人胰腺导管上皮表达胰岛淀粉样多肽
作者：黄岩 董静霞 李枫 石爱荣
单位：黄岩(潍坊医学院组织学胚胎学教研室，潍坊 261042)；董静霞(北京医科大学组织学胚胎学系,北京 100083)；李枫(北京医科大学组织学胚胎学系,北京 100083)；石爱荣(北京医科大学组织学胚胎学系,北京 100083)
关键词：胰岛淀粉样多肽；胰腺导管上皮；免疫组织化学；人
解剖学报000324 【摘要】 目的 观察人胰腺导管上皮胰岛淀粉样多肽的分布。 方法 4例正常成人胰腺组织石蜡切片，用免疫组织化学PAP方法显示IAPP-IR细胞，Mayer苏木素复染。 结果 发现胰腺小叶间导管、小叶内导管、闰管上皮细胞至泡心细胞均呈胰岛淀粉样多肽免疫反应性，阳性物质主要分布于核上方及两侧。 结论 本研究证明人胰腺导管上皮细胞表达胰岛淀粉样多肽，推测其可能与胰腺的自我保护和胰液中碳酸氢盐的分泌有关。观察人胰腺导管上皮胰岛淀粉样多肽的分布。 方法 4例正常成人胰腺组织石蜡切片，用免疫组织化学PAP方法显示IAPP-IR细胞，Mayer苏木素复染。 结果 发现胰腺小叶间导管、小叶内导管、闰管上皮细胞至泡心细胞均呈胰岛淀粉样多肽免疫反应性，阳性物质主要分布于核上方及两侧。 结论 本研究证明人胰腺导管上皮细胞表达胰岛淀粉样多肽，推测其可能与胰腺的自我保护和胰液中碳酸氢盐的分泌有关。
, 百拇医药
【中图分类号】 R329.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 0529-1356(2000)03-283
EXPRESSION OF ISLET AMYLOID POLYPEPTIDE
IN HUMAN PANCREAS DUCTAL EPITHELIUM
HUANG Yan DONG Jing-xia LI Feng SHI Ai-rong
Department of Histology and Embryology, Weifang Medical College, Weifang 261042, China
Beijing Medical University， Beijing 100083,China
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To observe the distribution of islet amyloid polypeptide(IAPP) in pancreatic ductal epithelium. Methods Four cases of normal human pancreases were obtained and immunohistochemical method and Mayer hematoxylin staining were used to show IAPP-immunoreative cells. Results It was found for the first time that IAPP distributes all the parts of ductal epithelium from interlobular duct to centroacinar cell and was located in the upside and both sides of nucleus. Conclusion The present work demonstrated that the human pancreas ductal epithelial cells express islet amyloid polypeptide, and supposed that IAPP may be related to the pancreas autoprotection and the secretion of HCO-3.
, http://www.100md.com
【Key words】 IAPP; Pancreas ductal epithelium; Immunohistochemistry; Human
胰岛淀粉样多肽(islet amyloid polypeptide, IAPP)是与胰岛素共存于正常胰岛B细胞同一分泌颗粒内的多肽类激素。近年来的研究发现，IAPP也存在于消化管等部位[1]。但关于IAPP在人胰腺导管上皮的分布国内外均未见报道。本研究就此进行了较为详细的观察，为进一步深入探讨IAPP的生理作用提供形态学依据。
材料和方法
收集4例正常人经Bouin液固定的胰腺石蜡块，切成5μm厚的连续切片，取相邻切片用Sternberger PAP法进行免疫组织化学染色，分别显示胰岛素(Ins)-和IAPP-免疫反应性(IR)细胞。主要步骤为：切片常规脱蜡到PBS，甲醇-H2O2和正常羊血清封闭后，分别滴加兔抗IAPP抗血清(1∶6 000， Peninsula Lab, USA产品)和豚鼠抗胰岛素抗血清(1∶600)，4℃孵育过夜；羊抗兔IgG(1∶50)37℃ 40min；兔抗PAP复合物(1∶100)37℃ 40min；DAB显色盒(北京中山生物技术有限公司)显色，Mayer苏木精复染细胞核，常规封片。以PBS代替第一抗体作为阴性对照。
, 百拇医药
结果和讨论
镜下观察发现，胰腺小叶间导管、小叶内导管上皮细胞均呈IAPP免疫反应性，免疫反应产物呈棕黄色，主要位于核上方和两侧(图1)，至闰管上皮和泡心细胞阳性染色减弱呈浅黄色(图2)。同一胰腺切片中，胰岛IAPP-IR细胞呈色强度较小叶内导管上皮弱，似闰管上皮呈浅黄色(图1)。观察邻片同一部位的IAPP和胰岛素免疫组织化学染色结果，同一小叶内导管上皮IAPP为弱阳性(图3)，但未见胰岛素免疫染色，而胰岛内及散在于腺泡和导管上皮细胞之间的Ins-IR细胞呈深棕色(图4)。
阴性对照片未见任何阳性反应。
关于人胰腺导管上皮内IAPP-IR细胞的分布国内外尚未见报道，对大鼠胰腺的观察发现，导管上皮内均有散在的IAPP-IR细胞，而且其定位与Ins-IR细胞一致[1]。本研究观察到，人胰腺小叶间导管至闰管上皮和泡心细胞均呈IAPP阳性反应，但邻片Ins免疫染色相同部位均为阴性，这一结果在国内外尚未见报道。
, 百拇医药
胰岛淀粉样多肽是90年代末新发现的存在于胰岛参与血糖调节的第3种多肽激素[2]，新近的研究表明，该激素也存在于胃肠道参与胃肠功能的调节[1，3]，并具有促进肾近曲小管钠和水的重吸收等功能[4]。本研究观察到人胰腺导管上皮细胞内均存在IAPP，而且IAPP不与胰岛素共存，该结果与以往在大鼠导管上皮观察到的散在的IAPP与胰岛素共存细胞[1]结果不一致，推测其功能意义如下：首先，胰腺腺泡分泌胰蛋白酶、糜蛋白酶和脂肪酶等，它们均通过导管分泌至十二指肠；同时，肠腔内的有害物质亦有可能反流入胰腺，因而，这些内、外源性物质极易造成胰腺损伤。但正常胰腺能低抗这种损伤，说明其自身的保护机制在起作用。已有研究报道，IAPP能防止有害因素对胃粘膜的损伤[5]，由此推测，胰腺自身的抗损伤能力可能就在于其导管上皮能分泌IAPP，从而使胰腺组织免受内、外源性物质的损伤。其次，胰腺导管上皮是分泌碳酸氢盐的主要部位，IAPP在肾近曲小管能参与水盐代谢调节[4]，因而提示胰腺导管上皮内的IAPP可能与碳酸氢盐的分泌有关。本研究结果还表明，IAPP的分布和功能可能存在物种之间的差异。但上述推测均有待证实。
, http://www.100md.com
图版说明
图1 正常成人胰腺小叶内导管上皮细胞呈IAPP阳性染色，示胰岛的一部分。免疫组织化学PAP法，Mayer苏木精复染细胞核(以下同) ×400
图2 正常成人胰腺小叶内导管上皮()及泡心细胞(↑)呈IAPP阳性染色 ×400
图3 正常成人胰腺闰管(↑)及小叶内导管上皮()呈IAPP弱阳性染色 ×400
图4 图3邻片的Ins-IR染色，示图3中小叶内导管上皮呈Ins免疫染色阴性。图中可见散在的Ins-IR染色强阳性细胞(↑) ×400
Explanation of figures
Fig.1-4 Immunohistochemical PAP method. Mayer hematoxylin conterstain.
, http://www.100md.com
Fig.1 Intralobular ductal epithelium of human pancreas is positive for IAPP. showing the part of pancreatic islet ×400
Fig.2 Intralobular ductal epithelium () and centroacinar cells (↑) of human pancreas is positive for IAPP. ×400
Fig.3 Intercalated duct(↑) and intralobular epithelia() are weak positive for IAPP. ×400
Fig.4 Staining for Ins on the adjacent section. The same one intralobular duct as the one in Fig.3 is negative for Ins.(↑) Showing the sparsed strong positive Ins-IR cell ×400
, http://www.100md.com
【作者简介】 黄岩(1957-)，女(汉族)，山东省人，博士，教授
通讯作者(To whom correspondence should be addressed)
参考文献
[1]李占淳，黄岩，石爱荣，等.IAPP免疫反应细胞在成年大鼠胃肠胰系统的分布与形态学研究[J].解剖学报，1994，25(4)：408～412.
[2]Ludvik B, Kautzky WA, Prager R, et al. Amylin:history and overview[J]. Diabet Med, 1997, 14(suppl2):S9-13.
[3]Mulder H, Ekelund M, Ekblad E, et al. Islet amyloid polypeptide in the gut and pancreas: localization, ontogeny and gut motility effects[J]. Peptides, 1997, 18(6):771-783.
, http://www.100md.com
[4]Harris PJ, Cooper ME, Hiranyachattada S, et al. Amylin stimulates proximal tubular sodium transport and cell proliferation in the rat kidney[J]. Am J Physiol, 1997, 272(1 Pt 2):F13-F21.
[5]Clementi G, Caruso A, Cutuli VM, et al. Effect of amylin in various experimental models of gastric ulcer[J]. Eur J Pharmacol, 1997, 332(2):209-213.
【收稿日期】1999-04-30 【修稿日期】1999-07-23, 百拇医药
单位：黄岩(潍坊医学院组织学胚胎学教研室，潍坊 261042)；董静霞(北京医科大学组织学胚胎学系,北京 100083)；李枫(北京医科大学组织学胚胎学系,北京 100083)；石爱荣(北京医科大学组织学胚胎学系,北京 100083)
关键词：胰岛淀粉样多肽；胰腺导管上皮；免疫组织化学；人
解剖学报000324 【摘要】 目的 观察人胰腺导管上皮胰岛淀粉样多肽的分布。 方法 4例正常成人胰腺组织石蜡切片，用免疫组织化学PAP方法显示IAPP-IR细胞，Mayer苏木素复染。 结果 发现胰腺小叶间导管、小叶内导管、闰管上皮细胞至泡心细胞均呈胰岛淀粉样多肽免疫反应性，阳性物质主要分布于核上方及两侧。 结论 本研究证明人胰腺导管上皮细胞表达胰岛淀粉样多肽，推测其可能与胰腺的自我保护和胰液中碳酸氢盐的分泌有关。观察人胰腺导管上皮胰岛淀粉样多肽的分布。 方法 4例正常成人胰腺组织石蜡切片，用免疫组织化学PAP方法显示IAPP-IR细胞，Mayer苏木素复染。 结果 发现胰腺小叶间导管、小叶内导管、闰管上皮细胞至泡心细胞均呈胰岛淀粉样多肽免疫反应性，阳性物质主要分布于核上方及两侧。 结论 本研究证明人胰腺导管上皮细胞表达胰岛淀粉样多肽，推测其可能与胰腺的自我保护和胰液中碳酸氢盐的分泌有关。
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【中图分类号】 R329.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 0529-1356(2000)03-283
EXPRESSION OF ISLET AMYLOID POLYPEPTIDE
IN HUMAN PANCREAS DUCTAL EPITHELIUM
HUANG Yan DONG Jing-xia LI Feng SHI Ai-rong
Department of Histology and Embryology, Weifang Medical College, Weifang 261042, China
Beijing Medical University， Beijing 100083,China
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To observe the distribution of islet amyloid polypeptide(IAPP) in pancreatic ductal epithelium. Methods Four cases of normal human pancreases were obtained and immunohistochemical method and Mayer hematoxylin staining were used to show IAPP-immunoreative cells. Results It was found for the first time that IAPP distributes all the parts of ductal epithelium from interlobular duct to centroacinar cell and was located in the upside and both sides of nucleus. Conclusion The present work demonstrated that the human pancreas ductal epithelial cells express islet amyloid polypeptide, and supposed that IAPP may be related to the pancreas autoprotection and the secretion of HCO-3.
, http://www.100md.com
【Key words】 IAPP; Pancreas ductal epithelium; Immunohistochemistry; Human
胰岛淀粉样多肽(islet amyloid polypeptide, IAPP)是与胰岛素共存于正常胰岛B细胞同一分泌颗粒内的多肽类激素。近年来的研究发现，IAPP也存在于消化管等部位[1]。但关于IAPP在人胰腺导管上皮的分布国内外均未见报道。本研究就此进行了较为详细的观察，为进一步深入探讨IAPP的生理作用提供形态学依据。
材料和方法
收集4例正常人经Bouin液固定的胰腺石蜡块，切成5μm厚的连续切片，取相邻切片用Sternberger PAP法进行免疫组织化学染色，分别显示胰岛素(Ins)-和IAPP-免疫反应性(IR)细胞。主要步骤为：切片常规脱蜡到PBS，甲醇-H2O2和正常羊血清封闭后，分别滴加兔抗IAPP抗血清(1∶6 000， Peninsula Lab, USA产品)和豚鼠抗胰岛素抗血清(1∶600)，4℃孵育过夜；羊抗兔IgG(1∶50)37℃ 40min；兔抗PAP复合物(1∶100)37℃ 40min；DAB显色盒(北京中山生物技术有限公司)显色，Mayer苏木精复染细胞核，常规封片。以PBS代替第一抗体作为阴性对照。
, 百拇医药
结果和讨论
镜下观察发现，胰腺小叶间导管、小叶内导管上皮细胞均呈IAPP免疫反应性，免疫反应产物呈棕黄色，主要位于核上方和两侧(图1)，至闰管上皮和泡心细胞阳性染色减弱呈浅黄色(图2)。同一胰腺切片中，胰岛IAPP-IR细胞呈色强度较小叶内导管上皮弱，似闰管上皮呈浅黄色(图1)。观察邻片同一部位的IAPP和胰岛素免疫组织化学染色结果，同一小叶内导管上皮IAPP为弱阳性(图3)，但未见胰岛素免疫染色，而胰岛内及散在于腺泡和导管上皮细胞之间的Ins-IR细胞呈深棕色(图4)。
阴性对照片未见任何阳性反应。
关于人胰腺导管上皮内IAPP-IR细胞的分布国内外尚未见报道，对大鼠胰腺的观察发现，导管上皮内均有散在的IAPP-IR细胞，而且其定位与Ins-IR细胞一致[1]。本研究观察到，人胰腺小叶间导管至闰管上皮和泡心细胞均呈IAPP阳性反应，但邻片Ins免疫染色相同部位均为阴性，这一结果在国内外尚未见报道。
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胰岛淀粉样多肽是90年代末新发现的存在于胰岛参与血糖调节的第3种多肽激素[2]，新近的研究表明，该激素也存在于胃肠道参与胃肠功能的调节[1，3]，并具有促进肾近曲小管钠和水的重吸收等功能[4]。本研究观察到人胰腺导管上皮细胞内均存在IAPP，而且IAPP不与胰岛素共存，该结果与以往在大鼠导管上皮观察到的散在的IAPP与胰岛素共存细胞[1]结果不一致，推测其功能意义如下：首先，胰腺腺泡分泌胰蛋白酶、糜蛋白酶和脂肪酶等，它们均通过导管分泌至十二指肠；同时，肠腔内的有害物质亦有可能反流入胰腺，因而，这些内、外源性物质极易造成胰腺损伤。但正常胰腺能低抗这种损伤，说明其自身的保护机制在起作用。已有研究报道，IAPP能防止有害因素对胃粘膜的损伤[5]，由此推测，胰腺自身的抗损伤能力可能就在于其导管上皮能分泌IAPP，从而使胰腺组织免受内、外源性物质的损伤。其次，胰腺导管上皮是分泌碳酸氢盐的主要部位，IAPP在肾近曲小管能参与水盐代谢调节[4]，因而提示胰腺导管上皮内的IAPP可能与碳酸氢盐的分泌有关。本研究结果还表明，IAPP的分布和功能可能存在物种之间的差异。但上述推测均有待证实。
, http://www.100md.com
图版说明
图1 正常成人胰腺小叶内导管上皮细胞呈IAPP阳性染色，示胰岛的一部分。免疫组织化学PAP法，Mayer苏木精复染细胞核(以下同) ×400
图2 正常成人胰腺小叶内导管上皮()及泡心细胞(↑)呈IAPP阳性染色 ×400
图3 正常成人胰腺闰管(↑)及小叶内导管上皮()呈IAPP弱阳性染色 ×400
图4 图3邻片的Ins-IR染色，示图3中小叶内导管上皮呈Ins免疫染色阴性。图中可见散在的Ins-IR染色强阳性细胞(↑) ×400
Explanation of figures
Fig.1-4 Immunohistochemical PAP method. Mayer hematoxylin conterstain.
, http://www.100md.com
Fig.1 Intralobular ductal epithelium of human pancreas is positive for IAPP. showing the part of pancreatic islet ×400
Fig.2 Intralobular ductal epithelium () and centroacinar cells (↑) of human pancreas is positive for IAPP. ×400
Fig.3 Intercalated duct(↑) and intralobular epithelia() are weak positive for IAPP. ×400
Fig.4 Staining for Ins on the adjacent section. The same one intralobular duct as the one in Fig.3 is negative for Ins.(↑) Showing the sparsed strong positive Ins-IR cell ×400
, http://www.100md.com
【作者简介】 黄岩(1957-)，女(汉族)，山东省人，博士，教授
通讯作者(To whom correspondence should be addressed)
参考文献
[1]李占淳，黄岩，石爱荣，等.IAPP免疫反应细胞在成年大鼠胃肠胰系统的分布与形态学研究[J].解剖学报，1994，25(4)：408～412.
[2]Ludvik B, Kautzky WA, Prager R, et al. Amylin:history and overview[J]. Diabet Med, 1997, 14(suppl2):S9-13.
[3]Mulder H, Ekelund M, Ekblad E, et al. Islet amyloid polypeptide in the gut and pancreas: localization, ontogeny and gut motility effects[J]. Peptides, 1997, 18(6):771-783.
, http://www.100md.com
[4]Harris PJ, Cooper ME, Hiranyachattada S, et al. Amylin stimulates proximal tubular sodium transport and cell proliferation in the rat kidney[J]. Am J Physiol, 1997, 272(1 Pt 2):F13-F21.
[5]Clementi G, Caruso A, Cutuli VM, et al. Effect of amylin in various experimental models of gastric ulcer[J]. Eur J Pharmacol, 1997, 332(2):209-213.
【收稿日期】1999-04-30 【修稿日期】1999-07-23, 百拇医药