高效液相色谱法测定脊舒锭含量
作者：洪志玲 陈素俭 张君倩
单位：厦门市药品检验所
关键词：
海峡药学990223 脊舒锭是作用于脊椎的骨骼肌松弛剂、镇静剂[1]。其主要成分为巴氯酚即(消旋)—(氨基甲基)-4-氯苯丙酸。原检验标准[2]中巴氯酚与水杨醛作用呈黄色，静置45 min后进行紫外分光光度法测定。由于显色反应影响因素较多，显色剂、温度、时间等因素都影响测定结果。本文采用高效液相色谱法测定巴氯酚的含量，方法简便、准确、灵敏度高、重现性好。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Waters 510型液相色谱仪；Waters 490紫外检测仪；Waters 740积分仪。
1.2 试药 巴氯酚对照品、供试品由台湾卫达化学制药股份有限公司提供；甲醇、冰醋酸、庚烷磺酸钠均为分析纯。
2 实验方法及结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Spherisorb ODS 5 μm，150 mm×4.6 mm，i.d.流动相：0.3 mol/L，醋酸溶液∶甲醇∶0.36 mol/L庚烷磺酸钠溶液(55∶44∶2)；流速：1.5 ml/min。
2.2 线性关系 取巴氯酚对照品25 mg，精密称定，置25 ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、及5.0 ml，分别置于10 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。各取20 μl进样，以峰面积为纵坐标(Y)，对照品浓度为横坐标(X)，作图得一直线，其回归方程为Y＝-134.5+1576.5X，r＝0.9998，实验结果表明，巴氯酚在100 mg～500 mg/L范围内，峰面积与浓度成良好的线性关系。
2.3 回收率试验 按标准加入法，取不同量巴氯酚对照品溶液加入一定量的样品溶液中，按上述色谱条件，分别进样20 μl测定，结果(见表1)，表明本法有良好的回收率。
表1 回 收 率 测 定 结 果(n＝5) 加入量(mg)
实测量(mg)
回收率(%)
平均回收率
RSD(%)
0.448
0.453
101.12
1.344
1.345
100.07
2.240
2.251
100.49
100.5
1.3
2.688
2.653
98.69
3.584
3.666
102.29
2.4 样品的测定 分别取不同批号的脊舒锭10片，精密称定，研细、精密称取细粉0.1 g，置25 ml量瓶中，加流动相使其溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液20 μl进样测定，结果(见表2)，色谱图(见图1)。
表2 高效液相色谱法与显色法测定结果及比较 批 号
高效液相色谱法(%)
显色法(%)
709010
96.7
97.9
700912
98.1
99.9
701006
98.3
100.0
图1 色 谱 图
3 小结
本文建立的高效液相色谱法与原标准比较，3批样品中巴氯酚的测定结果基本一致，但方法更简便，准确；且原标准以甲醇为溶剂，由于巴氯酚不易溶于有机溶剂，本法以流动相为溶剂，溶解效果更好。
参考文献
1.王泽民等：当代结构药物全集，北京，北京科学技术出版社，1993；3739
2.企业标准, 百拇医药
单位：厦门市药品检验所
关键词：
海峡药学990223 脊舒锭是作用于脊椎的骨骼肌松弛剂、镇静剂[1]。其主要成分为巴氯酚即(消旋)—(氨基甲基)-4-氯苯丙酸。原检验标准[2]中巴氯酚与水杨醛作用呈黄色，静置45 min后进行紫外分光光度法测定。由于显色反应影响因素较多，显色剂、温度、时间等因素都影响测定结果。本文采用高效液相色谱法测定巴氯酚的含量，方法简便、准确、灵敏度高、重现性好。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Waters 510型液相色谱仪；Waters 490紫外检测仪；Waters 740积分仪。
1.2 试药 巴氯酚对照品、供试品由台湾卫达化学制药股份有限公司提供；甲醇、冰醋酸、庚烷磺酸钠均为分析纯。
2 实验方法及结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Spherisorb ODS 5 μm，150 mm×4.6 mm，i.d.流动相：0.3 mol/L，醋酸溶液∶甲醇∶0.36 mol/L庚烷磺酸钠溶液(55∶44∶2)；流速：1.5 ml/min。
2.2 线性关系 取巴氯酚对照品25 mg，精密称定，置25 ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、及5.0 ml，分别置于10 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。各取20 μl进样，以峰面积为纵坐标(Y)，对照品浓度为横坐标(X)，作图得一直线，其回归方程为Y＝-134.5+1576.5X，r＝0.9998，实验结果表明，巴氯酚在100 mg～500 mg/L范围内，峰面积与浓度成良好的线性关系。
2.3 回收率试验 按标准加入法，取不同量巴氯酚对照品溶液加入一定量的样品溶液中，按上述色谱条件，分别进样20 μl测定，结果(见表1)，表明本法有良好的回收率。
表1 回 收 率 测 定 结 果(n＝5) 加入量(mg)
实测量(mg)
回收率(%)
平均回收率
RSD(%)
0.448
0.453
101.12
1.344
1.345
100.07
2.240
2.251
100.49
100.5
1.3
2.688
2.653
98.69
3.584
3.666
102.29
2.4 样品的测定 分别取不同批号的脊舒锭10片，精密称定，研细、精密称取细粉0.1 g，置25 ml量瓶中，加流动相使其溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液20 μl进样测定，结果(见表2)，色谱图(见图1)。
表2 高效液相色谱法与显色法测定结果及比较 批 号
高效液相色谱法(%)
显色法(%)
709010
96.7
97.9
700912
98.1
99.9
701006
98.3
100.0
图1 色 谱 图
3 小结
本文建立的高效液相色谱法与原标准比较，3批样品中巴氯酚的测定结果基本一致，但方法更简便，准确；且原标准以甲醇为溶剂，由于巴氯酚不易溶于有机溶剂，本法以流动相为溶剂，溶解效果更好。
参考文献
1.王泽民等：当代结构药物全集，北京，北京科学技术出版社，1993；3739
2.企业标准, 百拇医药