多发性硬化患者血清sIL-6R水平观察
作者：何志义1 吕昌龙2 刘风芝2 王 钢3 付 国2 李绍英1?, http://www.100md.com
单位：何志义 李绍英 中国医科大学附属第一临床学院神经内科 沈阳 110001； 吕昌龙 刘风芝 付 国 中国医科大学基础医学院免疫学教研室； 王 钢 中国医科大学附属第一临床学院急诊科?, http://www.100md.com
关键词：多发性硬化 可溶性白细胞介素-6受体?, http://www.100md.com
免疫学杂志990113 摘 要 为探讨可溶性白细胞介素-6受体(sIL-6R)在多发性硬化(MS)发生、发展中的作用，采用双抗体夹心ELISA方法，对28例MS患者和25例正常对照组血清sIL-6R水平进行了测定。结果显示缓解-复发型和进展型MS患者血清sIL-6R水平明显高于正常对照组和良性型组(P<0.05，P<0.01)；而良性型MS患者血清sIL-6R水平与正常对照组相比，未见明显改变。缓解-复发型MS患者血清sIL-6R水平随着病情的好转而下降。sIL-6R水平与MS患者头颅MRI上的病灶大小和部位无明显相关性(r1＝0.124，P>0.05；r2＝0.091，P>0.05)。推测sIL-6R水平的高低可作为判断MS患者病情变化的指标之一。?, http://www.100md.com
中图号 R 743.51?, http://www.100md.com
THE LEVELS OF SOLUBLE INTERLEUKIN-6 RECEPTOR IN SERUM AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE IN PATIENTS WITH MULTIPLE SCLEROSIS?, http://www.100md.com
He Zhiyi，Lu Changlong，Liu fengzhi，Wang Gang，Fu Guo，Li Shaoying?, http://www.100md.com
(Department of Neurology，The First Affiliated Hospital，China Medical University，Shenyang 110001)?, http://www.100md.com
Abstract To study the effect of soluble interleukin-6 receptor(sIL-6R) on the formation and development process of multiple sclerosis(MS).Levels of sIL-6R in serum were measured in 28 patients of MS and 25 normal controls(NC)with ELISA method.Results showed that the levels of sIL-6R in the serum were significantly increased in relaping-remitting MS(RR-MS) and clinic-chronic-progress MS(CCP-MS) group as compared with NC group and benign MS(P<0.05，P<0.01).The sIL-6R levels in the serum of patients with RR-MS were significantly decreased in 4 weeks after treatment with steroids.There was no correlation(r1＝0.124，P>0.05；r2＝0.091，P>0.05) between the level of sIL-6R in serum and the sizes or locations of MS focus .The result suggests the sIL-6R could be one of the important parameters for clinical evaluation in patients of MS.
Key words Multiple sclerosis，Soluble interleukin-6 receptoran32|w3, 百拇医药
多发性硬化(MS)是一种自身免疫性疾病，其病因及发病机制尚不十分清楚。近年来，有报道认为细胞因子及其受体的异常变化在MS的发病可能起重要作用[1]。本文检测了28例MS患者血清可溶性白细胞介素-6受体(sIL-6R)，旨在探讨sIL-6R在MS中的作用。an32|w3, 百拇医药
1 材料与方法an32|w3, 百拇医药
1.1 检测对象 MS组：28例，男15例，女13例，年龄16～50岁，平均年龄39.4±19.4岁。良性型6例，缓解-复发型16例，进展型6例。头颅的MRI按受累部位依序为脑室周围、大脑半球、脑干、基底节、小脑、胼胝体及视神经。病灶呈散在点状或融合成片两种。按病灶面积大小分为2组：小灶组(病灶<20mm2)，19例；大灶组(病灶>20mm2)，9例。上述全部病例均符合Poser[2]等修订的诊断标准。为观察治疗前、后患者血清中sIL-6R水平与临床状态之间的关系，对16例缓解-复发型中的11例患者在给予甲基强的松龙500mg/d冲击治疗5d和氢化考的松100mg/d及强的松30mg/d等治疗1个月后进行了第2次采血。肘静脉无菌采血后分离血清置-20°C保存备用。所有患者在采血前2周均未用过激素或其它免疫抑制剂。正常对照组(NS组)：25例健康献血员，其年龄、性别均与MS组相匹配。an32|w3, 百拇医药
1.2 sIL-6R的检测 采用Montero-Julian等报告的方法[3]。所用试剂盒从法国国际免疫技术有限公司(Immunotech)购得。简述操作方法如下：用抗IL-6单抗包被96孔酶标板，100μl/孔，4°C过夜。弃包被液，用PBS洗3次，9min。加入经系列稀释的sIL-6R标准品和待测血清、50μl/孔。加碱性磷酸酶标记的鼠抗人sIL-6R单抗及过量的重组IL-6混合液，50μl/孔，37°C条件下温育90min，弃板中液体，PBS洗3次，9min。加底物显色。加终止液(50μl/孔)。用EL-309全自动酶标检测仪(Bio-TEKinstruments，USA)于405nm处测OD。根据各稀释标准品sIL-6R的单位及OD值绘制参考标准曲线，再依据标准曲线算出待测标本sIL-6R的浓度。an32|w3, 百拇医药
1.3 统计学分析 数据用均数±标准差(x±s)来表示，由t检验方法判断其显著性差异。
2 结果$, 百拇医药
2.1 MS患者血清sIL-6R水平的变化 结果见表1，MS患者血清sIL-6R水平明显高于正常对照组(P<0.01)。$, 百拇医药
表1 MS患者血清sIL-6R水平的变化$, 百拇医药
Tab 1 The level of sIL-6R of multiple sclerosls and normal controls Groups$, 百拇医药
No.of patients$, 百拇医药
sIL-6R(ng/ml)$, 百拇医药
Normal$, 百拇医药
25$, 百拇医药
37.4±13.8$, 百拇医药
Multiple Sclerosis$, 百拇医药
28$, 百拇医药
70.7±18.9**$, 百拇医药
**P<0.01 Compared with normal$, 百拇医药
2.2 不同类型MS患者sIL-6R水平的比较 结果见表2，缓解-复发型和进展型MS患者血清sIL-6R水平明显高于正常对照组(P<0.01)；与良性型相比较，也明显升高。而良性型MS组与正常对照组相比，未见明显差异。$, 百拇医药
表2 不同型MS患者血清sIL-6R水平的比较$, 百拇医药
Tab 2 The levels of sIL-6R in the different type of multiple sclerosis Groups$, 百拇医药
No.of patients$, 百拇医药
sIL-6R(ng/ml)$, 百拇医药
Normal$, 百拇医药
25
37.4±13.8i30?fc, 百拇医药
Benign-MSi30?fc, 百拇医药
6i30?fc, 百拇医药
39.6±19.8i30?fc, 百拇医药
RR-MSi30?fc, 百拇医药
16i30?fc, 百拇医药
59.3±25.8*＃i30?fc, 百拇医药
CCP-MSi30?fc, 百拇医药
6i30?fc, 百拇医药
88.9±29.6**＃＃i30?fc, 百拇医药
*P<0.05，**P<0.01 compared with Normal control groupi30?fc, 百拇医药
＃P<0.05，＃＃P<0.01 compared with benign-MSi30?fc, 百拇医药
RR-MS：Relaping Remitting-MSi30?fc, 百拇医药
CCP-MS：Clinic Chronic Progressive-MSi30?fc, 百拇医药
2.3 MS患者血清sIL-6R水平与头颅MRI病灶部位及大小的相关性 MS患者血清sIL-6R水平与其病变部位和大小(包括大、小病灶组)均未见明显的相关关系，相关系数分别为r1＝0.124，P>0.05；r2＝0.091，P>0.05。i30?fc, 百拇医药
2.4 缓解-复发型MS患者治疗前后血清中sIL-6R水平的变化 11例缓解-复发型MS患者经甲基强的松龙冲击及肾上腺皮质激素治疗1ms后，患者血清sIL-6R水平为49.3±14.9ng/ml，与治疗前的85.7±19.8ng/ml相比明显降低(P<0.01)。与此同时，患者的临床症状和体征也明显改善。i30?fc, 百拇医药
3 讨论i30?fc, 百拇医药
近年来研究表明[4]，某些肿瘤及自身免疫性疾病，如多发性骨髓瘤，巨球蛋白血症和Grave病等患者血清sIL-6R水平明显高于正常对照组水平。关于自身免疫性疾病MS患者血清sIL-6R水平的变化尚不十分清楚，有关的文献报告也较少。因此，我们采用ELISA方法测定了28例MS患者血清sIL-6R水平，结果表明，缓解-复发型和进展型MS患者血清sIL-6R水平均明显高于正常对照组和良性型MS组。而良性型MS组与正常对照组相比，未见显著差异。说明血清sIL-6R水平对MS病情的监测可能有一定的意义。另外，对缓解-复发型MS患者治疗前后的sIL-6R水平进行了对比研究，发现该型患者在经肾上腺皮质激素治疗1个月后，其血清sIL-6R水平明显降低；与此同时，MS患者的临床症状和体征也明显改善，这表明血清sIL-6R水平的高低可以作为判断MS疗效的指标之一。
细胞因子及其受体与脑细胞的损伤和修复关系密切。脑缺血时神经胶质细胞增生活跃，缺血区IL-1 mRNA、TNF-α mRNA及IL-6 mRNA及其受体的表达明显增强[5]。这表明脑内具有完整的细胞因子及其受体的合成、基因表达及调控系统。我们的结果显示MS患者血清sIL-6R水平与MS患者头颅MRI上的病灶大小和部位无明显的相关性。其原因可能为，虽然头颅的MRI对MS白质脱髓鞘病变有很高的敏感性，但是，MRI所见与临床病灶的严重程度并非一致,即头MRI既可以显示有临床症状的病灶，也可以发现无症状空间播散的病灶[6]。因此，我们认为血清sIL-6R水平的高低虽然不能反映MS患者病灶的大小或部位，但与病灶损害的严重程度的关系，尚待进一步探讨。#y+\, http://www.100md.com
第一作者：男，37岁，博士，副教授#y+\, http://www.100md.com
参考文献#y+\, http://www.100md.com
[1] 戴茹娟，王嗣欣，李绍英.细胞因子与多发性硬化.国外医学神经病学神经外科学分册，1996，23(5)：225#y+\, http://www.100md.com
[2] Poser CM，Paty DW，Scheinberg L，et al.New diagnostic criteria for MS：Guidelines for research protocols.Ann Neurol，1983，13：227#y+\, http://www.100md.com
[3] Mohtero-Jwlian FA，Liautard J，Flavctta S，et al.Immunoassay for functional human soluble interleukin-6 receptor in plasma based ligand receptor interaction.J Immunol Methods ，1991，169：111#y+\, http://www.100md.com
[4] 侯 建，赵亚萍，刘 焱.浆细胞病患者血清可溶性白细胞介素-6受体检测及其临床意义.中华内科杂志，1997，36(2)：94#y+\, http://www.100md.com
[5] 黄 诚，陈汉平，程介士，等.细胞因子在早老性痴呆发病过程中的作用.上海免疫学杂志，1996，16(2)：126#y+\, http://www.100md.com
[6] 蔡兴秋，赵翕平，蔡宗尧.多发性硬化的MRI与临床.临床神经病学杂志，1997，10(1)：25#y+\, http://www.100md.com
(1998-03-02收稿；1998-10-08修回)(何志义1 吕昌龙2 刘风芝2 王 钢3 付 国2 李绍英1)
单位：何志义 李绍英 中国医科大学附属第一临床学院神经内科 沈阳 110001； 吕昌龙 刘风芝 付 国 中国医科大学基础医学院免疫学教研室； 王 钢 中国医科大学附属第一临床学院急诊科?, http://www.100md.com
关键词：多发性硬化 可溶性白细胞介素-6受体?, http://www.100md.com
免疫学杂志990113 摘 要 为探讨可溶性白细胞介素-6受体(sIL-6R)在多发性硬化(MS)发生、发展中的作用，采用双抗体夹心ELISA方法，对28例MS患者和25例正常对照组血清sIL-6R水平进行了测定。结果显示缓解-复发型和进展型MS患者血清sIL-6R水平明显高于正常对照组和良性型组(P<0.05，P<0.01)；而良性型MS患者血清sIL-6R水平与正常对照组相比，未见明显改变。缓解-复发型MS患者血清sIL-6R水平随着病情的好转而下降。sIL-6R水平与MS患者头颅MRI上的病灶大小和部位无明显相关性(r1＝0.124，P>0.05；r2＝0.091，P>0.05)。推测sIL-6R水平的高低可作为判断MS患者病情变化的指标之一。?, http://www.100md.com
中图号 R 743.51?, http://www.100md.com
THE LEVELS OF SOLUBLE INTERLEUKIN-6 RECEPTOR IN SERUM AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE IN PATIENTS WITH MULTIPLE SCLEROSIS?, http://www.100md.com
He Zhiyi，Lu Changlong，Liu fengzhi，Wang Gang，Fu Guo，Li Shaoying?, http://www.100md.com
(Department of Neurology，The First Affiliated Hospital，China Medical University，Shenyang 110001)?, http://www.100md.com
Abstract To study the effect of soluble interleukin-6 receptor(sIL-6R) on the formation and development process of multiple sclerosis(MS).Levels of sIL-6R in serum were measured in 28 patients of MS and 25 normal controls(NC)with ELISA method.Results showed that the levels of sIL-6R in the serum were significantly increased in relaping-remitting MS(RR-MS) and clinic-chronic-progress MS(CCP-MS) group as compared with NC group and benign MS(P<0.05，P<0.01).The sIL-6R levels in the serum of patients with RR-MS were significantly decreased in 4 weeks after treatment with steroids.There was no correlation(r1＝0.124，P>0.05；r2＝0.091，P>0.05) between the level of sIL-6R in serum and the sizes or locations of MS focus .The result suggests the sIL-6R could be one of the important parameters for clinical evaluation in patients of MS.
Key words Multiple sclerosis，Soluble interleukin-6 receptoran32|w3, 百拇医药
多发性硬化(MS)是一种自身免疫性疾病，其病因及发病机制尚不十分清楚。近年来，有报道认为细胞因子及其受体的异常变化在MS的发病可能起重要作用[1]。本文检测了28例MS患者血清可溶性白细胞介素-6受体(sIL-6R)，旨在探讨sIL-6R在MS中的作用。an32|w3, 百拇医药
1 材料与方法an32|w3, 百拇医药
1.1 检测对象 MS组：28例，男15例，女13例，年龄16～50岁，平均年龄39.4±19.4岁。良性型6例，缓解-复发型16例，进展型6例。头颅的MRI按受累部位依序为脑室周围、大脑半球、脑干、基底节、小脑、胼胝体及视神经。病灶呈散在点状或融合成片两种。按病灶面积大小分为2组：小灶组(病灶<20mm2)，19例；大灶组(病灶>20mm2)，9例。上述全部病例均符合Poser[2]等修订的诊断标准。为观察治疗前、后患者血清中sIL-6R水平与临床状态之间的关系，对16例缓解-复发型中的11例患者在给予甲基强的松龙500mg/d冲击治疗5d和氢化考的松100mg/d及强的松30mg/d等治疗1个月后进行了第2次采血。肘静脉无菌采血后分离血清置-20°C保存备用。所有患者在采血前2周均未用过激素或其它免疫抑制剂。正常对照组(NS组)：25例健康献血员，其年龄、性别均与MS组相匹配。an32|w3, 百拇医药
1.2 sIL-6R的检测 采用Montero-Julian等报告的方法[3]。所用试剂盒从法国国际免疫技术有限公司(Immunotech)购得。简述操作方法如下：用抗IL-6单抗包被96孔酶标板，100μl/孔，4°C过夜。弃包被液，用PBS洗3次，9min。加入经系列稀释的sIL-6R标准品和待测血清、50μl/孔。加碱性磷酸酶标记的鼠抗人sIL-6R单抗及过量的重组IL-6混合液，50μl/孔，37°C条件下温育90min，弃板中液体，PBS洗3次，9min。加底物显色。加终止液(50μl/孔)。用EL-309全自动酶标检测仪(Bio-TEKinstruments，USA)于405nm处测OD。根据各稀释标准品sIL-6R的单位及OD值绘制参考标准曲线，再依据标准曲线算出待测标本sIL-6R的浓度。an32|w3, 百拇医药
1.3 统计学分析 数据用均数±标准差(x±s)来表示，由t检验方法判断其显著性差异。
2 结果$, 百拇医药
2.1 MS患者血清sIL-6R水平的变化 结果见表1，MS患者血清sIL-6R水平明显高于正常对照组(P<0.01)。$, 百拇医药
表1 MS患者血清sIL-6R水平的变化$, 百拇医药
Tab 1 The level of sIL-6R of multiple sclerosls and normal controls Groups$, 百拇医药
No.of patients$, 百拇医药
sIL-6R(ng/ml)$, 百拇医药
Normal$, 百拇医药
25$, 百拇医药
37.4±13.8$, 百拇医药
Multiple Sclerosis$, 百拇医药
28$, 百拇医药
70.7±18.9**$, 百拇医药
**P<0.01 Compared with normal$, 百拇医药
2.2 不同类型MS患者sIL-6R水平的比较 结果见表2，缓解-复发型和进展型MS患者血清sIL-6R水平明显高于正常对照组(P<0.01)；与良性型相比较，也明显升高。而良性型MS组与正常对照组相比，未见明显差异。$, 百拇医药
表2 不同型MS患者血清sIL-6R水平的比较$, 百拇医药
Tab 2 The levels of sIL-6R in the different type of multiple sclerosis Groups$, 百拇医药
No.of patients$, 百拇医药
sIL-6R(ng/ml)$, 百拇医药
Normal$, 百拇医药
25
37.4±13.8i30?fc, 百拇医药
Benign-MSi30?fc, 百拇医药
6i30?fc, 百拇医药
39.6±19.8i30?fc, 百拇医药
RR-MSi30?fc, 百拇医药
16i30?fc, 百拇医药
59.3±25.8*＃i30?fc, 百拇医药
CCP-MSi30?fc, 百拇医药
6i30?fc, 百拇医药
88.9±29.6**＃＃i30?fc, 百拇医药
*P<0.05，**P<0.01 compared with Normal control groupi30?fc, 百拇医药
＃P<0.05，＃＃P<0.01 compared with benign-MSi30?fc, 百拇医药
RR-MS：Relaping Remitting-MSi30?fc, 百拇医药
CCP-MS：Clinic Chronic Progressive-MSi30?fc, 百拇医药
2.3 MS患者血清sIL-6R水平与头颅MRI病灶部位及大小的相关性 MS患者血清sIL-6R水平与其病变部位和大小(包括大、小病灶组)均未见明显的相关关系，相关系数分别为r1＝0.124，P>0.05；r2＝0.091，P>0.05。i30?fc, 百拇医药
2.4 缓解-复发型MS患者治疗前后血清中sIL-6R水平的变化 11例缓解-复发型MS患者经甲基强的松龙冲击及肾上腺皮质激素治疗1ms后，患者血清sIL-6R水平为49.3±14.9ng/ml，与治疗前的85.7±19.8ng/ml相比明显降低(P<0.01)。与此同时，患者的临床症状和体征也明显改善。i30?fc, 百拇医药
3 讨论i30?fc, 百拇医药
近年来研究表明[4]，某些肿瘤及自身免疫性疾病，如多发性骨髓瘤，巨球蛋白血症和Grave病等患者血清sIL-6R水平明显高于正常对照组水平。关于自身免疫性疾病MS患者血清sIL-6R水平的变化尚不十分清楚，有关的文献报告也较少。因此，我们采用ELISA方法测定了28例MS患者血清sIL-6R水平，结果表明，缓解-复发型和进展型MS患者血清sIL-6R水平均明显高于正常对照组和良性型MS组。而良性型MS组与正常对照组相比，未见显著差异。说明血清sIL-6R水平对MS病情的监测可能有一定的意义。另外，对缓解-复发型MS患者治疗前后的sIL-6R水平进行了对比研究，发现该型患者在经肾上腺皮质激素治疗1个月后，其血清sIL-6R水平明显降低；与此同时，MS患者的临床症状和体征也明显改善，这表明血清sIL-6R水平的高低可以作为判断MS疗效的指标之一。
细胞因子及其受体与脑细胞的损伤和修复关系密切。脑缺血时神经胶质细胞增生活跃，缺血区IL-1 mRNA、TNF-α mRNA及IL-6 mRNA及其受体的表达明显增强[5]。这表明脑内具有完整的细胞因子及其受体的合成、基因表达及调控系统。我们的结果显示MS患者血清sIL-6R水平与MS患者头颅MRI上的病灶大小和部位无明显的相关性。其原因可能为，虽然头颅的MRI对MS白质脱髓鞘病变有很高的敏感性，但是，MRI所见与临床病灶的严重程度并非一致,即头MRI既可以显示有临床症状的病灶，也可以发现无症状空间播散的病灶[6]。因此，我们认为血清sIL-6R水平的高低虽然不能反映MS患者病灶的大小或部位，但与病灶损害的严重程度的关系，尚待进一步探讨。#y+\, http://www.100md.com
第一作者：男，37岁，博士，副教授#y+\, http://www.100md.com
参考文献#y+\, http://www.100md.com
[1] 戴茹娟，王嗣欣，李绍英.细胞因子与多发性硬化.国外医学神经病学神经外科学分册，1996，23(5)：225#y+\, http://www.100md.com
[2] Poser CM，Paty DW，Scheinberg L，et al.New diagnostic criteria for MS：Guidelines for research protocols.Ann Neurol，1983，13：227#y+\, http://www.100md.com
[3] Mohtero-Jwlian FA，Liautard J，Flavctta S，et al.Immunoassay for functional human soluble interleukin-6 receptor in plasma based ligand receptor interaction.J Immunol Methods ，1991，169：111#y+\, http://www.100md.com
[4] 侯 建，赵亚萍，刘 焱.浆细胞病患者血清可溶性白细胞介素-6受体检测及其临床意义.中华内科杂志，1997，36(2)：94#y+\, http://www.100md.com
[5] 黄 诚，陈汉平，程介士，等.细胞因子在早老性痴呆发病过程中的作用.上海免疫学杂志，1996，16(2)：126#y+\, http://www.100md.com
[6] 蔡兴秋，赵翕平，蔡宗尧.多发性硬化的MRI与临床.临床神经病学杂志，1997，10(1)：25#y+\, http://www.100md.com
(1998-03-02收稿；1998-10-08修回)(何志义1 吕昌龙2 刘风芝2 王 钢3 付 国2 李绍英1)