HPLC法测定阿奇霉素分散片含量
作者：李平 匡佩琳
单位：南昌 330046 江西省药品检验所
关键词：
中国现代应用药学990624
阿奇霉素(Azithromycin)是具有15位的氮杂内酯环的半合成大环内酯抗生素。阿奇霉素具有吸收好，生物利用度高，半衰期长，毒低及耐受性好等优点，其制剂“阿奇霉素分散片”我国已有生产，含量测定收载为微生物效价测定法。本文探讨了用普通C18柱、0.067mol/L磷酸二氢钾-乙腈(70∶30)为流动相，柱温45℃测定阿奇霉素分散片的含量，结果满意。
1 仪器与试药
仪器：岛津高效液相色谱仪LC-10A;检测器:SPD-10A;数据处理机：C-R6A;恒温箱(Waters);定量手动进样阀(20μl);试剂：乙腈(色谱纯)，磷酸二氢钾(分析纯)；阿奇霉素分散片(江西江中药业科技开发公司)，阿奇霉素对照品(江西江中药业科技开发公司，纯度为96.1%)。
, http://www.100md.com
2 色谱条件
色谱柱：μ-Bondapak C18;10μ 4.6×300nm(Waters);流动相:0.067mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(70∶30);流速:1ml/min;检测波长:210nm;柱温:45℃。
3 实验方法
3.1 线性关系 精密称取阿奇霉素对照品40mg置50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，得浓度为800μg/ml的对照品贮备液，分别吸取一定量加入流动相稀释成浓度为100～800μg/ml的一系列溶液分别各自进样，以阿奇霉素浓度为横坐标，对照品峰面积为纵坐标，直线回归方程为:Y=4.505X+0.1886,r=0.9999,阿奇霉素浓度在100～800μg/ml间线性良好。
3.2 精密度 用前法制成600μg/ml的阿奇霉素对照溶液重复进样6次，峰面积的RSD为0.84%。
, 百拇医药
3.3 回收实验 分别精密称取20mg对照品于50ml量瓶中，然后准确加入经滤过的样品液(2000μg/ml)5ml流动相至刻度，混匀后，进样、测定阿奇霉的含量，除去样品本底，计算回收率，结果见表1。
表1 回收率测定结果 加入量/mg
测得量/mg
回收率/%
平均回收率/%
RSD/%
20.56
20.76
101.0
21.08
, 百拇医药
20.87
99.0
19.36
19.32
99.8
99.6
0.87
20.17
20.07
99.5
21.83
21.57
98.8
, 百拇医药
3.4 含量测定 取3批阿奇霉素分散片，分别取10片精密称定，研细混匀，精密称取相当于阿奇霉素60mg的样品于100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，过滤、进样。3批样品含量测定结果见表2，同时与微生物效价测定法比较，结果基本一致。表2 两法含量测定结果(%) 批 号
本 法
微生物效价测定法
1
98.6
100.1
2
97.5
98.9
3
, 百拇医药
98.1
99.7
4 讨 论
4.1 阿奇霉素为大环内酯类抗生素，紫外吸收较弱，取其末端吸收210nm波长处测定，得到响应值。柱温较低时峰形拖尾，在45℃时明显改善。
4.2 分别用0.1mol/L HCl和0.1mol/L NaOH将阿奇霉素样品溶解，配成浓度为600μg/ml的溶液，进样前将样品溶液调至中性，结果酸降解物峰分别为2.5,6.3和7.8min,主峰为4.5min。而碱降解物均在主峰前出峰，表明本流动相系统能有效地将阿奇霉素及其酸、碱降解物分离。
4.3 将含量测定项下600μg/ml的阿奇霉素溶液室温放置6h,其峰面积基本不变，可见本文所推荐的色谱条件在普通测定中不影响阿奇霉素的稳定性。 收稿日期：1998-12-01, 百拇医药
单位：南昌 330046 江西省药品检验所
关键词：
中国现代应用药学990624
阿奇霉素(Azithromycin)是具有15位的氮杂内酯环的半合成大环内酯抗生素。阿奇霉素具有吸收好，生物利用度高，半衰期长，毒低及耐受性好等优点，其制剂“阿奇霉素分散片”我国已有生产，含量测定收载为微生物效价测定法。本文探讨了用普通C18柱、0.067mol/L磷酸二氢钾-乙腈(70∶30)为流动相，柱温45℃测定阿奇霉素分散片的含量，结果满意。
1 仪器与试药
仪器：岛津高效液相色谱仪LC-10A;检测器:SPD-10A;数据处理机：C-R6A;恒温箱(Waters);定量手动进样阀(20μl);试剂：乙腈(色谱纯)，磷酸二氢钾(分析纯)；阿奇霉素分散片(江西江中药业科技开发公司)，阿奇霉素对照品(江西江中药业科技开发公司，纯度为96.1%)。
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2 色谱条件
色谱柱：μ-Bondapak C18;10μ 4.6×300nm(Waters);流动相:0.067mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(70∶30);流速:1ml/min;检测波长:210nm;柱温:45℃。
3 实验方法
3.1 线性关系 精密称取阿奇霉素对照品40mg置50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，得浓度为800μg/ml的对照品贮备液，分别吸取一定量加入流动相稀释成浓度为100～800μg/ml的一系列溶液分别各自进样，以阿奇霉素浓度为横坐标，对照品峰面积为纵坐标，直线回归方程为:Y=4.505X+0.1886,r=0.9999,阿奇霉素浓度在100～800μg/ml间线性良好。
3.2 精密度 用前法制成600μg/ml的阿奇霉素对照溶液重复进样6次，峰面积的RSD为0.84%。
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3.3 回收实验 分别精密称取20mg对照品于50ml量瓶中，然后准确加入经滤过的样品液(2000μg/ml)5ml流动相至刻度，混匀后，进样、测定阿奇霉的含量，除去样品本底，计算回收率，结果见表1。
表1 回收率测定结果 加入量/mg
测得量/mg
回收率/%
平均回收率/%
RSD/%
20.56
20.76
101.0
21.08
, 百拇医药
20.87
99.0
19.36
19.32
99.8
99.6
0.87
20.17
20.07
99.5
21.83
21.57
98.8
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3.4 含量测定 取3批阿奇霉素分散片，分别取10片精密称定，研细混匀，精密称取相当于阿奇霉素60mg的样品于100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，过滤、进样。3批样品含量测定结果见表2，同时与微生物效价测定法比较，结果基本一致。表2 两法含量测定结果(%) 批 号
本 法
微生物效价测定法
1
98.6
100.1
2
97.5
98.9
3
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98.1
99.7
4 讨 论
4.1 阿奇霉素为大环内酯类抗生素，紫外吸收较弱，取其末端吸收210nm波长处测定，得到响应值。柱温较低时峰形拖尾，在45℃时明显改善。
4.2 分别用0.1mol/L HCl和0.1mol/L NaOH将阿奇霉素样品溶解，配成浓度为600μg/ml的溶液，进样前将样品溶液调至中性，结果酸降解物峰分别为2.5,6.3和7.8min,主峰为4.5min。而碱降解物均在主峰前出峰，表明本流动相系统能有效地将阿奇霉素及其酸、碱降解物分离。
4.3 将含量测定项下600μg/ml的阿奇霉素溶液室温放置6h,其峰面积基本不变，可见本文所推荐的色谱条件在普通测定中不影响阿奇霉素的稳定性。 收稿日期：1998-12-01, 百拇医药