脑胶质瘤基因治疗
作者：田竟生 刘天承 李爱华 孙阳 刘羿男 杨慧
单位：田竟生 刘天承 李爱华 孙阳 刘羿男 杨慧 首都医科大学神经科学研究所，北京 100054
关键词：
解剖学报990229 脑胶质瘤占颅内肿瘤的40%～50%。一般而言，平均生存期不超过1年。现有的治疗措施如外科手术切除、术后放疗、化疗和免疫治疗难以达到根除，复发率很高，严重影响生存质量和生存期。90年代由于肿瘤分子生物学理论与技术的发展，使得基因治疗成为医学研究领域的前沿课题，为国内外研究的热点。
恶性胶质瘤基因治疗的策略主要有以下6类：1.基因置换；2.基因补偿；3.基因失活；4.免疫基因治疗；5.耐药基因治疗6.自杀基因治疗。就脑胶质瘤而言，自杀基因是最佳选择。本研究在上述报道的基础上，使用单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinases,HSV-tk)为靶基因。这是因为tk基因表达产物为一种酶，此酶可使鸟苷类似物(ganciclovir,GCV)磷酸化，单磷酸化的GCV在细胞内转化为三磷酸化形式，掺入分裂细胞的DNA中，抑制其DNA合成，从而杀伤被tk转染的肿瘤细胞及生产tk的细胞系，故特称为自杀基因疗法。我们完成了以下3方面的研究内容：(1)含HSV-tk目的的基因的4种质粒和逆转录载体的构建，包括pCMV-tk、pL2-tk、PELSN-tk、pN2A-tk,经酶切鉴定证明是正向插入；酶切后的Southern杂交显示均含有HSV1-tk序列。(2)将重组HSV1-tk基因的逆转录病毒载体(pN2A-HSV1-tk)DNA行体外包装，病毒滴度达5×105cfu/ml。(3)通过体外细胞毒实验和体内人脑胶质瘤裸鼠模型的实验性基因治疗，结果表明实验组与对照组之间差异显著(P<0.01)。现已完成了人脑胶质瘤的实验性基因治疗工作，为今后临床方案的实施提供了基础资料。
北京市自然科学基金资助课题(No.7951003)
收稿1998-12, 百拇医药
单位：田竟生 刘天承 李爱华 孙阳 刘羿男 杨慧 首都医科大学神经科学研究所，北京 100054
关键词：
解剖学报990229 脑胶质瘤占颅内肿瘤的40%～50%。一般而言，平均生存期不超过1年。现有的治疗措施如外科手术切除、术后放疗、化疗和免疫治疗难以达到根除，复发率很高，严重影响生存质量和生存期。90年代由于肿瘤分子生物学理论与技术的发展，使得基因治疗成为医学研究领域的前沿课题，为国内外研究的热点。
恶性胶质瘤基因治疗的策略主要有以下6类：1.基因置换；2.基因补偿；3.基因失活；4.免疫基因治疗；5.耐药基因治疗6.自杀基因治疗。就脑胶质瘤而言，自杀基因是最佳选择。本研究在上述报道的基础上，使用单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinases,HSV-tk)为靶基因。这是因为tk基因表达产物为一种酶，此酶可使鸟苷类似物(ganciclovir,GCV)磷酸化，单磷酸化的GCV在细胞内转化为三磷酸化形式，掺入分裂细胞的DNA中，抑制其DNA合成，从而杀伤被tk转染的肿瘤细胞及生产tk的细胞系，故特称为自杀基因疗法。我们完成了以下3方面的研究内容：(1)含HSV-tk目的的基因的4种质粒和逆转录载体的构建，包括pCMV-tk、pL2-tk、PELSN-tk、pN2A-tk,经酶切鉴定证明是正向插入；酶切后的Southern杂交显示均含有HSV1-tk序列。(2)将重组HSV1-tk基因的逆转录病毒载体(pN2A-HSV1-tk)DNA行体外包装，病毒滴度达5×105cfu/ml。(3)通过体外细胞毒实验和体内人脑胶质瘤裸鼠模型的实验性基因治疗，结果表明实验组与对照组之间差异显著(P<0.01)。现已完成了人脑胶质瘤的实验性基因治疗工作，为今后临床方案的实施提供了基础资料。
北京市自然科学基金资助课题(No.7951003)
收稿1998-12, 百拇医药