银屑病与白介素1受体拮抗剂基因多态性
作者：彭学标 王宗发(7{-1e?, 百拇医药
单位：第一军医大学南方医院皮肤科 广州510515(7{-1e?, 百拇医药
关键词：银屑病 白介素1 多态性(7{-1e?, 百拇医药
免 疫 学 杂 志990313 摘 要 用聚合酶链反应(PCR)技术对38例银屑病患者和85例正常对照组白介素1受体拮抗剂(IL-lra)基因数目可变的串联重复多态性进行了分析，发现银屑病患者中IL1RN2等位基因频率明显高于正常对照组(P<0.01)。如将31例寻常型银屑病分为PASI<15和PASI≥15两组，则发现前者IL1RN2频率与正常对照相比无显著差异(P>0.05)，而后者有显著差异(P<0.01)；3例脓疱型中的2例，2例关节型及2例红皮病型银屑病患者均携带IL1RN2等位基因。提示IL1RN2可能不直接影响银屑病的易感性，但携带IL1RN2者患病后可能病情更严重。(7{-1e?, 百拇医药
中图号 R758.63(7{-1e?, 百拇医药
STUDY OF THE ASSOCIATION BETWEEN PSORISAS AND INTERLEUKIN-1 RECEPTOR ANTAGONIST GENE POLYPHISM(7{-1e?, 百拇医药
Peng Xuebiao，Wang Zongfa(7{-1e?, 百拇医药
(Department of Dermatology，Nanfang Hospital，The First Military Medical University，Guangzhou 510515)(7{-1e?, 百拇医药
Abstract Polymerase chain reaction(PCR) was used to analyze the polymorphism of variable number of tandem repeat(VNTR)of interleukin-1 receptor antagonist(IL-1ra)gene in 38 patients with psorisas and 85 normal controls.The results showed that the frequency of IL1RN2 allele was much higher in patients than that of in controls(P<0.01).Among these patients we found that there was no significant difference in the frequency of IL1RN2 allele between the group (PASI<15) and the controls(P>0.05)，but the frequency of IL1RN2 was significantly increased in the other(PASI≥15)compared with controls(P<0.01)，2 to 3 cases of patients with psorisas pustulosa and 2 cases of patients with psorisas arthropathica and 2 cases of patients psorisas erythroderma had IL1RN2 allele.The results suggest that IL1RN2 allele might not directly affect the susceptibility to psorisas，but the might be more severe for those patients with IL1RN2.
Key words Psorisas，Receptor，Interleukin-1.kz, 百拇医药
银屑病是一种病因不明的慢性炎症性皮肤病，白细胞介素1(IL-1)是一种炎症前细胞因子，在免疫反应和炎症反应调节中起重要作用，并参与几种慢性炎症性疾病的发病[1]。IL-1受体拮抗剂(IL-1ra)是IL-1强有力的内生拮抗剂，通过抑制IL-1的活性而起抗炎作用。我们使用聚合酶链反应(PCR)技术对银屑病患者中IL-1ra基因多态性进行分析。.kz, 百拇医药
1 材料与方法.kz, 百拇医药
1.1 研究对象 38例银屑病患者，其中寻常型31例，脓疱型3例，关节型2例，红皮病型2例；男24例，女14例；年龄12～56岁，平均26.5岁；病程2周～20年，平均38月。对寻常型患者皮损作PASI计分估计其严重程度。.kz, 百拇医药
正常对照组85例，年龄17～45岁，平均25.8岁，来自与病人同一地区的健康随机人群。.kz, 百拇医药
1.2 标本收集 每例抽取新鲜全血(EDTA抗凝)2ml，用改良的盐析法抽提基因组DNA。.kz, 百拇医药
1.3 IL-1ra基因多态性分析 IL-1ra基因多态性表现为数目可变的串联重复(variable number of tandem repeat，VNTR)，其重复序列为86bp，在人类已检出5种不同重复组合的等位基因，即2个重复体(IL1RN2)、3 个重复体(IL1RN4)、4个重复体(IL1RN1)、5个重复体(IL1RN3)和6个重复体(IL1RN5)。IL-1ra基因VNTR多态性PCR检测采用的引物为5-CTC AGC AAC ACA CCT AT-3和5-TCC TGG TCT GCA GGT AA-3，不同重复组合的等位基因将产生大小不等的扩增片段[2，3]。PCR反应体积为50μl，含DNA样品0.1μg，4种dNTPs各50μmol/L，TaqDNA聚合酶1u(华美生物工程公司)，引物各50pmol/L(上海细胞生物所合成)。反应在DNA热循环仪进行。变性、退火和延伸条件分别为95°C，1min；55°C，1min；72°C，2min。35个循环后，72°C延伸5min。2%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，紫外灯下观看结果。
1.4 统计学分析 根据电泳结果得出每例患者和正常对照组IL-1ra的等位基因型别。基因频率显著性检验用4格表χ2检验，显著性检验水平为0.05。y#8.:(, http://www.100md.com
2 结果y#8.:(, http://www.100md.com
共检测出410bp、240bp、500bp3种等位基因产物，对应于IL1RN1(等位基因1)、IL1RN2(等位基因2)和IL1RN3(等位基因3)3种等位基因。患者组及正常对照组IL-1ra基因型分布及频率见表1。与正常对照组相比，银屑病患者IL1RN2等位基因频率明显升高(P<0.05)。3例脓疱型中的2例、2例关节型及2例红皮病型银屑病患者均携带IL1RN2y#8.:(, http://www.100md.com
表1 银屑病患者和正常人IL-1ra基因型分布及频率y#8.:(, http://www.100md.com
Tab 1 Distribution and frequencies of IL-1ra genetype in patients with psorisas and controls Groupsy#8.:(, http://www.100md.com
ny#8.:(, http://www.100md.com
IL-1ra genetypey#8.:(, http://www.100md.com
Frequencyy#8.:(, http://www.100md.com
1，1y#8.:(, http://www.100md.com
1，2y#8.:(, http://www.100md.com
2，2y#8.:(, http://www.100md.com
1，3y#8.:(, http://www.100md.com
A1y#8.:(, http://www.100md.com
A2y#8.:(, http://www.100md.com
Controly#8.:(, http://www.100md.com
85y#8.:(, http://www.100md.com
58y#8.:(, http://www.100md.com
18y#8.:(, http://www.100md.com
5
4?mto, 百拇医药
0.82?mto, 百拇医药
0.16?mto, 百拇医药
Patients?mto, 百拇医药
38?mto, 百拇医药
14?mto, 百拇医药
15?mto, 百拇医药
8?mto, 百拇医药
1?mto, 百拇医药
0.57?mto, 百拇医药
0.41*?mto, 百拇医药
Psorisas vulgaris?mto, 百拇医药
PASI<15?mto, 百拇医药
12?mto, 百拇医药
7?mto, 百拇医药
2?mto, 百拇医药
2?mto, 百拇医药
1?mto, 百拇医药
0.71?mto, 百拇医药
0.25**?mto, 百拇医药
PASI≥15?mto, 百拇医药
19?mto, 百拇医药
8?mto, 百拇医药
5?mto, 百拇医药
6?mto, 百拇医药
0?mto, 百拇医药
0.64?mto, 百拇医药
0.45***?mto, 百拇医药
Psriosas pustulosa?mto, 百拇医药
3
1np!+^gx, 百拇医药
1np!+^gx, 百拇医药
1np!+^gx, 百拇医药
0np!+^gx, 百拇医药
Psorisas arthropathicanp!+^gx, 百拇医药
2np!+^gx, 百拇医药
0np!+^gx, 百拇医药
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Psorisas erythrodermanp!+^gx, 百拇医药
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*χ2＝12.56， P<0.01； **χ2＝0.21， P>0.05； ***χ2＝6.71，P<0.01，compared with normal controlsnp!+^gx, 百拇医药
等位基因；按皮损严重程度的不同，将寻常型银屑病患者分为PASI<15及PASI≥15两组，前者IL1RN2等位基因频率与正常对照组相比无显著差异(P>0.05)，而后者IL1RN2频率则显著高于正常对照组(P<0.01)。np!+^gx, 百拇医药
3 讨论np!+^gx, 百拇医药
IL-1ra基因存在VNTR多态性，有关研究提示携带IL1RN2等位基因者在炎症反应情况下，循环中IL-1ra水平可能较低，不能有效地拮抗IL-1的作用，而对多种慢性炎症易感[3]。已经在寻常型银屑病患者皮损中发现IL-1、IL-1受体及IL-1ra之间的平衡有改变，且改变的程度决定炎症反应的程序[4]。我们研究发现银屑病患者中IL1RN2频率明显高于正常对照组，表明IL1RN2可能参与银屑病炎症反应的形成。另外发现在PASI<15的寻常型银屑病患者中，IL1RN2频率与正常对照组相比无显著差异，而PASI≥15者则差异显著；更有意义的是，3例脓疱型银屑病中的2例、所有2例关节型及2例红皮病型银屑病患者均携带有IL1RN2等位基因。提示IL1RN2可能不直接响银屑病的易感性，但有该等位基因者患病后病情会更严重。np!+^gx, 百拇医药
第一作者：男，31岁，博士，讲师，主治医师np!+^gx, 百拇医药
参考文献np!+^gx, 百拇医药
1 Dinavello CA.Interleukin-1 and interleukin-1 antagonist.Blood，1997，77：1627np!+^gx, 百拇医药
2 Tarlow JK，Blakemore AIF，Lennard A，et al.Polymorphism in human IL-1 receptor antagonist gene intron 2 is caused by variable number of an 86bp tandem repeat.Hum Genet，1993，91：403np!+^gx, 百拇医药
3 Blakemore AIF，Tarlow J，Cork MJ，et al.Interleukin-1 receptor antagonist gene polymorphism as a disease severity factor in systemic lupus erythematorsus.Arthritis Rheum，1994，37：1np!+^gx, 百拇医药
4 Kristensen M，Meleuran B，Eedy DJ，et al.Distribution of interleukin 1 receptor antagonist protein(IRAP)，interleukin 1 receptor and interleukin 1 α in normal and psoriatic skin：decreased expression of IRAP in psoriatic lesional epidermis.Br J Dermatol，1992，127：305np!+^gx, 百拇医药
(1998-09-03收稿；1998-10-19修回)(彭学标 王宗发)
单位：第一军医大学南方医院皮肤科 广州510515(7{-1e?, 百拇医药
关键词：银屑病 白介素1 多态性(7{-1e?, 百拇医药
免 疫 学 杂 志990313 摘 要 用聚合酶链反应(PCR)技术对38例银屑病患者和85例正常对照组白介素1受体拮抗剂(IL-lra)基因数目可变的串联重复多态性进行了分析，发现银屑病患者中IL1RN2等位基因频率明显高于正常对照组(P<0.01)。如将31例寻常型银屑病分为PASI<15和PASI≥15两组，则发现前者IL1RN2频率与正常对照相比无显著差异(P>0.05)，而后者有显著差异(P<0.01)；3例脓疱型中的2例，2例关节型及2例红皮病型银屑病患者均携带IL1RN2等位基因。提示IL1RN2可能不直接影响银屑病的易感性，但携带IL1RN2者患病后可能病情更严重。(7{-1e?, 百拇医药
中图号 R758.63(7{-1e?, 百拇医药
STUDY OF THE ASSOCIATION BETWEEN PSORISAS AND INTERLEUKIN-1 RECEPTOR ANTAGONIST GENE POLYPHISM(7{-1e?, 百拇医药
Peng Xuebiao，Wang Zongfa(7{-1e?, 百拇医药
(Department of Dermatology，Nanfang Hospital，The First Military Medical University，Guangzhou 510515)(7{-1e?, 百拇医药
Abstract Polymerase chain reaction(PCR) was used to analyze the polymorphism of variable number of tandem repeat(VNTR)of interleukin-1 receptor antagonist(IL-1ra)gene in 38 patients with psorisas and 85 normal controls.The results showed that the frequency of IL1RN2 allele was much higher in patients than that of in controls(P<0.01).Among these patients we found that there was no significant difference in the frequency of IL1RN2 allele between the group (PASI<15) and the controls(P>0.05)，but the frequency of IL1RN2 was significantly increased in the other(PASI≥15)compared with controls(P<0.01)，2 to 3 cases of patients with psorisas pustulosa and 2 cases of patients with psorisas arthropathica and 2 cases of patients psorisas erythroderma had IL1RN2 allele.The results suggest that IL1RN2 allele might not directly affect the susceptibility to psorisas，but the might be more severe for those patients with IL1RN2.
Key words Psorisas，Receptor，Interleukin-1.kz, 百拇医药
银屑病是一种病因不明的慢性炎症性皮肤病，白细胞介素1(IL-1)是一种炎症前细胞因子，在免疫反应和炎症反应调节中起重要作用，并参与几种慢性炎症性疾病的发病[1]。IL-1受体拮抗剂(IL-1ra)是IL-1强有力的内生拮抗剂，通过抑制IL-1的活性而起抗炎作用。我们使用聚合酶链反应(PCR)技术对银屑病患者中IL-1ra基因多态性进行分析。.kz, 百拇医药
1 材料与方法.kz, 百拇医药
1.1 研究对象 38例银屑病患者，其中寻常型31例，脓疱型3例，关节型2例，红皮病型2例；男24例，女14例；年龄12～56岁，平均26.5岁；病程2周～20年，平均38月。对寻常型患者皮损作PASI计分估计其严重程度。.kz, 百拇医药
正常对照组85例，年龄17～45岁，平均25.8岁，来自与病人同一地区的健康随机人群。.kz, 百拇医药
1.2 标本收集 每例抽取新鲜全血(EDTA抗凝)2ml，用改良的盐析法抽提基因组DNA。.kz, 百拇医药
1.3 IL-1ra基因多态性分析 IL-1ra基因多态性表现为数目可变的串联重复(variable number of tandem repeat，VNTR)，其重复序列为86bp，在人类已检出5种不同重复组合的等位基因，即2个重复体(IL1RN2)、3 个重复体(IL1RN4)、4个重复体(IL1RN1)、5个重复体(IL1RN3)和6个重复体(IL1RN5)。IL-1ra基因VNTR多态性PCR检测采用的引物为5-CTC AGC AAC ACA CCT AT-3和5-TCC TGG TCT GCA GGT AA-3，不同重复组合的等位基因将产生大小不等的扩增片段[2，3]。PCR反应体积为50μl，含DNA样品0.1μg，4种dNTPs各50μmol/L，TaqDNA聚合酶1u(华美生物工程公司)，引物各50pmol/L(上海细胞生物所合成)。反应在DNA热循环仪进行。变性、退火和延伸条件分别为95°C，1min；55°C，1min；72°C，2min。35个循环后，72°C延伸5min。2%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，紫外灯下观看结果。
1.4 统计学分析 根据电泳结果得出每例患者和正常对照组IL-1ra的等位基因型别。基因频率显著性检验用4格表χ2检验，显著性检验水平为0.05。y#8.:(, http://www.100md.com
2 结果y#8.:(, http://www.100md.com
共检测出410bp、240bp、500bp3种等位基因产物，对应于IL1RN1(等位基因1)、IL1RN2(等位基因2)和IL1RN3(等位基因3)3种等位基因。患者组及正常对照组IL-1ra基因型分布及频率见表1。与正常对照组相比，银屑病患者IL1RN2等位基因频率明显升高(P<0.05)。3例脓疱型中的2例、2例关节型及2例红皮病型银屑病患者均携带IL1RN2y#8.:(, http://www.100md.com
表1 银屑病患者和正常人IL-1ra基因型分布及频率y#8.:(, http://www.100md.com
Tab 1 Distribution and frequencies of IL-1ra genetype in patients with psorisas and controls Groupsy#8.:(, http://www.100md.com
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IL-1ra genetypey#8.:(, http://www.100md.com
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Patients?mto, 百拇医药
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Psorisas vulgaris?mto, 百拇医药
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0.71?mto, 百拇医药
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PASI≥15?mto, 百拇医药
19?mto, 百拇医药
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Psriosas pustulosa?mto, 百拇医药
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Psorisas arthropathicanp!+^gx, 百拇医药
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Psorisas erythrodermanp!+^gx, 百拇医药
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*χ2＝12.56， P<0.01； **χ2＝0.21， P>0.05； ***χ2＝6.71，P<0.01，compared with normal controlsnp!+^gx, 百拇医药
等位基因；按皮损严重程度的不同，将寻常型银屑病患者分为PASI<15及PASI≥15两组，前者IL1RN2等位基因频率与正常对照组相比无显著差异(P>0.05)，而后者IL1RN2频率则显著高于正常对照组(P<0.01)。np!+^gx, 百拇医药
3 讨论np!+^gx, 百拇医药
IL-1ra基因存在VNTR多态性，有关研究提示携带IL1RN2等位基因者在炎症反应情况下，循环中IL-1ra水平可能较低，不能有效地拮抗IL-1的作用，而对多种慢性炎症易感[3]。已经在寻常型银屑病患者皮损中发现IL-1、IL-1受体及IL-1ra之间的平衡有改变，且改变的程度决定炎症反应的程序[4]。我们研究发现银屑病患者中IL1RN2频率明显高于正常对照组，表明IL1RN2可能参与银屑病炎症反应的形成。另外发现在PASI<15的寻常型银屑病患者中，IL1RN2频率与正常对照组相比无显著差异，而PASI≥15者则差异显著；更有意义的是，3例脓疱型银屑病中的2例、所有2例关节型及2例红皮病型银屑病患者均携带有IL1RN2等位基因。提示IL1RN2可能不直接响银屑病的易感性，但有该等位基因者患病后病情会更严重。np!+^gx, 百拇医药
第一作者：男，31岁，博士，讲师，主治医师np!+^gx, 百拇医药
参考文献np!+^gx, 百拇医药
1 Dinavello CA.Interleukin-1 and interleukin-1 antagonist.Blood，1997，77：1627np!+^gx, 百拇医药
2 Tarlow JK，Blakemore AIF，Lennard A，et al.Polymorphism in human IL-1 receptor antagonist gene intron 2 is caused by variable number of an 86bp tandem repeat.Hum Genet，1993，91：403np!+^gx, 百拇医药
3 Blakemore AIF，Tarlow J，Cork MJ，et al.Interleukin-1 receptor antagonist gene polymorphism as a disease severity factor in systemic lupus erythematorsus.Arthritis Rheum，1994，37：1np!+^gx, 百拇医药
4 Kristensen M，Meleuran B，Eedy DJ，et al.Distribution of interleukin 1 receptor antagonist protein(IRAP)，interleukin 1 receptor and interleukin 1 α in normal and psoriatic skin：decreased expression of IRAP in psoriatic lesional epidermis.Br J Dermatol，1992，127：305np!+^gx, 百拇医药
(1998-09-03收稿；1998-10-19修回)(彭学标 王宗发)