IL-4和IFN-γ对哮喘患儿淋巴细胞CD23表达的调控
作者：韩连书 苏渊 孔宪涛 李莉 张玲珍
单位：韩连书 苏渊 孔宪涛① 李莉① 张玲珍①(第二军医大学附属长征医院儿科，上海200003)
关键词：
中国免疫学杂志/990118 CD23是一种跨膜糖蛋白，主要分布于B细胞、单核/巨噬细胞和T细胞。近年研究表明淋巴细胞CD23的表达与哮喘的发病有关[1]。本研究观察了白细胞介素4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)对哮喘和正常儿童淋巴细胞CD23表达的影响，以便进一步揭示CD23、IL-4、IFN-γ在哮喘发病机制中的作用。
中国图书分类号 R562.25
1 材料与方法
1.1 研究对象 根据儿童哮喘诊断标准选择哮喘患儿24例，均处于发作期，男14例，女10例，年龄4～14岁，平均9岁。正常儿童16例，男9例，女7例，年龄6～13岁，平均10岁。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 细胞培养和刺激 将外周血淋巴细胞用RPMI 1640培养液配成1×106 ml-1细胞浓度，留取1 ml 用于培养前CD23检测。然后每例患者的淋巴细胞均按1×106/孔加入24孔板的4个孔内，再分别加入IL-4(100 U/ml)、IFN-γ(500 U/ml)、IL-4(100 U/ml)+IFN-γ(500 U/ml)和RPMI 1640(未刺激对照)，置5%CO2，37℃细胞培养箱内培养72 h后取出，洗涤细胞3次，进行CD23分子检测。
1.2.2 细胞膜CD23分子检测 采用抗CD23单抗间接免疫荧光标记流式细胞仪分析技术进行检测[2]。
2 结果
2.1 哮喘患儿淋巴细胞CD23的表达 哮喘患儿淋巴细胞CD23阳性率为(13.40±3.87)%，正常儿童为(3.50±1.42)%，两组差异显著(P<0.001)。
, 百拇医药
2.2 IL-4和IFN-γ对正常儿童淋巴细胞CD23表达的调控 正常儿童淋巴细胞经培养刺激后CD23阳性率变化见表1。
表1 IL-4和IFN-γ对正常儿童淋巴细胞CD23表达的调控(
±s，%，n=16)
Tab.1 Regulation of the CD23 expression on lymphocytes in healthy children by IL-4 and IFN-γ(±s，%，n=16)
CD23 positive rate(%)
t
, 百拇医药 P
IL-4
5.77±1.97
11.745 8
<0.001
IFN-γ
1.66±0.76
7.909 8
<0.001
IL-4+IFN-γ
4.24±1.72
11.336 01)
, 百拇医药
<0.001
Control
2.36±0.93
Note:1)IL-4+IFN-γ vs IL-4
2.3 IL-4和IFN-γ对哮喘患儿淋巴细胞CD23表达的调控 哮喘患儿淋巴细胞经培养和刺激后CD23阳性率变化见表2。
表2 IL-4和IFN-γ对哮喘患儿淋巴细胞CD23表达的调控(±s，%，n=16)
Tab.2 Regulation of the CD23 expression on lymphocytes in asthmatic children by IL-4 and IFN-γ(±s，%，n=16)
, http://www.100md.com
CD23 positive rate(%)
t
P
IL-4
23.16±5.12
10.014
<0.001
IFN-γ
4.66±1.59
6.391
<0.001
IL-4+IFN-γ
, 百拇医药
14.32±4.27
15.1291)
<0.001
Control
6.87±2.06
Note:1)IL-4+IFN-γ vs IL-42.4 IL-4和IFN-γ对正常和哮喘儿童淋巴细胞CD23表达影响程度的比较 哮喘儿童IL-4刺激组CD23阳性率较未刺激组增加2.47±0.96倍，显著高于正常儿童的1.48±0.36倍(P<0.01)。IFN-γ刺激组哮喘儿童CD23阳性率较未刺激组下降(51.00±14.00)%，显著高于正常儿童的(33.00±14.00)%，P<0.01。
3 讨论
, 百拇医药
CD23是IgE的低亲和力受体，其自身可裂解为多种可溶性片段(sCD23)。CD23和sCD23具有多种免疫调节功能，主要为促进T、B细胞分化成熟、促进IgE的合成和释放[3]。本研究证实哮喘患儿淋巴细胞CD23的表达显著增加，进一步表明CD23的表达与哮喘的发病有关。
本研究发现，淋巴细胞CD23的持续表达需要刺激因素的诱导，IL-4可促进CD23的表达，IFN-γ则抑制CD23的表达。IFN-γ还可抑制IL-4诱导的CD23表达，两者在CD23的表达调控上起拮抗作用，与Gagro等研究结果相吻合[4]。另有报道IL-4对CD23表达的促进作用在于诱导CD23 mRNA转录增加，IFN-γ的抑制作用是通过抑制CD23 mRNA的转录和促进CD23的裂解[5]。尽管IL-4和IFN-γ对正常和哮喘儿童淋巴细胞CD23的表达均有促进或抑制作用，但影响程度并不一致。本研究发现在相同条件下IL-4的促进程度及IFN-γ的抑制程度对哮喘患儿明显强于对正常儿童，表明哮喘患儿的淋巴细胞对IL-4或IFN-γ的刺激反应更敏感。本研究结果提示IL-4和IFN-γ可能通过调控CD23的表达参与哮喘的发病。
, 百拇医药
①第二军医大学附属长征医院实验科，上海200003
作者简介：韩连书，男，33岁，硕士，主治医师，主要从事哮喘病研究；
苏 渊，男，58岁，教授，主要从事儿保及小儿呼吸病研究
4 参考文献
[1] Sarfati M,Fournier S,Wu C Y et al.Expression regulation and function of human Fc ε RII (CD23) antigen.Immunol Res,1992;11:260
[2] 徐德胜，项树林，喻学忠 et al. 人外周血淋巴细胞CD23分子表达研究.上海免疫学杂志，1994；14(1)：1
[3] 韩连书，苏 渊.IgE的低亲和力受体与过敏性哮喘.国外医学.儿科分册，1995；22(5)：245
, http://www.100md.com
[4] Gagro A,Rabatic S.Allergen-induced CD23 on CD4+ T lymphocytes and CD21 on B lymphocytes in patients with allergic asthma:evidence and regulation.Eur J Immunol,1994;241(5):1109
[5] Vecchiarelli A,Siracusa A,Monari C et al. Cytokine regulation of low-affinity IgE receptor (CD23) on monocytes from asthmatic subjects.Clin Exp Immunol,1994;97(2):248
〔收稿1996-06-18 二次修回1998-06-04〕, http://www.100md.com
单位：韩连书 苏渊 孔宪涛① 李莉① 张玲珍①(第二军医大学附属长征医院儿科，上海200003)
关键词：
中国免疫学杂志/990118 CD23是一种跨膜糖蛋白，主要分布于B细胞、单核/巨噬细胞和T细胞。近年研究表明淋巴细胞CD23的表达与哮喘的发病有关[1]。本研究观察了白细胞介素4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)对哮喘和正常儿童淋巴细胞CD23表达的影响，以便进一步揭示CD23、IL-4、IFN-γ在哮喘发病机制中的作用。
中国图书分类号 R562.25
1 材料与方法
1.1 研究对象 根据儿童哮喘诊断标准选择哮喘患儿24例，均处于发作期，男14例，女10例，年龄4～14岁，平均9岁。正常儿童16例，男9例，女7例，年龄6～13岁，平均10岁。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 细胞培养和刺激 将外周血淋巴细胞用RPMI 1640培养液配成1×106 ml-1细胞浓度，留取1 ml 用于培养前CD23检测。然后每例患者的淋巴细胞均按1×106/孔加入24孔板的4个孔内，再分别加入IL-4(100 U/ml)、IFN-γ(500 U/ml)、IL-4(100 U/ml)+IFN-γ(500 U/ml)和RPMI 1640(未刺激对照)，置5%CO2，37℃细胞培养箱内培养72 h后取出，洗涤细胞3次，进行CD23分子检测。
1.2.2 细胞膜CD23分子检测 采用抗CD23单抗间接免疫荧光标记流式细胞仪分析技术进行检测[2]。
2 结果
2.1 哮喘患儿淋巴细胞CD23的表达 哮喘患儿淋巴细胞CD23阳性率为(13.40±3.87)%，正常儿童为(3.50±1.42)%，两组差异显著(P<0.001)。
, 百拇医药
2.2 IL-4和IFN-γ对正常儿童淋巴细胞CD23表达的调控 正常儿童淋巴细胞经培养刺激后CD23阳性率变化见表1。
表1 IL-4和IFN-γ对正常儿童淋巴细胞CD23表达的调控(
±s，%，n=16)Tab.1 Regulation of the CD23 expression on lymphocytes in healthy children by IL-4 and IFN-γ(
±s，%，n=16)CD23 positive rate(%)
t
, 百拇医药 P
IL-4
5.77±1.97
11.745 8
<0.001
IFN-γ
1.66±0.76
7.909 8
<0.001
IL-4+IFN-γ
4.24±1.72
11.336 01)
, 百拇医药
<0.001
Control
2.36±0.93
Note:1)IL-4+IFN-γ vs IL-4
2.3 IL-4和IFN-γ对哮喘患儿淋巴细胞CD23表达的调控 哮喘患儿淋巴细胞经培养和刺激后CD23阳性率变化见表2。
表2 IL-4和IFN-γ对哮喘患儿淋巴细胞CD23表达的调控(
±s，%，n=16)Tab.2 Regulation of the CD23 expression on lymphocytes in asthmatic children by IL-4 and IFN-γ(
±s，%，n=16), http://www.100md.com
CD23 positive rate(%)
t
P
IL-4
23.16±5.12
10.014
<0.001
IFN-γ
4.66±1.59
6.391
<0.001
IL-4+IFN-γ
, 百拇医药
14.32±4.27
15.1291)
<0.001
Control
6.87±2.06
Note:1)IL-4+IFN-γ vs IL-42.4 IL-4和IFN-γ对正常和哮喘儿童淋巴细胞CD23表达影响程度的比较 哮喘儿童IL-4刺激组CD23阳性率较未刺激组增加2.47±0.96倍，显著高于正常儿童的1.48±0.36倍(P<0.01)。IFN-γ刺激组哮喘儿童CD23阳性率较未刺激组下降(51.00±14.00)%，显著高于正常儿童的(33.00±14.00)%，P<0.01。
3 讨论
, 百拇医药
CD23是IgE的低亲和力受体，其自身可裂解为多种可溶性片段(sCD23)。CD23和sCD23具有多种免疫调节功能，主要为促进T、B细胞分化成熟、促进IgE的合成和释放[3]。本研究证实哮喘患儿淋巴细胞CD23的表达显著增加，进一步表明CD23的表达与哮喘的发病有关。
本研究发现，淋巴细胞CD23的持续表达需要刺激因素的诱导，IL-4可促进CD23的表达，IFN-γ则抑制CD23的表达。IFN-γ还可抑制IL-4诱导的CD23表达，两者在CD23的表达调控上起拮抗作用，与Gagro等研究结果相吻合[4]。另有报道IL-4对CD23表达的促进作用在于诱导CD23 mRNA转录增加，IFN-γ的抑制作用是通过抑制CD23 mRNA的转录和促进CD23的裂解[5]。尽管IL-4和IFN-γ对正常和哮喘儿童淋巴细胞CD23的表达均有促进或抑制作用，但影响程度并不一致。本研究发现在相同条件下IL-4的促进程度及IFN-γ的抑制程度对哮喘患儿明显强于对正常儿童，表明哮喘患儿的淋巴细胞对IL-4或IFN-γ的刺激反应更敏感。本研究结果提示IL-4和IFN-γ可能通过调控CD23的表达参与哮喘的发病。
, 百拇医药
①第二军医大学附属长征医院实验科，上海200003
作者简介：韩连书，男，33岁，硕士，主治医师，主要从事哮喘病研究；
苏 渊，男，58岁，教授，主要从事儿保及小儿呼吸病研究
4 参考文献
[1] Sarfati M,Fournier S,Wu C Y et al.Expression regulation and function of human Fc ε RII (CD23) antigen.Immunol Res,1992;11:260
[2] 徐德胜，项树林，喻学忠 et al. 人外周血淋巴细胞CD23分子表达研究.上海免疫学杂志，1994；14(1)：1
[3] 韩连书，苏 渊.IgE的低亲和力受体与过敏性哮喘.国外医学.儿科分册，1995；22(5)：245
, http://www.100md.com
[4] Gagro A,Rabatic S.Allergen-induced CD23 on CD4+ T lymphocytes and CD21 on B lymphocytes in patients with allergic asthma:evidence and regulation.Eur J Immunol,1994;241(5):1109
[5] Vecchiarelli A,Siracusa A,Monari C et al. Cytokine regulation of low-affinity IgE receptor (CD23) on monocytes from asthmatic subjects.Clin Exp Immunol,1994;97(2):248
〔收稿1996-06-18 二次修回1998-06-04〕, http://www.100md.com