实验性血管性痴呆大鼠动物模型研究进展
作者：陈振虎 赖新生 江钢辉
单位：陈振虎(广州中医药大学针灸推拿学院 510405)；赖新生(广州中医药大学针灸推拿学院 510405)；江钢辉(广州中医药大学针灸推拿学院 510405)
关键词：
山西医药杂志000518 血管性痴呆(vascular dementia,VD)是最常见的老年期痴 呆之一，主要是由于脑血管因素引起的脑组织血液循环障碍，脑部机能减退而致的一种认知 功能缺损的综合征。欧美、日本等国的流行病学报告指出[1]，发生VD的危险因素 主要有高血压、糖尿病、高脂血症、血液因素等，但目前尚无完整而统一的认识。因此建立 一种理想的VD动物模型对于本病的基础研究和临床防治都有重要的价值。自从1979年Pulsin elli和Brierley用大鼠四血管阻断法(4-VO)进行相关研究以来，许多学者都致力于寻找和 研究一种更理想的接近人类实际情况的VD动物模型，并且取得了一定的进展。本文就近年来 的一些相关文献综述如下。
, 百拇医药
1 实验动物
目前研究血管性痴呆的实验动物多采用大鼠。大鼠为哺乳类动物，其神经系统(尤其是大脑) 和感觉器官都高度发达，能准确感知条件的变化并迅速作出反应，且大鼠脑血管分布与人类 酷似，其繁殖快，数量大，易饲养，作为实验材料的来源容易，因此在研究中被广泛使用。
2 动物模型
2.1 四血管阻断法(4-VO)[2]：将实验大鼠用10%的水合氯醛(0.5 mL/100g)腹 腔麻醉后，背侧颈正中切口，暴露双侧第一颈椎横突翼小孔，用直径为0.5 mm的电凝针插 入双侧翼小孔烧灼双侧椎动脉，造成永久性闭塞。然后腹侧颈正中切口，分离双侧颈总动脉 ，穿结备用。24 h后，用微动脉夹夹闭双侧颈总动脉5 min，共夹闭3次，每次间隔1 h。术 后手术部位施以适量青霉素对抗感染，然后缝合，常规饲养观察。4-VO为目前国际公认的V D造模方法，它可高度模拟VD的发病特点，且缺血后生理指标稳定，不影响缺血后结果，病 理改变较为充分、明确，中分指数低，无明显肢体运动障碍，但存活率相对较低。
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2.2 立体定向光化学诱导脑梗死模型[3]：大鼠麻醉后固定在立体定位仪上，从 尾静脉上注射玫瑰红(RB，20 mg/kg)。然后切开局部头皮暴露颅骨，用光导纤维引导冷光定 向照射裸露的颅骨20 min照射部位即产生局部梗死灶。由于RB受特定波长的冷光照射激活， 释放自由基，导致血管内皮细胞发生脂质过氧化反应，引起血管内皮损伤，同时白细胞等被 激活，启动局部血凝系统从而引起局部血管内皮血栓形成。因此，该方法梗死部位明确，操 作简单，手术创伤面小，重复性好，功能障碍明显，动物存活时间长，而且病理改变和超微 结构变化与人类血管性痴呆相似。
2.3 高脂血症血管性痴呆大鼠模型[4]：首先将实验大鼠用高脂饲料喂养1个月后 ，测其血脂经证实已增高后，再用10%水合氯醛，按3 mL/kg腹腔麻醉，颈正中去毛，碘酒消 毒，腹侧颈正中切口，暴露并分离双侧颈总动脉，穿线备用。缺血时闭阻双侧颈总动脉3次 ，每次10 min，每次间隔10 min，之后缝合伤口即制成高脂血症VD模型。此法是模拟VD发病 的危险因素，如高脂血症而建立的一种动物模型，接近人类实际情况。
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2.4 舌下静脉注入铁粉法[5]：用戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，然 后固定于动物大脑立体定位仪上，常规消毒，正中切开头皮暴露颅骨，选以下部位安放电极 ：额部位于前囱前2 mm向左旁开2 mm，参考电极位于远额窦。在上述部位用小螺丝固定于头 骨上，穿过内板障，在额部记录电极处在正后方固定一直径为5 mm、0.2 T高斯磁场的小磁 铁，最后用自凝牙托水和牙托粉封固。术后3 d等刀口愈合，体重恢复后，开始进行迷宫及P 300测试。将已达迷宫训练标准并完成P300测定的实验大鼠，用2.5%硫喷妥钠 (4 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，用Fe3O4粉(铁粒子直径为6 μm，用量56.4 mg/kg)溶于 1.5 mL生理盐水中，于1 min内沿大鼠舌下静脉注入，从而造成VD大鼠模型。
2.5 颈内动脉注射微小栓子模型[6]：从大鼠一侧颈内动脉注入纤维蛋白、血凝 块、中心球、塑料微小栓子及血栓诱导剂致缺血性中风模型的报道很多。本法是取同种大鼠 无菌自然干燥血凝块，研碎后经200 μm筛孔过筛备用，应用时用生理盐水0.5 mL加血凝块 100 mg制成混悬液，显微镜下测量直径为40～200 μm。然后将实验大鼠用水合氯醛腹腔麻 醉(35 mg/100 g)，颈部正中切开暴露双侧颈总动脉，分离双侧颈总动脉。从双侧颈总动脉 推注栓子盐水混悬液，使栓子通过颈内动脉进入颅内至大脑各动脉，造成多灶性脑梗死。
, 百拇医药
尽管对这类模型的综合评价是梗死部位不固定，梗死灶大小不一致，但由于其能在大脑前动 脉和大脑中动脉供血区形成多个梗死灶，且与临床上多发性脑梗死痴呆(multi-infarct de mentia,MID)病人所见相似，故不少学者认为将其作为VD模型较为合适。
2.6 双侧颈总动脉结扎模型(2-VO)[7]：将实验大鼠用戊巴比妥钠(40 mg/kg)麻 醉，仰卧位固定于蛙板上，颈正中去毛，碘酒酒精消毒，颈部正中切口，分离双侧颈总动脉 并埋线，而后用丝线结扎双侧颈总动脉，缝合伤口。此法制作简单，但难以长期存活，不利 于长时间观察。
2.7 大脑中动脉凝闭(MCAO)及再灌注模型[8]：选用长16 mm的丝线栓子，前端5 mm硅化成柱状，将此栓子从大鼠颈内动脉分支处插入，阻断大脑中动脉血流。缺血1 h后再 拔出栓子，使其血流再通，从而造成VD模型。
, http://www.100md.com 此外尚有左心室注射液体石蜡(即将液体石蜡注入实验大鼠左心室中造成模型)和高血压复合 VD模型等等方法。这些VD模型的制备，都是从模拟人类VD发病的某一个侧面来完成的，与临 床实际情况还有一定的偏离，尚需不断完善。
3 分析与展望
学习记忆是脑的重要功能，一般认为建立一种理想的学习记忆障碍模型应涉及正常记忆的脑 机制，能复制引起记忆损害的多种病理变化，以及它的实用性。因此，分析VD动物模型，对 了解脑是如何完成学习记忆可提供有益的信息，并且可以为评估学习记忆障碍的治疗提供一 个有效的工具。相信随着科学技术水平及实验手段的不断提高，理想的VD动物模型将会问世 。
基金项目：广东省自然科学 基金资助项目(960548)
作者简介：陈振虎，男，1972年12月生，医师，广州中医药大学针灸推拿学院，510405
, 百拇医药
参考文献
1.余绍祖.血管性痴呆.内科危急重症杂志，1997，3(2)：74-7 6
2.贾健民，贾健平.大鼠脑反复缺血致不可逆性学习记忆障碍的 研究.心理学报，1995，27(1)：69-71
3.向敬，匡培根，张凤英，等.颞叶梗塞所致学习记忆障碍的机 制研究(微透析分析和超微结构观察).心理学报，1994，2：190-194
4.唐启盛，黄启福，郭建文.高脂血症大鼠缺血再灌流诱发行为 学障碍模型的实验研究.北京中医药大学学报，1997，20(5)：34-36
5.林坚，王子栋.血管性痴呆动物模型.中国应用生理学杂志，1 998，14(1)：89-91
6.陈俊抛，田时周，于薇薇，等.多发性脑梗塞痴呆动物模型的 研究.中华神经精神科杂志，1994，27(5)：311
7.刘汇波，叶翠飞，李斌，等.双侧颈总动脉结扎对大鼠学习记 忆功能和海马组织形态学的影响.北京中医药大学学报，1996，19(6)：62
8.长泽治夫，小暮久也.脑血管痴呆の动物モラル.医学のあゆ み，1991，158(9)：613
(收稿日期：2000-04-11), 百拇医药
单位：陈振虎(广州中医药大学针灸推拿学院 510405)；赖新生(广州中医药大学针灸推拿学院 510405)；江钢辉(广州中医药大学针灸推拿学院 510405)
关键词：
山西医药杂志000518 血管性痴呆(vascular dementia,VD)是最常见的老年期痴 呆之一，主要是由于脑血管因素引起的脑组织血液循环障碍，脑部机能减退而致的一种认知 功能缺损的综合征。欧美、日本等国的流行病学报告指出[1]，发生VD的危险因素 主要有高血压、糖尿病、高脂血症、血液因素等，但目前尚无完整而统一的认识。因此建立 一种理想的VD动物模型对于本病的基础研究和临床防治都有重要的价值。自从1979年Pulsin elli和Brierley用大鼠四血管阻断法(4-VO)进行相关研究以来，许多学者都致力于寻找和 研究一种更理想的接近人类实际情况的VD动物模型，并且取得了一定的进展。本文就近年来 的一些相关文献综述如下。
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1 实验动物
目前研究血管性痴呆的实验动物多采用大鼠。大鼠为哺乳类动物，其神经系统(尤其是大脑) 和感觉器官都高度发达，能准确感知条件的变化并迅速作出反应，且大鼠脑血管分布与人类 酷似，其繁殖快，数量大，易饲养，作为实验材料的来源容易，因此在研究中被广泛使用。
2 动物模型
2.1 四血管阻断法(4-VO)[2]：将实验大鼠用10%的水合氯醛(0.5 mL/100g)腹 腔麻醉后，背侧颈正中切口，暴露双侧第一颈椎横突翼小孔，用直径为0.5 mm的电凝针插 入双侧翼小孔烧灼双侧椎动脉，造成永久性闭塞。然后腹侧颈正中切口，分离双侧颈总动脉 ，穿结备用。24 h后，用微动脉夹夹闭双侧颈总动脉5 min，共夹闭3次，每次间隔1 h。术 后手术部位施以适量青霉素对抗感染，然后缝合，常规饲养观察。4-VO为目前国际公认的V D造模方法，它可高度模拟VD的发病特点，且缺血后生理指标稳定，不影响缺血后结果，病 理改变较为充分、明确，中分指数低，无明显肢体运动障碍，但存活率相对较低。
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2.2 立体定向光化学诱导脑梗死模型[3]：大鼠麻醉后固定在立体定位仪上，从 尾静脉上注射玫瑰红(RB，20 mg/kg)。然后切开局部头皮暴露颅骨，用光导纤维引导冷光定 向照射裸露的颅骨20 min照射部位即产生局部梗死灶。由于RB受特定波长的冷光照射激活， 释放自由基，导致血管内皮细胞发生脂质过氧化反应，引起血管内皮损伤，同时白细胞等被 激活，启动局部血凝系统从而引起局部血管内皮血栓形成。因此，该方法梗死部位明确，操 作简单，手术创伤面小，重复性好，功能障碍明显，动物存活时间长，而且病理改变和超微 结构变化与人类血管性痴呆相似。
2.3 高脂血症血管性痴呆大鼠模型[4]：首先将实验大鼠用高脂饲料喂养1个月后 ，测其血脂经证实已增高后，再用10%水合氯醛，按3 mL/kg腹腔麻醉，颈正中去毛，碘酒消 毒，腹侧颈正中切口，暴露并分离双侧颈总动脉，穿线备用。缺血时闭阻双侧颈总动脉3次 ，每次10 min，每次间隔10 min，之后缝合伤口即制成高脂血症VD模型。此法是模拟VD发病 的危险因素，如高脂血症而建立的一种动物模型，接近人类实际情况。
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2.4 舌下静脉注入铁粉法[5]：用戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，然 后固定于动物大脑立体定位仪上，常规消毒，正中切开头皮暴露颅骨，选以下部位安放电极 ：额部位于前囱前2 mm向左旁开2 mm，参考电极位于远额窦。在上述部位用小螺丝固定于头 骨上，穿过内板障，在额部记录电极处在正后方固定一直径为5 mm、0.2 T高斯磁场的小磁 铁，最后用自凝牙托水和牙托粉封固。术后3 d等刀口愈合，体重恢复后，开始进行迷宫及P 300测试。将已达迷宫训练标准并完成P300测定的实验大鼠，用2.5%硫喷妥钠 (4 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，用Fe3O4粉(铁粒子直径为6 μm，用量56.4 mg/kg)溶于 1.5 mL生理盐水中，于1 min内沿大鼠舌下静脉注入，从而造成VD大鼠模型。
2.5 颈内动脉注射微小栓子模型[6]：从大鼠一侧颈内动脉注入纤维蛋白、血凝 块、中心球、塑料微小栓子及血栓诱导剂致缺血性中风模型的报道很多。本法是取同种大鼠 无菌自然干燥血凝块，研碎后经200 μm筛孔过筛备用，应用时用生理盐水0.5 mL加血凝块 100 mg制成混悬液，显微镜下测量直径为40～200 μm。然后将实验大鼠用水合氯醛腹腔麻 醉(35 mg/100 g)，颈部正中切开暴露双侧颈总动脉，分离双侧颈总动脉。从双侧颈总动脉 推注栓子盐水混悬液，使栓子通过颈内动脉进入颅内至大脑各动脉，造成多灶性脑梗死。
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尽管对这类模型的综合评价是梗死部位不固定，梗死灶大小不一致，但由于其能在大脑前动 脉和大脑中动脉供血区形成多个梗死灶，且与临床上多发性脑梗死痴呆(multi-infarct de mentia,MID)病人所见相似，故不少学者认为将其作为VD模型较为合适。
2.6 双侧颈总动脉结扎模型(2-VO)[7]：将实验大鼠用戊巴比妥钠(40 mg/kg)麻 醉，仰卧位固定于蛙板上，颈正中去毛，碘酒酒精消毒，颈部正中切口，分离双侧颈总动脉 并埋线，而后用丝线结扎双侧颈总动脉，缝合伤口。此法制作简单，但难以长期存活，不利 于长时间观察。
2.7 大脑中动脉凝闭(MCAO)及再灌注模型[8]：选用长16 mm的丝线栓子，前端5 mm硅化成柱状，将此栓子从大鼠颈内动脉分支处插入，阻断大脑中动脉血流。缺血1 h后再 拔出栓子，使其血流再通，从而造成VD模型。
, http://www.100md.com 此外尚有左心室注射液体石蜡(即将液体石蜡注入实验大鼠左心室中造成模型)和高血压复合 VD模型等等方法。这些VD模型的制备，都是从模拟人类VD发病的某一个侧面来完成的，与临 床实际情况还有一定的偏离，尚需不断完善。
3 分析与展望
学习记忆是脑的重要功能，一般认为建立一种理想的学习记忆障碍模型应涉及正常记忆的脑 机制，能复制引起记忆损害的多种病理变化，以及它的实用性。因此，分析VD动物模型，对 了解脑是如何完成学习记忆可提供有益的信息，并且可以为评估学习记忆障碍的治疗提供一 个有效的工具。相信随着科学技术水平及实验手段的不断提高，理想的VD动物模型将会问世 。
基金项目：广东省自然科学 基金资助项目(960548)
作者简介：陈振虎，男，1972年12月生，医师，广州中医药大学针灸推拿学院，510405
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参考文献
1.余绍祖.血管性痴呆.内科危急重症杂志，1997，3(2)：74-7 6
2.贾健民，贾健平.大鼠脑反复缺血致不可逆性学习记忆障碍的 研究.心理学报，1995，27(1)：69-71
3.向敬，匡培根，张凤英，等.颞叶梗塞所致学习记忆障碍的机 制研究(微透析分析和超微结构观察).心理学报，1994，2：190-194
4.唐启盛，黄启福，郭建文.高脂血症大鼠缺血再灌流诱发行为 学障碍模型的实验研究.北京中医药大学学报，1997，20(5)：34-36
5.林坚，王子栋.血管性痴呆动物模型.中国应用生理学杂志，1 998，14(1)：89-91
6.陈俊抛，田时周，于薇薇，等.多发性脑梗塞痴呆动物模型的 研究.中华神经精神科杂志，1994，27(5)：311
7.刘汇波，叶翠飞，李斌，等.双侧颈总动脉结扎对大鼠学习记 忆功能和海马组织形态学的影响.北京中医药大学学报，1996，19(6)：62
8.长泽治夫，小暮久也.脑血管痴呆の动物モラル.医学のあゆ み，1991，158(9)：613
(收稿日期：2000-04-11), 百拇医药