小杯法测定艾司唑仑片溶出度的实验研究
作者：吴延晖 邵广洲 冯涌
单位：吴延晖 邵广洲 冯涌(中国人民解放军第464医院 天津 300381)
关键词：
药物分析杂志000322 艾司唑仑(Estazolam)又名三唑氯安定，是苯二氮
类衍生物[1]，70年代由日本武田药厂创制，临床作为镇静催眠药广泛应用，但在临床应用中疗效不一，有关其质控指标之一的溶出度测定在英国药典1993年版、美国药典Ⅹ 版及中国药典1995年版均未收载。由于艾司唑仑在水中几乎不溶，且每片剂量很小，每片标示量为1 mg，为了进一步控制其质量，按照中国药典小杯法进行了艾司唑仑片的溶出度实验，并且对3个厂家9个批号的产品进行了体外溶出度检查，实验结果表明，该法简便快速，结果准确。
, 百拇医药
1 仪器与试药
ZRS-4智能溶出仪，小杯法装置(天津大学无线电厂)；岛津UV-2201紫外分光光度计。
艾司唑仑片每片1 mg；天津A药厂，批号：981001(A1)；981101(A2)；981203(A3)；湖北B药厂，批号：980407(B1)；980701(B2)；980804(B3)；981001(B4)；北京C药厂，批号：980701(C1)；980702(C2)。
37%盐酸(天津市化学试剂三厂)。
2 含量测定[2]
取本品30片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于艾司唑仑10 mg)，置100 mL量瓶中，加盐酸溶液(9→1 000)(以下简称盐酸溶液)60 mL，充分振摇，使艾司唑仑溶解，用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过；弃去初滤液，精密量取续滤液5 mL，置50 mL量瓶中，用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，照分光光度法(附录ⅥA)，在(271±2) nm的波长处测定吸收度，按C16H11ClN4的吸收系数E1%1cm为358计算即得。计算结果见表1。
, 百拇医药
表1 艾司唑仑片含量测定结果 样品
平均片重/g
标示量 %
A1
0.05740
92.13
A2
0.06105
98.89
A3
0.06141
102.3
, 百拇医药 B1
0.08124
90.66
B2
0.08418
92.64
B3
0.08273
99.06
B4
0.07898
92.19
C1
, 百拇医药
0.06819
94.88
C2
0.06654
92.40
3 溶出度测定
3.1 溶剂的选择 根据艾司唑仑溶解特性，进行了5种不同的pH缓冲液的筛选[3]，并考虑到中国药典95版含量均匀度、含量测定均以盐酸溶液为溶剂，按C16H11ClN4的吸收系数(E1%1cm)为358计算，故认为本品溶出度的测定以盐酸溶液为溶出溶剂[4]。
3.2 溶出转速的选择 以脱气后的盐酸溶液250 mL为溶出溶剂，转速分别选择50，60，75 r.min-1进行实验，每一操作容器内投1片，经30 min取样，在271 nm波长处测定吸收度，并同时以盐酸溶液为空白，计算出溶出量，结果表明：50 r.min-1溶出速率较慢、溶出量偏低；而75 r.min-1溶出速率较快、溶出量偏高，故转速选择为60 r.min-1。
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4 方法的确定
4.1 溶出曲线 用选定的溶出溶剂分别对B4批号的艾司唑仑片进行5次30个数据的实验，考核该产品溶出均一性，绘制溶出曲线(见图1)。取艾司唑仑片按照溶出度测定法(中国药典95版附录66页第三法)以脱气后的盐酸溶液250 mL为溶剂，每一操作容器内投入1片，60 r.min-1，分别在15，30，45，60 min时取样3 mL，以滤纸过滤，取续滤液照分光光度法(中国药典95版附录18页Ⅳ法)271 nm处测吸收度计算出溶出量，结果见表2。
4.2 样品测定 根据以上实验结果，取本品1片，照溶出度测定法(中国药典95版二部附录66页第三法)以脱气后的盐酸溶液250 mL为溶剂，转速为60 r.min-1，经20 min时取样，其他操作同前测定方法，对3个厂家的9个批号的样品进行检验，按C16H11ClN4的吸收系数(E1%1cm)为358计算出每片的溶出量，限度为标示量的75%。结果见表3。
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图1 B4艾司唑仑片溶出度曲线
表2 艾司唑仑片溶出曲线结果(%)
溶出时间/min
15
30
45
60
1
85.78
94.91
95.90
92.88
, 百拇医药 2
82.81
94.04
97.30
93.58
3
87.93
96.26
99.05
99.39
4
86.30
95.09
, http://www.100md.com
96.72
96.95
5
88.11
97.54
100.7
103.1
X/%
86.19
95.57
97.93
97.18
RSD/%
, 百拇医药
2.48
1.42
1.97
4.35
表3 9批样品30 min溶出结果(%) 批号
溶出量
RSD
最大值
最小值
平均值
/%
A1
94.79
, http://www.100md.com
88.32
91.10
2.62
A2
98.46
88.28
93.46
3.92
A3
97.37
91.80
93.98
2.37
, 百拇医药
B1
99.86
84.13
92.00
6.28
B2
98.53
84.72
89.89
5.60
B3
91.48
78.55
, http://www.100md.com
87.18
5.37
B4
98.78
88.69
93.84
4.86
C1
68.44
57.18
64.95
4.86
C2
, 百拇医药
61.45
51.16
55.24
6.51
5 数据处理
提取参数：根据威布尔分布建立了溶出百分率与时间的函数关系，从中提取T50(释放50%所需时间)，Td(释放63.2%所需时间)，m(释放曲线形状参数，即曲线斜率)3个参数，结果见表4。
表4 9个不同批号样品溶出参数(n=6) 批号
T50/min
Td/min
, 百拇医药
m
A1
15.63
20.88
1.264
A2
9.43
13.51
1.017
A3
5.80
9.60
0.726
, http://www.100md.com
B1
8.88
11.30
1.514
B2
4.50
8.08
0.625
B3
9.97
14.76
0.934
B4
, 百拇医药
2.80
5.72
0.512
C1
33.17
44.03
1.293
C2
36.01
49.38
1.159
6 讨论
6.1 本实验9批样品其含量均在标示量90%～110%范围之内，崩解时限均未超过15 min，均匀度检查均符合中国药典95版规定。
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6.2 对溶出参数Td、T50和m的方差分析结果表明，不同厂家及同一厂家不同批号之间的艾司唑仑片的溶出度及Td、T50和m均有显著差异，这可能是造成临床疗效不一的原因之一，艾司唑仑片有必要作溶出度检查，以控制其质量。
6.3 实验中所用滤纸对本品有一定的吸附作用，所以取样前应至少用10 mL样品溶出液充分饱和，此时的吸收值保持恒定。
6.4 艾司唑仑为几乎不溶于水的药物，通过试验表明，拟定的溶出度测定法能有效地控制产品质量，建议今后药典中在制定艾司唑仑及其同类精神药的溶出度限度以20 min时溶出的百分率不低于标示量的75%，以此来控制产品质量，保证临床疗效。
6.5 从北京C药厂复核数据分析，该厂产品由于压片工艺等原因，溶出度明显低于A、B药厂，说明该方法是可以反映和控制质量情况的。
, 百拇医药
冯涌：天津医科大学药学院毕业实习生
参考文献
1，竺心影.药理学.第三版，北京：人民卫生出版社，1995.138
2，中国药典.1995.二部：88
3，袁和亮.杨鹏晖，李光平等.米非司酮片溶出速率的研究.中国药科大学学报，1993，24(3)：212
4，左志辉.卡比马唑片溶出度方法的选择.天津药学，1994，6(4)：52
(本文于1999年7月12日收到), 百拇医药
单位：吴延晖 邵广洲 冯涌(中国人民解放军第464医院 天津 300381)
关键词：
药物分析杂志000322 艾司唑仑(Estazolam)又名三唑氯安定，是苯二氮
类衍生物[1]，70年代由日本武田药厂创制，临床作为镇静催眠药广泛应用，但在临床应用中疗效不一，有关其质控指标之一的溶出度测定在英国药典1993年版、美国药典Ⅹ 版及中国药典1995年版均未收载。由于艾司唑仑在水中几乎不溶，且每片剂量很小，每片标示量为1 mg，为了进一步控制其质量，按照中国药典小杯法进行了艾司唑仑片的溶出度实验，并且对3个厂家9个批号的产品进行了体外溶出度检查，实验结果表明，该法简便快速，结果准确。, 百拇医药
1 仪器与试药
ZRS-4智能溶出仪，小杯法装置(天津大学无线电厂)；岛津UV-2201紫外分光光度计。
艾司唑仑片每片1 mg；天津A药厂，批号：981001(A1)；981101(A2)；981203(A3)；湖北B药厂，批号：980407(B1)；980701(B2)；980804(B3)；981001(B4)；北京C药厂，批号：980701(C1)；980702(C2)。
37%盐酸(天津市化学试剂三厂)。
2 含量测定[2]
取本品30片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于艾司唑仑10 mg)，置100 mL量瓶中，加盐酸溶液(9→1 000)(以下简称盐酸溶液)60 mL，充分振摇，使艾司唑仑溶解，用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过；弃去初滤液，精密量取续滤液5 mL，置50 mL量瓶中，用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，照分光光度法(附录ⅥA)，在(271±2) nm的波长处测定吸收度，按C16H11ClN4的吸收系数E1%1cm为358计算即得。计算结果见表1。
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表1 艾司唑仑片含量测定结果 样品
平均片重/g
标示量 %
A1
0.05740
92.13
A2
0.06105
98.89
A3
0.06141
102.3
, 百拇医药 B1
0.08124
90.66
B2
0.08418
92.64
B3
0.08273
99.06
B4
0.07898
92.19
C1
, 百拇医药
0.06819
94.88
C2
0.06654
92.40
3 溶出度测定
3.1 溶剂的选择 根据艾司唑仑溶解特性，进行了5种不同的pH缓冲液的筛选[3]，并考虑到中国药典95版含量均匀度、含量测定均以盐酸溶液为溶剂，按C16H11ClN4的吸收系数(E1%1cm)为358计算，故认为本品溶出度的测定以盐酸溶液为溶出溶剂[4]。
3.2 溶出转速的选择 以脱气后的盐酸溶液250 mL为溶出溶剂，转速分别选择50，60，75 r.min-1进行实验，每一操作容器内投1片，经30 min取样，在271 nm波长处测定吸收度，并同时以盐酸溶液为空白，计算出溶出量，结果表明：50 r.min-1溶出速率较慢、溶出量偏低；而75 r.min-1溶出速率较快、溶出量偏高，故转速选择为60 r.min-1。
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4 方法的确定
4.1 溶出曲线 用选定的溶出溶剂分别对B4批号的艾司唑仑片进行5次30个数据的实验，考核该产品溶出均一性，绘制溶出曲线(见图1)。取艾司唑仑片按照溶出度测定法(中国药典95版附录66页第三法)以脱气后的盐酸溶液250 mL为溶剂，每一操作容器内投入1片，60 r.min-1，分别在15，30，45，60 min时取样3 mL，以滤纸过滤，取续滤液照分光光度法(中国药典95版附录18页Ⅳ法)271 nm处测吸收度计算出溶出量，结果见表2。
4.2 样品测定 根据以上实验结果，取本品1片，照溶出度测定法(中国药典95版二部附录66页第三法)以脱气后的盐酸溶液250 mL为溶剂，转速为60 r.min-1，经20 min时取样，其他操作同前测定方法，对3个厂家的9个批号的样品进行检验，按C16H11ClN4的吸收系数(E1%1cm)为358计算出每片的溶出量，限度为标示量的75%。结果见表3。
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图1 B4艾司唑仑片溶出度曲线
表2 艾司唑仑片溶出曲线结果(%)
溶出时间/min
15
30
45
60
1
85.78
94.91
95.90
92.88
, 百拇医药 2
82.81
94.04
97.30
93.58
3
87.93
96.26
99.05
99.39
4
86.30
95.09
, http://www.100md.com
96.72
96.95
5
88.11
97.54
100.7
103.1
X/%
86.19
95.57
97.93
97.18
RSD/%
, 百拇医药
2.48
1.42
1.97
4.35
表3 9批样品30 min溶出结果(%) 批号
溶出量
RSD
最大值
最小值
平均值
/%
A1
94.79
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88.32
91.10
2.62
A2
98.46
88.28
93.46
3.92
A3
97.37
91.80
93.98
2.37
, 百拇医药
B1
99.86
84.13
92.00
6.28
B2
98.53
84.72
89.89
5.60
B3
91.48
78.55
, http://www.100md.com
87.18
5.37
B4
98.78
88.69
93.84
4.86
C1
68.44
57.18
64.95
4.86
C2
, 百拇医药
61.45
51.16
55.24
6.51
5 数据处理
提取参数：根据威布尔分布建立了溶出百分率与时间的函数关系，从中提取T50(释放50%所需时间)，Td(释放63.2%所需时间)，m(释放曲线形状参数，即曲线斜率)3个参数，结果见表4。
表4 9个不同批号样品溶出参数(n=6) 批号
T50/min
Td/min
, 百拇医药
m
A1
15.63
20.88
1.264
A2
9.43
13.51
1.017
A3
5.80
9.60
0.726
, http://www.100md.com
B1
8.88
11.30
1.514
B2
4.50
8.08
0.625
B3
9.97
14.76
0.934
B4
, 百拇医药
2.80
5.72
0.512
C1
33.17
44.03
1.293
C2
36.01
49.38
1.159
6 讨论
6.1 本实验9批样品其含量均在标示量90%～110%范围之内，崩解时限均未超过15 min，均匀度检查均符合中国药典95版规定。
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6.2 对溶出参数Td、T50和m的方差分析结果表明，不同厂家及同一厂家不同批号之间的艾司唑仑片的溶出度及Td、T50和m均有显著差异，这可能是造成临床疗效不一的原因之一，艾司唑仑片有必要作溶出度检查，以控制其质量。
6.3 实验中所用滤纸对本品有一定的吸附作用，所以取样前应至少用10 mL样品溶出液充分饱和，此时的吸收值保持恒定。
6.4 艾司唑仑为几乎不溶于水的药物，通过试验表明，拟定的溶出度测定法能有效地控制产品质量，建议今后药典中在制定艾司唑仑及其同类精神药的溶出度限度以20 min时溶出的百分率不低于标示量的75%，以此来控制产品质量，保证临床疗效。
6.5 从北京C药厂复核数据分析，该厂产品由于压片工艺等原因，溶出度明显低于A、B药厂，说明该方法是可以反映和控制质量情况的。
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冯涌：天津医科大学药学院毕业实习生
参考文献
1，竺心影.药理学.第三版，北京：人民卫生出版社，1995.138
2，中国药典.1995.二部：88
3，袁和亮.杨鹏晖，李光平等.米非司酮片溶出速率的研究.中国药科大学学报，1993，24(3)：212
4，左志辉.卡比马唑片溶出度方法的选择.天津药学，1994，6(4)：52
(本文于1999年7月12日收到), 百拇医药