单位:北京地坛医院病毒研究室,北京100011
关键词:HIV/AIDS;病毒性肝炎;CD4+T细胞;CD8+T细胞
中国免疫学杂志991213 摘 要 目的:探讨HIV携带者或AIDS病人(简称HIV/AIDS)与肝炎病毒感染者的CD4+、CD8+淋巴细胞变化,并进行比较。方法:用免疫磁珠法(DYNA beads)检测CD4+、CD8+T淋巴细胞数,用双侧t检验进行统计学处理。结果:全部HIV/AIDS的CD4+T淋巴细胞降低,且幅度大,83.4%低于500细胞/μl。在病毒性肝炎中降低的百分比和幅度均明显低于前者,只有28.8%低于500细胞/μl,且24.2%大于800细胞/μl。与同一水平CD4+细胞相对应的HIV/AIDS CD8+T淋巴细胞水平显著高于病毒性肝炎,CD8+细胞水平随CD4+T细胞增加而升高。CD4+细胞平均水平较高的HIV感染者自觉症状与CD4+T细胞数之间无直接相关关系,说明只用CD4+T细胞数来估计病人机体状态或只根据病人症状估计机体免疫状态是不太准确的。结论:HIV/AIDS与病毒性肝炎存在不同程度的CD4+、CD8+T淋巴细胞异常;CD4+T细胞是HIV/AIDS的重要指标,但不是绝对指标;CD8+T细胞与病人病情的变化及预后之间可能存在着很重要的关系,需进一步研究。
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中国图书分类号 R446.63
Compare the counts of CD4+、CD8+T lymphocyte in HIV/AIDS and hepatitis patients
LIU Shun-Ai, QIN Jing,ZHANG Wei-Hua et al.
Virus Study Laboratory of Beijing Ditan Hospital,Beijing 100011
Abstract Objective:To study and discuss the change of CD4+、CD8+T lymphocyte in HIV/AIDS and viral hepatitis patients.Methods:DYNA beads method was performed to count the CD4+,CD8+T lymphocyte.Statistical analysis was done using bio-t test.Results: CD4+T lymphocyte counts in all of the HIV/AIDS patients were much lower than healthy people,83.4% of them were lower than 500 cell/μl.CD4+ T lymphocyte counts decreased in hepatitis too, but only 28.8% were lower than 500 cell/μl,24.2% were higher than 800 cell/μl. CD8+T lymphocyte counts were much higher in HIV/AIDS patients than in hepatitis patients with same CD4+T lymphocyte level. There was not direct correlation between sympton and CD4+ T lymphocyte level in HIV infected person,so can neither estimate the condition of patients only use CD4+ T lymphocyte counts nor estimate the immune status only with the patients condition.Conclusion:Both HIV/AIDS and viral hepatitis have abnormal CD4+,CD8+T lymphocyte counts at different level.CD4+T lymphocyte counts is an important parameter in HIV/AIDS,but it is not an absolute parameter.There might be a very important relationship exist between CD8+T lymphocyte level and the clinical course of patients.
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Key words HIV/AIDS Viral hepatitis CD4+T lymphocyte CD8+T lymphocyte
目前越来越多的研究表明,病毒感染性疾病中存在CD4+、CD8+T淋巴细胞数量及功能异常改变,如病毒性肝炎、艾滋病等。T淋巴细胞亚群的检测对控制这些疾病的发生、发展、了解发病机制、指导临床治疗都有极其重要的理论意义和临床意义。我院作为传染病专科医院对HIV/AIDS与病毒性肝炎进行了多年的T淋巴细胞亚群检测工作,现就近来的数据进行分析。
1 材料与方法
1.1 试剂 DYNA beads 及DYNAL 磁板为DYNAL公司产品;抗HIV抗体试剂盒为ORGANON公司产品;HBsAg及抗HCV抗体检测试剂盒为科华公司产品。
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1.2 病例来源 病毒性肝炎66例,为本院住院及门诊就诊患者,排除HIV感染;HIV/AIDS 48例,为本院住院及门诊就诊病人和云南楚雄戒毒康复中心患者,其中合并HBV 3例,合并HCV 34例,联合合并HBV、HCV 1例。选择8名健康志愿者作为正常人对照。
1.3 试验方法 用免疫磁珠法(DYNA beads)检测CD4+、CD8+细胞数。具体方法为把抗凝全血与抗CD14 单抗-DYNA beads混匀,反应10 min后用磁板去除CD14+单核细胞,把去除单核细胞的血移至含有抗CD4+单抗-DYNA beads及抗CD8单抗-DYNA beads的管中,再反应10 min后,用磁板选择CD4+、CD8+细胞,经过PBS反复洗2次和CTAB溶液洗脱细胞表面的beads,用结晶紫染色细胞核,最后用显微镜计细胞数。用抗HIV抗体试剂盒筛查肝炎病人,用HBsAg及抗HCV抗体试剂盒筛查HIV/AIDS病人。
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1.4 比较方法 分HIV/AIDS组与病毒性肝炎组,HIV/AIDS组包括合并病毒性肝炎和单纯HIV感染者,病毒性肝炎组为单纯病毒性肝炎感染者,已排除HIV感染。比较不同CD4+分组在HIV/AIDS与病毒性肝炎中所占百分比,我们又比较了与同一水平CD4+T细胞水平相对应的HIV/AIDS和病毒性肝炎的CD8+T细胞。另外,我们观察了HIV感染者自觉症状与CD4+细胞数的相关性和HIV感染者合并肝炎病毒感染组与不合并组的CD4+细胞变化。
1.5 统计学方法 组间均数比较采用双侧t检验。
2 结果
2.1 按CD4+T细胞的不同水平把所有病例分4个组,不同CD4+分组在HIV/AIDS与病毒性肝炎各自的整体中所占的比例,见表1。表1说明全部HIV/AIDS的 CD4+T细胞数降低且降低幅度大,83.4%(29.2%+54.2%)低于500细胞/μl;病毒性肝炎的CD4+T细胞降低幅度小,只有28.8%(6.1%+22.7%)低于500细胞/μl,且24.2%大于800细胞/μl。
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表1 不同CD4+分组在HIV/AIDS与病毒性肝炎中所占百分比
Tab.1 The percentage of different CD4+ T lymphocyte counts groups in HIV/AIDS and viral hepatitis CD4+ counts(cell/μl)
HIV/AIDS
Viral hepatitis
≤200
29.2%(14/48)
6.1%(4/66)
200~500
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54.2%(26/48)
22.7%(15/66)
500~800
16.6%(8/48)
47.0%(31/66)
≥800---
24.2%(16/66)
Note: Normal control:CD4+:(926±103) cell/μl;CD8+:(619±163) cell/μl(n=8); we dingoes it as obviously decrease when the counts of the CD4+ T lymphocyte less than 500 cell/μl
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2.2 与同一水平CD4+T细胞水平相对应的HIV/AIDS和病毒性肝炎的CD8+T细胞,见表2和图1。表2和图1说明HIV/AIDS CD8+水平显著高于病毒性肝炎,CD8+水平随CD4+增加而升高。
表2 HIV/AIDS和病毒性肝炎的CD8+T细胞(细胞/μl)
Tab.2 The counts of CD8+ T lymphocyte in HIV/AIDS and viral hepatitis(cell/μl) CD4+ counts (cell/μl)
HIV/AIDS
Viral hepatitis
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≤200
398.2±149.7(14)
152.5±82.2(4)1)
200~500
847.3±351.0(26)
283.0±211.8(15)2)
500~800
969.4±381.0(8)
485.2±214.2(31)2)
≥800---
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789.7±319.8(16)
Note:1)0.001
+:(926±103) cell/μl;CD8+:(619±163) cell/μl(n=8)
图1 CD4+与CD8+细胞相关关系图
Fig.1 The relationship between the counts of CD4+ and CD8+ T lymphocyte
2.3 观察HIV感染者的自觉症状与CD4+T细胞之间的相关关系,根据26例楚雄戒毒康复中心的HIV/AIDS患者陈述的病情,其中CD4+≤200细胞/μl者6例,CD4+200~500细胞/μl者16例,500~800细胞/μl者4例,其自觉症状与CD4+细胞数之间的关系见表3。
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表3 HIV感染者的自觉症状与CD4+T细胞之间的相关关系
Tab.3 The relationship between the symptoms of HIV/AIDS and the counts of the CD4+ T lymphocytes CD4+T counts (cell/μl)
Symptoms
362.5±161.1(12)
Fever,cough, body height decreased, resh etc.
346.8±167.9(14)1)
None
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Note:1)P>0.05
此结果表明CD4+T细胞水平较高时,有自觉症状和无自觉症状的2组HIV感染者之间CD4+T细胞水平无显著性差异,说明只用CD4+细胞数量来估计病人机体状态或只根据病人症状估计机体免疫状态是不太准确的。
2.4 HIV/AIDS合并肝炎病毒感染的百分比高达79.0%(38/48),其中云南楚雄戒毒所HIV感染者的肝炎病毒阳性率为92.3%(24/26),本院住院职业献血员HIV感染者肝炎病毒阳性率为87.5%(7/8),其他散在HIV感染者肝炎病毒阳性率为50.0%(7/14)。肝炎病毒中以HCV为主,38例合并感染中,单纯合并HCV者有34例,单纯合并HBV者有3例,HCV、HBV同时合并者为1例。HCV的传播途径主要为血液传播,本文数据显示,静脉吸毒者和单采浆献血引起的HIV感染者HCV阳性率各为92.3%和87.5%,说明HCV和HIV存在相似的传播途径。本文合并肝炎病毒的HIV/AIDS的CD4+细胞数和单纯HIV/AIDS的CD4+细胞数之间无显著性差异,因本结果为单次检测结果而非动态检测结果,且本文所列的HIV感染者处于不同的疾病发展阶段,所以上述2组CD4+细胞计数不能说明感染肝炎病毒是否对HIV/AIDS病程有影响。
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3 讨论
T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一大细胞群,在正常机体内各T淋巴细胞亚群相互作用,维持着机体正常的免疫功能。因为HIV侵犯CD4+ T 细胞,所以在HIV/AIDS中T淋巴细胞亚群的研究尤为重要。本文的结果显示全部受检HIV/AIDS者的CD4+细胞计数异常,其中83.4%的病人的CD4+细胞计数低于500细胞/μl,同时发现75.8%的病毒性肝炎患者也存在CD4+细胞计数异常,其中低于500细胞/μl的占28.8%,说明病毒性肝炎患者也存在免疫系统异常,这些结果符合国内外有关报道。另外本文对合并肝炎病毒感染的HIV感染者和单纯HIV感染者之间的CD4+细胞计数比较,本文的结果不能反映肝炎病毒是否对HIV感染者的病程有影响,研究认为肝炎病毒对HIV感染者的病程是有影响的,这需要对同一水平CD4+细胞计数下的2组病人进行病情的动态观察。
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对艾滋病人免疫系统监控的研究一直是各国科学家的研究热点。在第12届世界艾滋病大会上报告的1项较突出的研究进展是发现在抗病毒治疗过程中病人体内的免疫系统出现恢复和重建。近年来有关CTL的研究进展带动了CD8+ T 细胞的研究,研究已证实CD8+细胞对感染HIV CD4+细胞的抑制作用不仅依赖于CTL,而且CD8+细胞还分泌细胞因子IL-16和化学因子MIP-1α.1β、RANTES、MDC等来显著降低HIV病毒发生。有人提出未来可望通过提高人体淋巴细胞中的CD8+细胞数量借人体本身免疫系统来杀灭HIV。感染HIV后的无症状携带期CD8+细胞保持强的抑制HIV复制活性,而有症状AIDS期这种活性减弱,从而促进病情的发展,目前对这种减弱机制还不十分明确,所以有关CD8+T细胞在HIV/AIDS病情及预后的研究是很重要的[1-4]。作者在进行CD4+、CD8+淋巴细胞检测工作中发现HIV/AIDS的CD8+细胞有增高倾向,统计学处理证明HIV/AIDS的CD8+细胞显著高于病毒性肝炎患者,而且CD8+细胞随CD4+细胞的增加而升高。有人提出HIV-1感染在造成CD4+细胞明显下降的同时还造成明显的CD8+细胞的变化,主要表现为CD8+细胞的增加,这种增加在CD4+细胞下降之后已经出现,CD57+、HLA-DR、CD38+、CD45+RO阳性的CD8+细胞在HIV-1感染中均明显上升,并与病程相关。从以上我们可以分析有症状AIDS期CD8+细胞数比无症状携带期少,从而CD8+细胞抑制HIV复制的活性较低,造成HIV复制增多,HIV破坏CD4+细胞的能力增强,CD4+细胞减低,所以CD4+细胞与CD8+细胞数呈正相关。我们认为CD8+细胞数与病人病情的变化及预后之间存在着很重要的关系,我们下一步将要进行CD8+细胞与HIV/AIDS病情间的动态关系研究。
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另外还有人报道在CD4+T细胞水平相对较高的3个层次中,其本底水平高低与发病和死亡时间无多大关系,只有当CD4+T细胞数量达到最低(<321细胞/μl)时,CD4+T细胞水平与短期(5年)内发病或死亡有显著的相关性[5,6]。本文的结果有类似处,即CD4+T细胞水平相对较高的HIV感染者有自觉症状者和无自觉症状者之间CD4+T细胞无显著性差异,所以CD4+T细胞数是制定HIV/AIDS状态的一个相对指标,而不是绝对指标。目前报道体内病毒载量与CTL较好地反映体内状态,还有最新的研究报道CD38 抗原在CD8+T细胞上表达的测算可能对疾病的预后有价值,并且对治疗的介入有影响[7]。
作者简介:刘顺爱,女,31岁,免疫学硕士,主要从事传染病免疫研究
参考文献
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7 Liu Z,Cumburland W G,Hultin L E et al.CD8+T lymphocyte activation in HIV-1 disease reflects an aspect of pathogenesis distinct from viral burden and immunodeficiency. J Acquir Immune Defic Syndr Hum Retrovirol,1998;18(4):322
收稿1999-07-15 修回1999-11-01
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