密切关系。卡托普利调控NO/NOS系统的可能机制：(1)通过增加缓激肽而促进NO的合成与释放[8]；(2)通过上调血管紧张素Ⅱ-1型(AT1)受体，促进NO合成和释放，其机制可能与增加NOS转录有关；卡托普利含巯基对NO/NOS具有保护作用。因此，早期应用卡托普利，对防治心肌肥厚有重要意义。
参考文献
, http://www.100md.com [1] Baker KM, Booz GW, Dostal DE. Cardiac actions of angiotensinⅡ:Role of an intracardiac renin-angiotensin system[J].Annu Rev Physiol 1992，54:227.
[2] Pollock DM, Polakowski JS, Divish BJ, et al. AngiotensinⅡ blockade reverses hypertension during long term nitric oxide synthase inhibition[J].Hypertension 1993，21:660.
[3] Baker KM, Mitchell IC, Sally KW,et al.Renin-angiotensin system involvement in pressure-overload cardiac hypertrophy in rats[J].Am J Physiol 1990，259(28):H 324.
, 百拇医药
[4] 章有华，徐守春.大鼠压力负荷性心肌肥厚时心脏肾素-血管紧张素Ⅱ及心肌组织离子含量的改变[J].中国循环杂志 1994，9(4):225.
[5] Baker KM,Aceto JF. Angiotensin Ⅱ stimulation of protein synthesis and cell growth in chicken heart cells[J].Am J Physiol 1990，259(28):H 610.
[6] Ding XL, Zhou CY, Li YX. [Sar]'angiotensinⅡ stimulates protein synthesis and hypertrophy of neonatal rat cardiac myocytes in culture by cintraction independent mechanisms[J].Chinese J Physi Sci 1993，9(2):97.
[7] 唐跃明，王宪.一氧化氮及其合酶与心血管疾病[J].心血管病学进展 1995，16(5):227-279.
[8] Boulanger CM, Caputo L, Bernard IL. Endothelial AT1-mediated release of nitric oxide decrease angiotensinⅡ contractions in rat carotid artery[J].Hypertension 1995，26:752.
收稿日期：1999-06-28, 百拇医药