顺铂软膏对小鼠皮肤颗粒细胞生成的影响
作者：闫军 渠鹏程 张玉珍 李昌生 李应全 刘淑萍
单位：闫军 渠鹏程 张玉珍 李昌生 刘淑萍(济南市皮肤病防治院，济南250001)；李应全(山东医科大学药理教研室，济南250012)
关键词：顺铂软膏颗粒细胞
中国临床药理学与治疗学000415
目的观察顺铂软膏对小鼠皮肤颗粒细胞生成和体重的影响。方法昆明种小鼠25只，随机均分为5组：空白对照组、迪维霜组、0.1%顺铂软膏组、0.5%顺铂软膏组、1%顺铂软膏组。外用给药18d后，观察动物体重变化和皮肤病理学变化。结果与空白对照组比较,0.1%～1%顺铂软膏均明显增加皮肤颗粒细胞生成(P<0.01)，对体重增加的影响均明显小于迪维霜(P>0.01)，也未见明显的局部刺激。结论顺铂软膏可促进皮肤颗粒细胞生成。
, 百拇医药
中图分类号R979.1
Influence of cisplatin cream on the production of skin granular cell
YAN Jun QU Peng_Cheng ZHANG Yu_Zhen LI Chang_Sheng LIU Shu_Ping
(Jinan Dermotoses Prevention and Treatment Hospital,Jinan 250001)
LI Ying_Quan
(Department of Pharmacology,Shandong Medical University,Jinan 250012)
, 百拇医药 Aim To observe the influence of cisplatin cream on the production of skin granular cells and the body weight of mice. Methods The changes of body weight and skin pathology of mice were observed 18 days after external application of cisplatins.Results The experiment results showed that 0.1% ～ 1% cisplatin cream obviously enhanced the production of skin granular cells(P<0.01)and the effect on the growth of body weight of mice was less than the effect of tretinoin cream(P<0.01) and no obvious dermatic stimulation was found. Conclusion Cisplatin cream promeotes the production of skin granular cells
, 百拇医药
Key words cisplatin ;cream;granular cell
自1969年顺铂被发现具有高效的抗肿瘤活性以来，受到了人们的广泛关注，1995年WHO对上百种治癌药物进行排名，顺铂的综合评价位居第2位[1]。临床多用于实体瘤，疗效突出。目前，尚未见应用于皮肤病的报道。正常小鼠尾部皮肤组织结构的病理转归与银屑病患者皮损相似，在药物的作用下，可进行分化，形成颗粒细胞[2]。我们对0.1%～1%顺铂软膏引起的小白鼠尾皮肤病理变化以及可能产生的副作用进行了实验观察。报道如下。
1 实验材料与方法
1.1药物注射用顺铂(齐鲁制药厂，批号981020)，迪维霜(重庆华邦制药有限公司，批号990601)。取十八醇25g，液体石蜡20g，白凡士林50g，十二烷基硫酸钠0.1g，顺铂0.1、0.5、1g溶于5ml二甲基亚砜，制成0.1%、0.5%、1%各100g顺铂软膏。
, 百拇医药
1.2动物昆明种小白鼠25只，体重20～25g，鼠龄25d(山东医科大学实验动物中心提供)。
1.3仪器LX_75型切片机(山东医疗器械厂)，双目光学显微镜(英国剑桥)。
14试验方法25只昆明种小白鼠随机分为5组：空白对照组、迪维霜组、0.1%顺铂较膏组、05%顺铂软膏组、1%顺铂软膏组，每组5只，每日在鼠尾涂药1次，连续18d，末次涂药后24h，称重后，从根部割下全尾，制作标本。
1.5标本制备取距鼠尾根部约2cm的背部皮肤成方形，贴在小块吸水纸上，用10%甲醛溶液固
定，常规脱水，石蜡包埋，HE染色。
1.6镜下观察每只小鼠尾制作10张切片，逐个观察鳞片的表皮有无颗粒层形成，并加以记录。凡两个毛囊间的鳞片表皮见到连续成行的颗粒细胞者为一个颗粒层计数，将所得数据进行统计学分析[2]。
, 百拇医药
2 结果
2.1局部皮肤观察五组均未见红肿、糜烂等严重皮肤刺激性。实验结束后，0.1%顺铂软膏组与空白组小鼠一样，营养良好，毛发润泽，皮肤组织较厚；用药8d后，迪维霜组小鼠尾部较对照组显著变细，皮肤明显萎缩，呈暗红色，毛发稀疏，失去光泽；用药11d后，1%顺铂软膏组小鼠尾部也出现同样变化。显微镜下0.1%顺铂软膏组与空白组皮下脂肪层较厚，肌纤维肥大；0.5%、1%顺铂软膏组皮下组织较薄，迪维霜组皮下组织最薄。空白对照组小鼠尾部鳞片表皮角化层角质细胞保留核，并见有较多角质栓。颗粒层颗粒细胞缺失，仅在毛囊处有少量的颗粒细胞，表皮较薄，表现为灶性角化过度，角化不全。各药物实验组均呈现不同程度的下列病理变化：出现数层颗粒细胞，细胞肥大，呈菱形；颗粒粗大，深染；细胞界限清楚，核及核仁明显可见。棘细胞体积明显增大，数量增多；基底层细胞空白对照组稀疏，药物组细胞排列致密、整齐，核相对显小，表皮厚度相应增加。见图1，图2。药物对局部皮肤刺激性及营养状况的影响大小：迪维霜>1%顺铂软膏>0.5%顺铂软膏>0.1%顺铂软膏>软膏基质。
, 百拇医药
2.2体重变化计算实验后每只小鼠增加的体重，见表1。迪维霜组5只小鼠增加的体重明显小于
其他4组(P<0.01)。0.5%、1%顺铂软膏次之，与空白对照组比较P<0.05。0.1%顺铂软膏组与空白对照组比较，两组体重的增加无统计学意义。对小鼠体重影响大小：迪维霜>1%顺铂软膏>0.5%顺铂软膏>0.1%顺铂软膏>软膏基质。
图1 迪维霜组鼠尾皮肤切片(×100)
图2 0.1%顺铂组鼠尾皮肤切片(×100)
2.3颗粒层计数迪维霜组出现连续颗粒细胞最多，且个体差异小。0.1%～1%顺铂软膏组均出现不同程度连续颗粒细胞，各组之间无显著差异(P>0.05)。见表1。
, 百拇医药
表1 药物对小鼠体重的影响及颗粒层计数(
±s,n=5) 药物
体重增加/g
颗粒层计数/个
空白组
6.0±1.8
3.6±1.8
迪维霜
1.8±0.3
50.2±4.7
1%顺铂软膏
3.8±1.2
, http://www.100md.com
39.5±10.0
0.5%顺铂软膏
4.0±1.1
40.5±9.8
5.8±2.2
38.2±8.1
与空白组比较(单向)*P<0.05,**P<0.01；每100个毛囊间连续出现颗粒层数
3 讨论
顺铂为重金属铂的络合物，能与DNA结合，破坏DNA的功能，干扰其复制和转录，高浓度时也抑制RNA及蛋白质的合成，可有效抑制肿瘤细胞增生。仲维清等[3]用脉冲辐解N2O饱和的铂化金属硫蛋白及其和KSCN的竞争体系的水溶液，研究铂化金属硫蛋白与羟自由基的反应，说明顺铂类抗肿瘤药物诱导体内合成的铂化金属硫蛋白，具有清除羟自由基的作用。
, 百拇医药
小鼠尾表皮角化层角质细胞保留核，并见较多角质栓。颗粒层颗粒细胞缺失，仅在毛囊处有少量的颗粒细胞，表皮较薄，是良好的银屑病动物模型[2]，我们的实验证实顺铂软膏能够促进小鼠尾表皮颗粒细胞形成，但是，本品能否成为一种良好的制剂用于银屑病的治疗，还需进一步研究。
闫军，男，药师，学士，从事制剂、临床药研究。
参考文献
1，杨一昆，普绍平，高文桂.顺铂的应用及铂族金属抗癌药物的研究进展.中国新药杂志，1999；8(12)：797
2，闫军，李应全，李昌生，等.迪维霜、恩肤霜和喜树碱软膏对小鼠皮肤颗粒细胞生成的影响.中国麻风皮肤病杂志，2000；16(2)：80
3，仲维清，钱素萍，邢本刚，等.铂化金属硫蛋白与羟自由基反应速率常数的测定.中国药学杂志，1999；34(5)：303
2000-05-19收稿，2000-06-10修回, 百拇医药
单位：闫军 渠鹏程 张玉珍 李昌生 刘淑萍(济南市皮肤病防治院，济南250001)；李应全(山东医科大学药理教研室，济南250012)
关键词：顺铂软膏颗粒细胞
中国临床药理学与治疗学000415
目的观察顺铂软膏对小鼠皮肤颗粒细胞生成和体重的影响。方法昆明种小鼠25只，随机均分为5组：空白对照组、迪维霜组、0.1%顺铂软膏组、0.5%顺铂软膏组、1%顺铂软膏组。外用给药18d后，观察动物体重变化和皮肤病理学变化。结果与空白对照组比较,0.1%～1%顺铂软膏均明显增加皮肤颗粒细胞生成(P<0.01)，对体重增加的影响均明显小于迪维霜(P>0.01)，也未见明显的局部刺激。结论顺铂软膏可促进皮肤颗粒细胞生成。
, 百拇医药
中图分类号R979.1
Influence of cisplatin cream on the production of skin granular cell
YAN Jun QU Peng_Cheng ZHANG Yu_Zhen LI Chang_Sheng LIU Shu_Ping
(Jinan Dermotoses Prevention and Treatment Hospital,Jinan 250001)
LI Ying_Quan
(Department of Pharmacology,Shandong Medical University,Jinan 250012)
, 百拇医药 Aim To observe the influence of cisplatin cream on the production of skin granular cells and the body weight of mice. Methods The changes of body weight and skin pathology of mice were observed 18 days after external application of cisplatins.Results The experiment results showed that 0.1% ～ 1% cisplatin cream obviously enhanced the production of skin granular cells(P<0.01)and the effect on the growth of body weight of mice was less than the effect of tretinoin cream(P<0.01) and no obvious dermatic stimulation was found. Conclusion Cisplatin cream promeotes the production of skin granular cells
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Key words cisplatin ;cream;granular cell
自1969年顺铂被发现具有高效的抗肿瘤活性以来，受到了人们的广泛关注，1995年WHO对上百种治癌药物进行排名，顺铂的综合评价位居第2位[1]。临床多用于实体瘤，疗效突出。目前，尚未见应用于皮肤病的报道。正常小鼠尾部皮肤组织结构的病理转归与银屑病患者皮损相似，在药物的作用下，可进行分化，形成颗粒细胞[2]。我们对0.1%～1%顺铂软膏引起的小白鼠尾皮肤病理变化以及可能产生的副作用进行了实验观察。报道如下。
1 实验材料与方法
1.1药物注射用顺铂(齐鲁制药厂，批号981020)，迪维霜(重庆华邦制药有限公司，批号990601)。取十八醇25g，液体石蜡20g，白凡士林50g，十二烷基硫酸钠0.1g，顺铂0.1、0.5、1g溶于5ml二甲基亚砜，制成0.1%、0.5%、1%各100g顺铂软膏。
, 百拇医药
1.2动物昆明种小白鼠25只，体重20～25g，鼠龄25d(山东医科大学实验动物中心提供)。
1.3仪器LX_75型切片机(山东医疗器械厂)，双目光学显微镜(英国剑桥)。
14试验方法25只昆明种小白鼠随机分为5组：空白对照组、迪维霜组、0.1%顺铂较膏组、05%顺铂软膏组、1%顺铂软膏组，每组5只，每日在鼠尾涂药1次，连续18d，末次涂药后24h，称重后，从根部割下全尾，制作标本。
1.5标本制备取距鼠尾根部约2cm的背部皮肤成方形，贴在小块吸水纸上，用10%甲醛溶液固
定，常规脱水，石蜡包埋，HE染色。
1.6镜下观察每只小鼠尾制作10张切片，逐个观察鳞片的表皮有无颗粒层形成，并加以记录。凡两个毛囊间的鳞片表皮见到连续成行的颗粒细胞者为一个颗粒层计数，将所得数据进行统计学分析[2]。
, 百拇医药
2 结果
2.1局部皮肤观察五组均未见红肿、糜烂等严重皮肤刺激性。实验结束后，0.1%顺铂软膏组与空白组小鼠一样，营养良好，毛发润泽，皮肤组织较厚；用药8d后，迪维霜组小鼠尾部较对照组显著变细，皮肤明显萎缩，呈暗红色，毛发稀疏，失去光泽；用药11d后，1%顺铂软膏组小鼠尾部也出现同样变化。显微镜下0.1%顺铂软膏组与空白组皮下脂肪层较厚，肌纤维肥大；0.5%、1%顺铂软膏组皮下组织较薄，迪维霜组皮下组织最薄。空白对照组小鼠尾部鳞片表皮角化层角质细胞保留核，并见有较多角质栓。颗粒层颗粒细胞缺失，仅在毛囊处有少量的颗粒细胞，表皮较薄，表现为灶性角化过度，角化不全。各药物实验组均呈现不同程度的下列病理变化：出现数层颗粒细胞，细胞肥大，呈菱形；颗粒粗大，深染；细胞界限清楚，核及核仁明显可见。棘细胞体积明显增大，数量增多；基底层细胞空白对照组稀疏，药物组细胞排列致密、整齐，核相对显小，表皮厚度相应增加。见图1，图2。药物对局部皮肤刺激性及营养状况的影响大小：迪维霜>1%顺铂软膏>0.5%顺铂软膏>0.1%顺铂软膏>软膏基质。
, 百拇医药
2.2体重变化计算实验后每只小鼠增加的体重，见表1。迪维霜组5只小鼠增加的体重明显小于
其他4组(P<0.01)。0.5%、1%顺铂软膏次之，与空白对照组比较P<0.05。0.1%顺铂软膏组与空白对照组比较，两组体重的增加无统计学意义。对小鼠体重影响大小：迪维霜>1%顺铂软膏>0.5%顺铂软膏>0.1%顺铂软膏>软膏基质。
图1 迪维霜组鼠尾皮肤切片(×100)
图2 0.1%顺铂组鼠尾皮肤切片(×100)
2.3颗粒层计数迪维霜组出现连续颗粒细胞最多，且个体差异小。0.1%～1%顺铂软膏组均出现不同程度连续颗粒细胞，各组之间无显著差异(P>0.05)。见表1。
, 百拇医药
表1 药物对小鼠体重的影响及颗粒层计数(
±s,n=5) 药物体重增加/g
颗粒层计数/个
空白组
6.0±1.8
3.6±1.8
迪维霜
1.8±0.3
50.2±4.7
1%顺铂软膏
3.8±1.2
, http://www.100md.com
39.5±10.0
0.5%顺铂软膏
4.0±1.1
40.5±9.8
5.8±2.2
38.2±8.1
与空白组比较(单向)*P<0.05,**P<0.01；每100个毛囊间连续出现颗粒层数
3 讨论
顺铂为重金属铂的络合物，能与DNA结合，破坏DNA的功能，干扰其复制和转录，高浓度时也抑制RNA及蛋白质的合成，可有效抑制肿瘤细胞增生。仲维清等[3]用脉冲辐解N2O饱和的铂化金属硫蛋白及其和KSCN的竞争体系的水溶液，研究铂化金属硫蛋白与羟自由基的反应，说明顺铂类抗肿瘤药物诱导体内合成的铂化金属硫蛋白，具有清除羟自由基的作用。
, 百拇医药
小鼠尾表皮角化层角质细胞保留核，并见较多角质栓。颗粒层颗粒细胞缺失，仅在毛囊处有少量的颗粒细胞，表皮较薄，是良好的银屑病动物模型[2]，我们的实验证实顺铂软膏能够促进小鼠尾表皮颗粒细胞形成，但是，本品能否成为一种良好的制剂用于银屑病的治疗，还需进一步研究。
闫军，男，药师，学士，从事制剂、临床药研究。
参考文献
1，杨一昆，普绍平，高文桂.顺铂的应用及铂族金属抗癌药物的研究进展.中国新药杂志，1999；8(12)：797
2，闫军，李应全，李昌生，等.迪维霜、恩肤霜和喜树碱软膏对小鼠皮肤颗粒细胞生成的影响.中国麻风皮肤病杂志，2000；16(2)：80
3，仲维清，钱素萍，邢本刚，等.铂化金属硫蛋白与羟自由基反应速率常数的测定.中国药学杂志，1999；34(5)：303
2000-05-19收稿，2000-06-10修回, 百拇医药