人DAF的分离纯化及结构与功能的初步研究(摘要)*
作者：邹 强 谢佩蓉5ti, http://www.100md.com
单位：第三军医大学免疫学教研室 重庆 4000385ti, http://www.100md.com
关键词：DAF 单克隆抗体 T细胞活化 分子模型 噬菌体随机肽库5ti, http://www.100md.com
免疫学杂志990428 在建立C3转化酶衰变加速活性检测方法的基础上，成功分离纯化人红细胞膜衰变加速因子(Decay-accelerating factor，DAF，CD55)。以此作为免疫原，制备成功3株抗人DAF单抗DG3、DG9和DA11，分别作用于SCR3、SCR1和SCR4，其中DG3可完全阻断DAF对经典途径C3转化酶的促衰变加速活性。较系统观察了单独或联合使用抗人DAF抗体与抗人CD3单抗对T细胞的活化作用，并证明：①针对SCR3的不同单抗对T细胞活化有不同的作用；②抗人DAF单抗与抗人CD3单抗可协同刺激人外周血T淋巴细胞增殖、诱导IL-2分泌及刺激胞浆钙离子水平增高；③协同作用与IL-2途径无关，也无需DAF与CD3的相互交联。运用同源蛋白质结构预测的理论和方法建立DAF中SCR3和SCR4的三维分子模型，并对DAF的亲水性、可及性、二级结构及B细胞表位进行了预测。运用噬菌体肽库技术筛选获得的与抗人DAF单抗DG3特异性结合的多肽，可竞争性阻断DG3与DAF的结合。综合运用同源性比较与模型结构分析等方法确定DG3作用于SCR3的第7个袢，从而提供了SCR中特定结构与功能之间关系的实验证据。5ti, http://www.100md.com
*国家自然科学基金(395000031)及全军“九五”医药卫生科研基金资助项目(邹 强 谢佩蓉)
单位：第三军医大学免疫学教研室 重庆 4000385ti, http://www.100md.com
关键词：DAF 单克隆抗体 T细胞活化 分子模型 噬菌体随机肽库5ti, http://www.100md.com
免疫学杂志990428 在建立C3转化酶衰变加速活性检测方法的基础上，成功分离纯化人红细胞膜衰变加速因子(Decay-accelerating factor，DAF，CD55)。以此作为免疫原，制备成功3株抗人DAF单抗DG3、DG9和DA11，分别作用于SCR3、SCR1和SCR4，其中DG3可完全阻断DAF对经典途径C3转化酶的促衰变加速活性。较系统观察了单独或联合使用抗人DAF抗体与抗人CD3单抗对T细胞的活化作用，并证明：①针对SCR3的不同单抗对T细胞活化有不同的作用；②抗人DAF单抗与抗人CD3单抗可协同刺激人外周血T淋巴细胞增殖、诱导IL-2分泌及刺激胞浆钙离子水平增高；③协同作用与IL-2途径无关，也无需DAF与CD3的相互交联。运用同源蛋白质结构预测的理论和方法建立DAF中SCR3和SCR4的三维分子模型，并对DAF的亲水性、可及性、二级结构及B细胞表位进行了预测。运用噬菌体肽库技术筛选获得的与抗人DAF单抗DG3特异性结合的多肽，可竞争性阻断DG3与DAF的结合。综合运用同源性比较与模型结构分析等方法确定DG3作用于SCR3的第7个袢，从而提供了SCR中特定结构与功能之间关系的实验证据。5ti, http://www.100md.com
*国家自然科学基金(395000031)及全军“九五”医药卫生科研基金资助项目(邹 强 谢佩蓉)