高效液相色谱法和紫外分光光度法测定盐酸噻氯匹定片含量
作者：邓雪娥 曹国颖
单位：北京友谊医院(100050) 邓雪娥 曹国颖
关键词：
医学检验
盐酸噻氯匹定片(ticlopidinetablet)，又名Ticlid(力抗栓)，是血小板聚集抑制剂，适用于血管手术和体外循环发生的血栓、 栓塞及慢性动脉闭塞等循环障碍〔1〕。以往，噻氯匹定的含量测定均采用双相滴定法，方法较繁琐，终点难以判断，必须用力振摇，为此我们采用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定含量，方法简便准确，现报告如下。
1 仪器和试药
1.1 仪器：日本导津公司生产的UV-2201紫外分光光度计，美国SP公司p4000高效液相色谱仪、UV2000高效液相色谱仪、UV2000检测器、SPDATAJET积分仪。
, http://www.100md.com
1.2 试药：力抗栓(Ticlid)，250mg/片，法国Sanofi公司生产，批号：951102；盐酸噻氯匹定对照品：天津新新药业公司提供，批号：951019，标示量：99.35%。
2 试验方法
2.1 高效液相色谱法
2.1.1 检测波长的选择：以蒸馏水为溶媒，将Ticlid对照品配制成80mg/L溶液，在200nm～400nm波长范围内对蒸馏水、对照品、辅料扫描，Ticlid在267nm、276nm和220nm处有最大吸收，而且空白和辅料无干扰，所以我们选择220nm作为HPLC检测波长。
2.1.2 色谱条件和检测方法：SPHERI-5RP-185micro220×4.6mm色谱柱，流动相1/30M磷酸盐缓冲液：乙晴(3∶7)，pH＝7.1，流速1.5ml/min，检测波长220nm，纸速0.25cm/min，柱温25℃，在此色谱条件下，保留时间适中，峰形好，辅料不干扰测定。
, 百拇医药
2.1.3 标准曲线的制作：精密称取在105℃干燥至恒重的噻氯匹定对照品100mg， 至100ml容量瓶中， 加蒸馏水溶解并稀释成20、10、5.0、2.5、1.25、0.625mg/L的标准溶液，吸取10μl进样， 将峰面积与浓度进行线性回归，得回归方程：C＝6.9009A-7.3544，r＝0.9995。
2.1.4 回收率试验：精密称取盐酸噻氯匹定对照品100mg，按处方比例加入辅料，混匀，置100ml容量瓶中，过滤，续滤液用蒸馏水稀释至20mg/L，按HPLC法进行回收率试验，得平均回收率9925%(n＝6)，RSD为089%。
2.2 紫外分光光度法
2.2.1 测定波长的选择：噻氯匹定的UV扫描图谱，我们选择λ＝276nm为紫外吸收波长，蒸馏水做空白。
2.2.2 噻氯匹定浓度与吸收光的关系：精密称定105℃干燥至恒重的对照品100mg，以蒸馏水配制成80、120、160、200、320mg/L梯度溶液， 在276nm处分别测定吸收度，回归方程： A＝0.0014C-0.0047，r＝0.99998证明噻氯匹定水溶液在80mg/L～320mg/L范围内，浓度和吸收度呈良好的线性关系。
, 百拇医药
2.2.3 回收率试验：精密称取噻氯匹定对照品100mg，分别按处方比例加入辅料，混匀，按UV法进行回收率试验，得平均回收率98.66%(n＝6)，RSD为1.05%。
3 样品的测定
力抗栓20片，精密称定，研细，混合均匀。精密称取适量(相当1粒重)， 分别按HPLC和UV回收率试验方法测定片剂中噻氯匹定百分含量，测定5次，结果见表1。
表1 样品的测定(n＝5)
批号
HPLC法
UV法
部颁标准
含量%
, 百拇医药
RSD%
含量%
RSD%
含量%
RSD%
片剂(951102)
100.27
1.05
100.08
2.81
101.94
6.11
4 讨论
, 百拇医药
卫生部批准的盐酸噻氯匹定片剂〔批准文号 WS-130(X-112)-95〕的含量测定是将内容物置具塞锥形瓶中，加水20ml使之溶解，加氯仿30ml和稀硫酸5ml， 强力振摇，加二甲基黄—亚甲蓝混合指示剂2滴，在不断振摇下用0.45%磺基于二酸钠二甲酯溶液滴定至氯仿层由绿色转变为淡红色，同条件下做空白。该方法较繁琐，终点判断困难。
本文研究了HPLC法和UV法测定盐酸噻氯匹定片剂的百分含量，结果与部颁标准比较，无显著差异。色谱条件中选用220nm为检测波长， 为使噻氯匹定有最大吸收，乙晴作为流动相减少了背景吸收。试验证明，UV法操作简便快速， 适用于生产过程中产品的质量控制。HPLC法分离度高，适用于成品检验和杂质、降解产物的追踪检查，也作为制剂含量均匀度和溶出度考察。
(收稿日期：1998-12-01)
作者简介：邓雪娥，女，1964年12月生，主管药师，北京友谊医院，100050, 百拇医药
单位：北京友谊医院(100050) 邓雪娥 曹国颖
关键词：
医学检验
盐酸噻氯匹定片(ticlopidinetablet)，又名Ticlid(力抗栓)，是血小板聚集抑制剂，适用于血管手术和体外循环发生的血栓、 栓塞及慢性动脉闭塞等循环障碍〔1〕。以往，噻氯匹定的含量测定均采用双相滴定法，方法较繁琐，终点难以判断，必须用力振摇，为此我们采用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定含量，方法简便准确，现报告如下。
1 仪器和试药
1.1 仪器：日本导津公司生产的UV-2201紫外分光光度计，美国SP公司p4000高效液相色谱仪、UV2000高效液相色谱仪、UV2000检测器、SPDATAJET积分仪。
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1.2 试药：力抗栓(Ticlid)，250mg/片，法国Sanofi公司生产，批号：951102；盐酸噻氯匹定对照品：天津新新药业公司提供，批号：951019，标示量：99.35%。
2 试验方法
2.1 高效液相色谱法
2.1.1 检测波长的选择：以蒸馏水为溶媒，将Ticlid对照品配制成80mg/L溶液，在200nm～400nm波长范围内对蒸馏水、对照品、辅料扫描，Ticlid在267nm、276nm和220nm处有最大吸收，而且空白和辅料无干扰，所以我们选择220nm作为HPLC检测波长。
2.1.2 色谱条件和检测方法：SPHERI-5RP-185micro220×4.6mm色谱柱，流动相1/30M磷酸盐缓冲液：乙晴(3∶7)，pH＝7.1，流速1.5ml/min，检测波长220nm，纸速0.25cm/min，柱温25℃，在此色谱条件下，保留时间适中，峰形好，辅料不干扰测定。
, 百拇医药
2.1.3 标准曲线的制作：精密称取在105℃干燥至恒重的噻氯匹定对照品100mg， 至100ml容量瓶中， 加蒸馏水溶解并稀释成20、10、5.0、2.5、1.25、0.625mg/L的标准溶液，吸取10μl进样， 将峰面积与浓度进行线性回归，得回归方程：C＝6.9009A-7.3544，r＝0.9995。
2.1.4 回收率试验：精密称取盐酸噻氯匹定对照品100mg，按处方比例加入辅料，混匀，置100ml容量瓶中，过滤，续滤液用蒸馏水稀释至20mg/L，按HPLC法进行回收率试验，得平均回收率9925%(n＝6)，RSD为089%。
2.2 紫外分光光度法
2.2.1 测定波长的选择：噻氯匹定的UV扫描图谱，我们选择λ＝276nm为紫外吸收波长，蒸馏水做空白。
2.2.2 噻氯匹定浓度与吸收光的关系：精密称定105℃干燥至恒重的对照品100mg，以蒸馏水配制成80、120、160、200、320mg/L梯度溶液， 在276nm处分别测定吸收度，回归方程： A＝0.0014C-0.0047，r＝0.99998证明噻氯匹定水溶液在80mg/L～320mg/L范围内，浓度和吸收度呈良好的线性关系。
, 百拇医药
2.2.3 回收率试验：精密称取噻氯匹定对照品100mg，分别按处方比例加入辅料，混匀，按UV法进行回收率试验，得平均回收率98.66%(n＝6)，RSD为1.05%。
3 样品的测定
力抗栓20片，精密称定，研细，混合均匀。精密称取适量(相当1粒重)， 分别按HPLC和UV回收率试验方法测定片剂中噻氯匹定百分含量，测定5次，结果见表1。
表1 样品的测定(n＝5)
批号
HPLC法
UV法
部颁标准
含量%
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RSD%
含量%
RSD%
含量%
RSD%
片剂(951102)
100.27
1.05
100.08
2.81
101.94
6.11
4 讨论
, 百拇医药
卫生部批准的盐酸噻氯匹定片剂〔批准文号 WS-130(X-112)-95〕的含量测定是将内容物置具塞锥形瓶中，加水20ml使之溶解，加氯仿30ml和稀硫酸5ml， 强力振摇，加二甲基黄—亚甲蓝混合指示剂2滴，在不断振摇下用0.45%磺基于二酸钠二甲酯溶液滴定至氯仿层由绿色转变为淡红色，同条件下做空白。该方法较繁琐，终点判断困难。
本文研究了HPLC法和UV法测定盐酸噻氯匹定片剂的百分含量，结果与部颁标准比较，无显著差异。色谱条件中选用220nm为检测波长， 为使噻氯匹定有最大吸收，乙晴作为流动相减少了背景吸收。试验证明，UV法操作简便快速， 适用于生产过程中产品的质量控制。HPLC法分离度高，适用于成品检验和杂质、降解产物的追踪检查，也作为制剂含量均匀度和溶出度考察。
(收稿日期：1998-12-01)
作者简介：邓雪娥，女，1964年12月生，主管药师，北京友谊医院，100050, 百拇医药