人松果体结缔组织纤维的构筑——消蚀法扫描电镜观察
作者：王保芝 王建钦 刘 峰 臼井猛史*
单位：河北医科大学解剖学教研室，石家庄 050017；**大分医科大学解剖学讲座，日本大分 879-55
关键词：松果体；结缔组织；消蚀扫描电镜法
解剖学报980323 摘 要 为证明人松果体结缔组织纤维的排列，用消蚀扫描电镜法对该器官做了观察。松果体囊由胶原纤维束构成，囊表面可观察到大量由胶原纤维编织成的孔隙。起自囊的胶原纤维构成小叶间隔，分隔松果体实质为直径200～400μm的小叶。囊和隔由疏松排列的胶原细纤维构成。隔上有直径20～80μm圆形或卵圆形的孔，以此使小叶互相连通。小叶间血管在3个或多个小叶相汇处通行。
人松果体为一重要的神经内分泌器官。丰富的结缔组织的存在为松果体的特征之一，但对此研究甚少。人松果体被丰富的结缔组织分隔成小叶或滤泡。由于结缔组织的存在导致松果体的小叶化也见于马、羊和猪。但是，早期的研究未能清楚地显示松果体内结缔组织的构筑情况。
, 百拇医药
众所周知，结缔组织构成器官的网架。Ohtani[1]曾介绍一种用低温氢氧化钠溶液细胞消蚀法，然后用扫描电镜观察结缔组织纤维的排列。相继的研究表明，该方法能清楚显示不同组织内结缔组织纤维的排列[2～4]。我们利用这种消蚀扫描电镜法，研究了人松果体内结缔组织的构筑情况，获得了在松果体囊和隔内胶原纤维排列的清晰图像，报告如下。
材料和方法
所用松果体取自7具65～85岁男尸，均为非脑内恶性疾病死亡者。松果体从脑取出后，固定于10%中性福尔马林溶液中，用刀片作矢状和额状切片。两个标本用于对松果体隐窝、松果体囊及其切断面的常规扫描电镜观察。其余松果体标本在室温下于10%NaOH溶液浸泡消蚀1周，经消蚀的标本用蒸馏水浸洗24h以上直至标本透亮。
经过和未经NaOH处理的标本，经蒸馏水洗后放入2%单宁酸水溶液中过夜。蒸馏水洗后在1%锇酸溶液中后固定2～3h，经梯度洒精脱水，用丁醇冻结干燥处理[5]。JUC-5000镀膜仪镀金6.5min，日立S-800扫描电镜观察，加速电压为15kV。
, 百拇医药
结果和讨论
在扫描电镜下，可见经NaOH处理后的松果体标本，细胞成分和结缔组织基质被彻底消蚀掉，只有胶原纤维完好的保留。由胶原纤维形成的结缔组织囊和隔清晰可见(图1)。松果体被一完整的结缔组织囊包绕，此囊是由不同方向排列的直径为1～3μm的胶原纤维束所组成。在结缔组织囊的表面，可观察到大量由胶原纤维束编织成的孔隙(图2)。在松果体的切断面上，起于囊的结缔组织纤维，形成小叶间隔，将松果体实质分隔为直径200～400μm的小叶(图3)。在高倍放大下，松果体结缔组织囊和隔均由胶原细纤维所组成，通常囊区的胶原细纤维直径(100nm)要比隔区的直径(40nm)粗大(图4A，B)。在这种由胶原细纤维构成的小叶间隔上，带有直径20～80μm圆形或卵圆形的孔，以此使小叶分隔间彼此相通。松果体的小叶间血管及毛细血管，行于3个或多个小叶相汇处(图5)。
本研究用消蚀扫描电镜法，揭示了人松果体内结缔组织纤维的排列情况，其清晰程度是镀银光镜法和常规透射电镜所不及的。用消蚀法处理后，人松果体结缔组织保持了小叶的形状，完好地反映了小叶的原形。本研究结果显示，用NaOH处理后，胶原纤维构成的囊和隔仍可保持原有的位置和形状。根据纤维的粗细并结合透射电镜研究的结果[2]，人松果体的结缔组织纤维囊和隔，均由直径40～100nm的胶原细纤维所构成。
, 百拇医药
构成松果体结缔组织的纤维囊和隔是互相连续的。它代表了该器官结缔组织间隙的一种网架构造。因为松果体的叶间血管及毛细血管均穿行于松果体囊和隔的结缔组织中。因此，松果体的结缔组织对该器官不仅具有支持和保护作用，而且对该器官本身的营养和分泌过程也可能具有重要意义。
收稿1997-03 修回1998-03
参考文献
[1]Ohtani O.Three-dimensional organization of the connective tissue fibers of the human pancreas: A scanning electon microscopic study of NaOH treated tissue. Arch Histol Jap, 1987, 50(6):557
[2]Ohtani O, Ushiki T, Taguchi T, et al. A collagen fibrillar network as skeletal framework. A demonstration by cell-maceration/ scanning electron microscope method. Arch Histol Cytol, 1988, 51(3):249
, 百拇医药
[3]Nishimura T, Nattori A, Takahashi K. Ultrastructure of the intramuscular connective tissue in bovine skeletal muscle. A demonstration using the cell-maceration/scanning electron microscope method. Acta Anat, 1994, 151(4):250
[4]Shimada T, Zhang L, Oya M.Architecture and function of the extravascular fluid pathway:Special reference to the macual cribriformis in the diaphram.Acta Anat Nippon, 1995, 70(2):140
[5]Inoue T, Osatake H. A new drying method of biological specimens for scanning electron microscopy: The t-dutyl alcohol freezedrying method. Arch Histol Cytol, 1988,51(1):53
, 百拇医药
THE ARCHITECTURE OF THE CONNECTIVE TISSUE FIBERS
OF THE HUMAN PINEAL BODY: AN OBSERVATION BY
MACERATION AND SEM-METHOD
Wang BaozhiΔ， Wang Jianqin， Liu Feng， Usui T
(Department of Anatomy, Hebei Medical University, Shijiazhuang;
Department of Anatomy, Oita Medical University, Oita, Japan Department of Anatomy, Oita Medical University, Oita, Japan)
, 百拇医药
For demonstrating the arrangement of the connective tissue in human pineal body, this organ was observed using a maceration and scanning electron microscopic (SEM) method. The capsule of the organ was composed of collagen fiber bundles. A number of foramina framed by collagen fibers were observed on the surface of the capsule. The collagen fibers originating from the capsule formed interlobular septula and separated pineal parenchyma into 200～400 μm lobules. The capsule and septula were consisted of loosely arranged collagen fibrils. The septula possessed 20-80 μm round or oval holes through which the lobules were continuous with each other. The pineal interlobular blood vessels coursed through where three or more pineal lobules meet.
, 百拇医药
KEY WORDS Pineal body; Connective tissue; Maceration/SEM-method
△Department of Anatomy, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China
图1 经NaOH处理后人松果体断面的扫描电镜像.松果体结缔组织囊(C)和叶间隔(S)被清楚
显示。标尺示300μm 图2 松果体结缔组织囊表面可见由胶原纤维束编织成的孔隙(F)。
标尺示30μm 图3 一个松果体实质小叶的轮廓(L)。标尺示300μm 图4A，B 松果体
, 百拇医药 囊(图4A)和叶间隔(图4B)的胶原细纤维高倍SEM像。标尺示1.5μm 图5 显示胶原纤维隔
带有圆形或卵圆形的孔(H)，小叶间血管(V)穿行于3个或多个小叶相汇处。标尺示75μm
Fig.1 Scanning electron micrograph(SEM-graph)of the cut-surface of human pineal body treated with
10% NaOH. The pineal capsule(C) and the septula(S) are clearly shown. Bar＝300μm Fig.2 The
foramen(F)framed by the collagen fiber bundles are visible on the surface of the capsule.Bar＝30μm
, 百拇医药
Fig.3 Pineal parenchyma lobules(L).Bar＝300μm Fig.4 (A,B)SEM-graph of higher magnification
of the collagen fibrils in the pineal capsule (Fig.4A) and in the septula (Fig.4B).Bar＝1.5μm Fig.5
The collagen fiber septula possesses round or oval holes(H).Where three or more lobules meet, a
interlobular blood vessele(V) is shown. Bar＝75μm, http://www.100md.com(王保芝 王建钦 刘 峰 臼井猛史*)
单位：河北医科大学解剖学教研室，石家庄 050017；**大分医科大学解剖学讲座，日本大分 879-55
关键词：松果体；结缔组织；消蚀扫描电镜法
解剖学报980323 摘 要 为证明人松果体结缔组织纤维的排列，用消蚀扫描电镜法对该器官做了观察。松果体囊由胶原纤维束构成，囊表面可观察到大量由胶原纤维编织成的孔隙。起自囊的胶原纤维构成小叶间隔，分隔松果体实质为直径200～400μm的小叶。囊和隔由疏松排列的胶原细纤维构成。隔上有直径20～80μm圆形或卵圆形的孔，以此使小叶互相连通。小叶间血管在3个或多个小叶相汇处通行。
人松果体为一重要的神经内分泌器官。丰富的结缔组织的存在为松果体的特征之一，但对此研究甚少。人松果体被丰富的结缔组织分隔成小叶或滤泡。由于结缔组织的存在导致松果体的小叶化也见于马、羊和猪。但是，早期的研究未能清楚地显示松果体内结缔组织的构筑情况。
, 百拇医药
众所周知，结缔组织构成器官的网架。Ohtani[1]曾介绍一种用低温氢氧化钠溶液细胞消蚀法，然后用扫描电镜观察结缔组织纤维的排列。相继的研究表明，该方法能清楚显示不同组织内结缔组织纤维的排列[2～4]。我们利用这种消蚀扫描电镜法，研究了人松果体内结缔组织的构筑情况，获得了在松果体囊和隔内胶原纤维排列的清晰图像，报告如下。
材料和方法
所用松果体取自7具65～85岁男尸，均为非脑内恶性疾病死亡者。松果体从脑取出后，固定于10%中性福尔马林溶液中，用刀片作矢状和额状切片。两个标本用于对松果体隐窝、松果体囊及其切断面的常规扫描电镜观察。其余松果体标本在室温下于10%NaOH溶液浸泡消蚀1周，经消蚀的标本用蒸馏水浸洗24h以上直至标本透亮。
经过和未经NaOH处理的标本，经蒸馏水洗后放入2%单宁酸水溶液中过夜。蒸馏水洗后在1%锇酸溶液中后固定2～3h，经梯度洒精脱水，用丁醇冻结干燥处理[5]。JUC-5000镀膜仪镀金6.5min，日立S-800扫描电镜观察，加速电压为15kV。
, 百拇医药
结果和讨论
在扫描电镜下，可见经NaOH处理后的松果体标本，细胞成分和结缔组织基质被彻底消蚀掉，只有胶原纤维完好的保留。由胶原纤维形成的结缔组织囊和隔清晰可见(图1)。松果体被一完整的结缔组织囊包绕，此囊是由不同方向排列的直径为1～3μm的胶原纤维束所组成。在结缔组织囊的表面，可观察到大量由胶原纤维束编织成的孔隙(图2)。在松果体的切断面上，起于囊的结缔组织纤维，形成小叶间隔，将松果体实质分隔为直径200～400μm的小叶(图3)。在高倍放大下，松果体结缔组织囊和隔均由胶原细纤维所组成，通常囊区的胶原细纤维直径(100nm)要比隔区的直径(40nm)粗大(图4A，B)。在这种由胶原细纤维构成的小叶间隔上，带有直径20～80μm圆形或卵圆形的孔，以此使小叶分隔间彼此相通。松果体的小叶间血管及毛细血管，行于3个或多个小叶相汇处(图5)。
本研究用消蚀扫描电镜法，揭示了人松果体内结缔组织纤维的排列情况，其清晰程度是镀银光镜法和常规透射电镜所不及的。用消蚀法处理后，人松果体结缔组织保持了小叶的形状，完好地反映了小叶的原形。本研究结果显示，用NaOH处理后，胶原纤维构成的囊和隔仍可保持原有的位置和形状。根据纤维的粗细并结合透射电镜研究的结果[2]，人松果体的结缔组织纤维囊和隔，均由直径40～100nm的胶原细纤维所构成。
, 百拇医药
构成松果体结缔组织的纤维囊和隔是互相连续的。它代表了该器官结缔组织间隙的一种网架构造。因为松果体的叶间血管及毛细血管均穿行于松果体囊和隔的结缔组织中。因此，松果体的结缔组织对该器官不仅具有支持和保护作用，而且对该器官本身的营养和分泌过程也可能具有重要意义。
收稿1997-03 修回1998-03
参考文献
[1]Ohtani O.Three-dimensional organization of the connective tissue fibers of the human pancreas: A scanning electon microscopic study of NaOH treated tissue. Arch Histol Jap, 1987, 50(6):557
[2]Ohtani O, Ushiki T, Taguchi T, et al. A collagen fibrillar network as skeletal framework. A demonstration by cell-maceration/ scanning electron microscope method. Arch Histol Cytol, 1988, 51(3):249
, 百拇医药
[3]Nishimura T, Nattori A, Takahashi K. Ultrastructure of the intramuscular connective tissue in bovine skeletal muscle. A demonstration using the cell-maceration/scanning electron microscope method. Acta Anat, 1994, 151(4):250
[4]Shimada T, Zhang L, Oya M.Architecture and function of the extravascular fluid pathway:Special reference to the macual cribriformis in the diaphram.Acta Anat Nippon, 1995, 70(2):140
[5]Inoue T, Osatake H. A new drying method of biological specimens for scanning electron microscopy: The t-dutyl alcohol freezedrying method. Arch Histol Cytol, 1988,51(1):53
, 百拇医药
THE ARCHITECTURE OF THE CONNECTIVE TISSUE FIBERS
OF THE HUMAN PINEAL BODY: AN OBSERVATION BY
MACERATION AND SEM-METHOD
Wang BaozhiΔ， Wang Jianqin， Liu Feng， Usui T
(Department of Anatomy, Hebei Medical University, Shijiazhuang;
Department of Anatomy, Oita Medical University, Oita, Japan Department of Anatomy, Oita Medical University, Oita, Japan)
, 百拇医药
For demonstrating the arrangement of the connective tissue in human pineal body, this organ was observed using a maceration and scanning electron microscopic (SEM) method. The capsule of the organ was composed of collagen fiber bundles. A number of foramina framed by collagen fibers were observed on the surface of the capsule. The collagen fibers originating from the capsule formed interlobular septula and separated pineal parenchyma into 200～400 μm lobules. The capsule and septula were consisted of loosely arranged collagen fibrils. The septula possessed 20-80 μm round or oval holes through which the lobules were continuous with each other. The pineal interlobular blood vessels coursed through where three or more pineal lobules meet.
, 百拇医药
KEY WORDS Pineal body; Connective tissue; Maceration/SEM-method
△Department of Anatomy, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China
图1 经NaOH处理后人松果体断面的扫描电镜像.松果体结缔组织囊(C)和叶间隔(S)被清楚
显示。标尺示300μm 图2 松果体结缔组织囊表面可见由胶原纤维束编织成的孔隙(F)。
标尺示30μm 图3 一个松果体实质小叶的轮廓(L)。标尺示300μm 图4A，B 松果体
, 百拇医药 囊(图4A)和叶间隔(图4B)的胶原细纤维高倍SEM像。标尺示1.5μm 图5 显示胶原纤维隔
带有圆形或卵圆形的孔(H)，小叶间血管(V)穿行于3个或多个小叶相汇处。标尺示75μm
Fig.1 Scanning electron micrograph(SEM-graph)of the cut-surface of human pineal body treated with
10% NaOH. The pineal capsule(C) and the septula(S) are clearly shown. Bar＝300μm Fig.2 The
foramen(F)framed by the collagen fiber bundles are visible on the surface of the capsule.Bar＝30μm
, 百拇医药
Fig.3 Pineal parenchyma lobules(L).Bar＝300μm Fig.4 (A,B)SEM-graph of higher magnification
of the collagen fibrils in the pineal capsule (Fig.4A) and in the septula (Fig.4B).Bar＝1.5μm Fig.5
The collagen fiber septula possesses round or oval holes(H).Where three or more lobules meet, a
interlobular blood vessele(V) is shown. Bar＝75μm, http://www.100md.com(王保芝 王建钦 刘 峰 臼井猛史*)