软肝丸的药效学研究
作者：方素华 何永亮 王红星 廖世平 霍祥高 钟振东 何光星 胡尧碧 周世清 陈培益 冯永奎
单位：方素华 何永亮 王红星 廖世平 霍祥高 钟振东 四川省医学科学院 简阳；何光星 胡尧碧 周世清 四川省中药研究所；陈培益 冯永奎 华西肝病研究所
关键词：
四川生理科学杂志990106 陈氏软肝丸是治疗肝纤维化药物。临床应用表明能促进白蛋白合成，纠正A/G比例失调，使肝功能恢复正常，降低门静脉压，抑制肝纤维化，提高机体免疫功能等。本文研究了其主要药效。
1 实验材料
1.1 动物 ICR小鼠、SD大鼠，合格证号医动字24101102和24101101号，由四川省医科院医学实验动物中心提供。昆明种小鼠、C57BL/6J小鼠，合格证医动字24301035号，由四川省中药研究所提供。
, http://www.100md.com
1.2 实验药物 陈氏软肝丸浸膏每克含生药1.4，批号9601108，由四川华西肝病研究所提供。联苯双酯，南京第二药厂产品，批号931001。秋水仙碱(Laboratoyres HOUDE)，批号DEC95。
1.3 试剂 D-氨基半乳糖(重庆医学院产品)，批号951124。四氯化碳(CCl4)(重庆化学试剂厂产品)分析纯，批号950306。印度墨汁(北京西中化工厂产品)，批号950701。
2 实验方法与结果
2.1 对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用 ICR小鼠96只，体重22～24克，雌雄各半，分6组ig给药，每天1次，连续8天，第7天药后8h，除空白对照组外均ip 0.2%CCl4色拉油0.1ml/10g，末次给药1h(即CCl4攻毒16h)，所有动物股动脉放血处死，取血清检测AST、ALT，取肝脏称重。表1结果显示，软肝丸肝脏指数明显为轻，AST、ALT明显为低，表明软肝丸有明显的保肝降酶作用。
, 百拇医药
表1 对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用(
±s) 组 别
剂量
(g/kg)
肝脏指数
(g/100g)
AST
(karU)
ALT
(karU)
空白对照
5.38±0.69
, http://www.100md.com
66.4±24.0
66.0±39.6
模型对照
6.14±0.54
349.5±40.4
465.3±38.9
联苯双酯
0.05
6.08±0.61
211.1±43.6**
195.5±45.5**
, 百拇医药
软肝丸
10
5.36±0.74**
169.8±44.2**
173.6±57.1**
软肝丸
5
5.59±0.79*
205.3±53.5**
237.5±74.8**
, http://www.100md.com 软肝丸
2.5
5.33±0.82**
257.8±70.4**
279.8±72.0**
n=16与模型组比较 * P<0.05,** P<0.01
2.2 对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤的保护作用 小鼠分组及给药同上，ip D-氨基半乳糖600mg/kg引起肝损伤。表2结果软肝丸可使肝脏指数明显为小，AST、ALT明显为低，表明软肝丸对D-氨基半乳糖所致小鼠肝损伤有明显保护作用。
表2 对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤的保护作用(
±s) 组 别
, http://www.100md.com
剂量
(g/kg)
肝脏指数
(g/100g)
AST
(karU)
ALT
(karU)
空白对照
5.91±0.64
47.6±16.1
54.3±18.0
, http://www.100md.com 模型对照
6.51±1.16
291.3±68.6
288.8±62.1
联苯双酯
0.05
6.19±1.04
148.8±39.1**
223.0±95.0*
软肝丸
10
5.61±0.84*
, 百拇医药
198.3±26.4**
213.3±53.98**
软肝丸
5
5.80±0.61*
208.9±60.3**
180.6±58.1**
软肝丸
2.5
5.67±0.68*
, http://www.100md.com
199.3±29.6**
201.5±74.4**
2.3 对大鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤保护作用 SD大鼠50只雌雄各半，体重170～220克，分6组，ig给药每天1次，连续8天，第7天给药8h，除空白对照组外，其余各组动物均ip D-氨基半乳糖650mg/kg,16h(即第8天末次给药1h)股动脉采血，取血清测AST、ALT，肝脏称重计算肝脏指数，结果见表3，软肝丸有明显的降酶作用。
表3 对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤的保护作用(±s) 组 别
剂量
(g/kg)
, http://www.100md.com
肝脏指数
(g/100g)
AST
(karU)
ALT
(karU)
空白对照
32.33±3.60
107.0±18.33
45.5±14.7
模型对照
46.12±7.05
, 百拇医药
402.0±167.7
568.0±184.7
联苯双酯
0.05
43.71±2.46
302.5±90.0
337.5±169.7**
软肝丸
10
44.36±5.10
362.5±64.0
407.5±108.8*
, 百拇医药
软肝丸
5
43.57±4.61
356.9±96.3
465.6±115.6*
软肝丸
2.5
39.28±4.25*
263.1±113.1*
306.3±105.9**
2.4 对CCl4诱发大鼠肝纤维化的影响 大鼠160～190克雌雄各半，142只分6组，除空白对照组外，其余各组于实验第1天sc 40%CCl4色拉油0.5ml/100g，以后每周分2次皮下注射25%CCl4色拉油0.2ml/100g，连续攻毒40天，第41天开始每天ig受试药液一次，治疗期间继续上法攻毒。每周称体重调整CCl4注射量和给药量。给药30天(即攻毒后70天)，各组取8～12只动物股动脉放血，取血清测AST、ALT、TP、ALB、PCⅢ(125I放免法)；取肝脏称重，取左肝一小块用10%甲醛固定，石腊包埋切片，HE染色，镜检各动物肝组织病变；取肝组织测定羟脯氨酸含量。动物死亡情况见表4，死亡率软肝丸大、中剂量组均较秋水仙碱和模型组显著为低，除秋水仙碱组体重无变化外，其余各组体重略有增长，但各组间比较均无统计学差异。
, 百拇医药
表4 对肝纤维化大鼠死亡的影响 组 别
剂量
(g/kg)
攻毒前
动物(只)
攻毒40天
动物(只)
治疗30天
动物(只)
死亡率
(%)
空白对照
20
, 百拇医药
20
19
(1/20) 5.0
模型对照
25
19
12
(13/25) 52
秋水仙碱
125μg
25
22
8
, 百拇医药
(17/25) 68
软肝丸
10
23
22
21
(2/23) 8.7△△**
软肝丸
5
24
21
19
(5/24) 20.8△△**
, http://www.100md.com
软肝丸
2.5
25
21
14
(11/25) 44.0
与秋水仙碱组相比 △△ P<0.01
肝指数及血清生化检测结果见表5，软肝丸大剂量组ALT与模型组比较有显著性差异，总蛋白和白蛋白变化不明显。
表5 血清生化检测 组 别
动物
(只)
, http://www.100md.com
剂量
(g/kg)
AST
(karU)
ALT
(karU)
TP
(g/L)
ALB
(g/L)
肝指数
(g/100g)
空白对照
, 百拇医药
8
113.8±33.5
29.3±8.03
72.83±8.03
52.18±9.17
3.42±0.51
模型对照
12
190.0±92.3
45.8±29.2
71.51±5.42
48.87±11.35
, 百拇医药
4.32±0.60
秋水仙碱
8
125μg
201.9±86.9
30.6±20.5
67.74±8.68
52.04±15.89
3.99±0.87
软肝丸
10
10
, 百拇医药
156.0±48.8
23.0±14.8
66.51±11.07
56.46±11.28
4.14±0.43
软肝丸
10
5
182.0±45.6
30.5±18.02
67.80±4.29
51.35±10.63
, 百拇医药
4.21±0.86
软肝丸
10
2.5
171.0±77.2
54.0±25.7
60.11±5.36
55.81±14.96
3.94±0.36
病理组织学检测结果见表6，由表6可见软肝丸各剂量组，特别是中剂量组对浊肝、炎症、坏死、脂肪变性均有一定效果。
表6 病理组织学镜检 组 别
, 百拇医药
动物
(只)
剂量
(g/kg)
浊 肿
脂肪变性
坏 死
炎性细胞
纤维组织增生
±
+
, 百拇医药
平均
±
+
平均
±
+
, 百拇医药
平均
±
+
平均
±
+
, 百拇医药
平均
空白对照
8
8
0
0
0
0
8
0
0
0
0
8
, 百拇医药
0
0
0
0
8
0
0
0
0
8
0
0
0
0
, 百拇医药
模型对照
12
0
0
7
5
2.42
0
0
5
7
2.58
0
0
, 百拇医药
6
6
2.50
0
0
6
6
2.5
0
0
4
8
2.67
秋水仙碱
, 百拇医药
8
125μg
0
1
5
2
2.12
0
2
2
4
2.25
0
0
, http://www.100md.com
5
3
2.38
0
2
6
0
1.75
0
0
4
4
2.50
软肝丸
, 百拇医药
10
10
0
1
3
6
2.50
0
2
4
4
2.2
0
0
, http://www.100md.com
4
6
2.40
0
1
7
2
2.1
0
0
4
6
2.6
软肝丸
, http://www.100md.com
10
5
0
1
7
2
2.10
0
1
6
3
2.2
0
0
, http://www.100md.com
6
4
2.4
0
2
6
2
2.0
0
0
4
6
2.6
软肝丸
, 百拇医药
10
2.5
0
0
6
4
2.40
0
0
6
4
2.4
0
0
, http://www.100md.com
6
4
2.4
0
0
7
3
2.3
0
0
3
7
2.7
病理损害程度分4组：“±”表示无或极少病理变化；“+”轻度损害；“”中度损害，坏死及纤维组织增生；“”重度损害，假小叶形成。
, 百拇医药
肝脏羟脯氨酸和PCⅢ测定结果见表7，软肝丸能降低肝脏羟脯氨酸和PCⅢ的含量。
表7 对肝脏羟脯氨酸、血清PCⅢ的影响(±s) 组 别
动物
(只)
剂量
(g/kg)
肝羟脯氨酸含量
(mg/干重)
PCⅢ
(μg/L)
, http://www.100md.com
空白对照
8
39.79±2.90
16.31±5.87
模型对照
12
55.95±15.01
26.00±7.73
秋水仙碱
8
125μg
46.78±8.84
, http://www.100md.com 20.00±2.52
软肝丸
10
10
36.01±14.17**
14.95±6.67**
软肝丸
10
5
37.18±3.29**
17.70±3.38**
, http://www.100md.com
软肝丸
10
2.5
44.02±8.10*
18.70±9.05*
2.5 对巨噬细胞吞噬功能的影响 昆明种小鼠50只雌雄各半分5组，ig给药连续4天，末次给药后45min尾iv印度墨汁0.1ml/kg，注射后30s和11min从眼眶取血20μl，加入0.1% Na2CO3溶液2ml中，650nm测定OD值，计算吞噬指数K，结果对照组为0.0346±0.0086，软肝丸1、3、9g/kg分别为0.0442±0.0099(P<0.05)、0.0363±0.0064和0.0349±0.0058，云芝多糖50mg/kg ip为0.0471±0.0101(P<0.01)。
, 百拇医药
2.6 对迟发型超敏反应的影响 昆明种小鼠50只分5组，ig给药每日1次，首次给药后24h于每鼠颈背部sc 0.6%DNCB丙酮麻油液30μl，两天后重复致敏1次。连续给药8天后以1%DNCB丙酮麻油液20μl均匀涂于小鼠左耳，16h后处死，用8mm打孔器取下左右耳片，精密扭力天平称重，以二者重量差的mg数表示迟发超敏反应强度，结果对照为3.64±0.69，软肝丸1、3、9g/kg分别为4.64±1.77、2.98±1.04和2.60±0.65(P<0.05)，强的松25mg/kg为2.07±1.24(P<0.01)，表明大剂量软肝丸能明显抑制小鼠迟发型超敏反应。
2.7 对鸡红细胞所致溶血素抗体生成的影响 昆明种小鼠60只雌雄各半，分6组，ig给药，在给药第2天起用环磷酰胺(Cy) ip 20mg/kg间日1次造成免疫功能低下，在给药第3天时每鼠ip 2%鸡红细胞0.2ml/20g免疫，并继续给药，于免疫后7日每鼠眼眶取血20μl测HC50(OD值)，结果对照组为345±242，Cy组为36.9±16.9，Cy加软肝丸1、3、9g/kg分别为50±33、56±31及65±41，Cy加人参皂甙(ip 60mg/kg)为85±35，后二组与Cy组相比P值小于0.05。表明软肝丸大剂量和人参皂甙均能显著增加环磷酰胺造成免疫功能低下的小鼠溶血素抗体的生成。
, http://www.100md.com
2.8 对免疫性肝损伤的影响 C57BL/6J小鼠60只雌雄各半，分6组，ig给药每天1次，预防给药2d时剪去小鼠腹毛，将1%的DNCB丙酮麻油液30μl涂于腹部致敏，3天后同法加强1次，于末次致敏后6d，用2%DNCB 20μl进行肝穿刺诱发DTH反应(诱发肝损伤)，攻击18h后取血测定血清ALT的活性(u/dl)，结果正常对照组为43.7±5.2，模型组为133±38，软肝丸1、3、9g/kg分别为102±33.9、78.4±18.7(P<0.01)和87.6±41.5(P<0.05)，而强的松25mg/kg为65.7±20.2，表明小鼠肝脏诱发的DTH模型ALT水平显著升高，软肝丸3g/kg、9g/kg组血清中ALT明显低于模型组，说明软肝丸对免疫性肝损伤有保护作用。
2.9 对大鼠胆汁分泌的影响 雄大鼠32只，体重226.8±25.7克，分4组，实验前12h禁食不禁水。实验时ig生理盐水1ml/100g，ip 30mg/kg戊巴比妥钠麻醉，大鼠仰位固定，腹部正中切口2厘米，找到总胆管，将导管插入总胆管并固定，稳定20min开始收集30min的胆汁，作为药前对比值，然后各组大鼠分别由十二指肠给各受试药1ml/100g，给药后分别于30、60、90min量取一次胆汁分泌量，结果给药后软肝丸10g/kg、5g/kg组胆汁分泌量略有下降，但无统计意义，去氧胆酸钠1.0g/kg给药30min胆汁分泌量明显增加。
3 小结
软肝丸对CCl4、D-氨基半乳糖所致大、小鼠急性肝损伤血清中AST、ALT升高有降低作用，对CCl4诱发大鼠的慢性肝损伤于攻毒期动物死亡率明显降低，AST、ALT、PCⅢ、肝羟脯氨酸含量等指标均有降低，组织学检测表明其对抑制肝纤维化组织增生的进一步形成有一定作用，可减轻浊肿、脂肪变性、坏死、炎症；此外尚能抑制迟发超敏反应，增强免疫功能低下小鼠溶血素抗体的生成，降低免疫肝损伤ALT水平的升高，但对大鼠胆汁分泌无影响。
综上认为软肝丸有保肝降酶、抑制肝纤维化组织增生，减轻肝组织浊肿、坏死、炎症等作用。, http://www.100md.com
单位：方素华 何永亮 王红星 廖世平 霍祥高 钟振东 四川省医学科学院 简阳；何光星 胡尧碧 周世清 四川省中药研究所；陈培益 冯永奎 华西肝病研究所
关键词：
四川生理科学杂志990106 陈氏软肝丸是治疗肝纤维化药物。临床应用表明能促进白蛋白合成，纠正A/G比例失调，使肝功能恢复正常，降低门静脉压，抑制肝纤维化，提高机体免疫功能等。本文研究了其主要药效。
1 实验材料
1.1 动物 ICR小鼠、SD大鼠，合格证号医动字24101102和24101101号，由四川省医科院医学实验动物中心提供。昆明种小鼠、C57BL/6J小鼠，合格证医动字24301035号，由四川省中药研究所提供。
, http://www.100md.com
1.2 实验药物 陈氏软肝丸浸膏每克含生药1.4，批号9601108，由四川华西肝病研究所提供。联苯双酯，南京第二药厂产品，批号931001。秋水仙碱(Laboratoyres HOUDE)，批号DEC95。
1.3 试剂 D-氨基半乳糖(重庆医学院产品)，批号951124。四氯化碳(CCl4)(重庆化学试剂厂产品)分析纯，批号950306。印度墨汁(北京西中化工厂产品)，批号950701。
2 实验方法与结果
2.1 对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用 ICR小鼠96只，体重22～24克，雌雄各半，分6组ig给药，每天1次，连续8天，第7天药后8h，除空白对照组外均ip 0.2%CCl4色拉油0.1ml/10g，末次给药1h(即CCl4攻毒16h)，所有动物股动脉放血处死，取血清检测AST、ALT，取肝脏称重。表1结果显示，软肝丸肝脏指数明显为轻，AST、ALT明显为低，表明软肝丸有明显的保肝降酶作用。
, 百拇医药
表1 对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用(
±s) 组 别剂量
(g/kg)
肝脏指数
(g/100g)
AST
(karU)
ALT
(karU)
空白对照
5.38±0.69
, http://www.100md.com
66.4±24.0
66.0±39.6
模型对照
6.14±0.54
349.5±40.4
465.3±38.9
联苯双酯
0.05
6.08±0.61
211.1±43.6**
195.5±45.5**
, 百拇医药
软肝丸
10
5.36±0.74**
169.8±44.2**
173.6±57.1**
软肝丸
5
5.59±0.79*
205.3±53.5**
237.5±74.8**
, http://www.100md.com 软肝丸
2.5
5.33±0.82**
257.8±70.4**
279.8±72.0**
n=16与模型组比较 * P<0.05,** P<0.01
2.2 对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤的保护作用 小鼠分组及给药同上，ip D-氨基半乳糖600mg/kg引起肝损伤。表2结果软肝丸可使肝脏指数明显为小，AST、ALT明显为低，表明软肝丸对D-氨基半乳糖所致小鼠肝损伤有明显保护作用。
表2 对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤的保护作用(
±s) 组 别, http://www.100md.com
剂量
(g/kg)
肝脏指数
(g/100g)
AST
(karU)
ALT
(karU)
空白对照
5.91±0.64
47.6±16.1
54.3±18.0
, http://www.100md.com 模型对照
6.51±1.16
291.3±68.6
288.8±62.1
联苯双酯
0.05
6.19±1.04
148.8±39.1**
223.0±95.0*
软肝丸
10
5.61±0.84*
, 百拇医药
198.3±26.4**
213.3±53.98**
软肝丸
5
5.80±0.61*
208.9±60.3**
180.6±58.1**
软肝丸
2.5
5.67±0.68*
, http://www.100md.com
199.3±29.6**
201.5±74.4**
2.3 对大鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤保护作用 SD大鼠50只雌雄各半，体重170～220克，分6组，ig给药每天1次，连续8天，第7天给药8h，除空白对照组外，其余各组动物均ip D-氨基半乳糖650mg/kg,16h(即第8天末次给药1h)股动脉采血，取血清测AST、ALT，肝脏称重计算肝脏指数，结果见表3，软肝丸有明显的降酶作用。
表3 对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤的保护作用(
±s) 组 别剂量
(g/kg)
, http://www.100md.com
肝脏指数
(g/100g)
AST
(karU)
ALT
(karU)
空白对照
32.33±3.60
107.0±18.33
45.5±14.7
模型对照
46.12±7.05
, 百拇医药
402.0±167.7
568.0±184.7
联苯双酯
0.05
43.71±2.46
302.5±90.0
337.5±169.7**
软肝丸
10
44.36±5.10
362.5±64.0
407.5±108.8*
, 百拇医药
软肝丸
5
43.57±4.61
356.9±96.3
465.6±115.6*
软肝丸
2.5
39.28±4.25*
263.1±113.1*
306.3±105.9**
2.4 对CCl4诱发大鼠肝纤维化的影响 大鼠160～190克雌雄各半，142只分6组，除空白对照组外，其余各组于实验第1天sc 40%CCl4色拉油0.5ml/100g，以后每周分2次皮下注射25%CCl4色拉油0.2ml/100g，连续攻毒40天，第41天开始每天ig受试药液一次，治疗期间继续上法攻毒。每周称体重调整CCl4注射量和给药量。给药30天(即攻毒后70天)，各组取8～12只动物股动脉放血，取血清测AST、ALT、TP、ALB、PCⅢ(125I放免法)；取肝脏称重，取左肝一小块用10%甲醛固定，石腊包埋切片，HE染色，镜检各动物肝组织病变；取肝组织测定羟脯氨酸含量。动物死亡情况见表4，死亡率软肝丸大、中剂量组均较秋水仙碱和模型组显著为低，除秋水仙碱组体重无变化外，其余各组体重略有增长，但各组间比较均无统计学差异。
, 百拇医药
表4 对肝纤维化大鼠死亡的影响 组 别
剂量
(g/kg)
攻毒前
动物(只)
攻毒40天
动物(只)
治疗30天
动物(只)
死亡率
(%)
空白对照
20
, 百拇医药
20
19
(1/20) 5.0
模型对照
25
19
12
(13/25) 52
秋水仙碱
125μg
25
22
8
, 百拇医药
(17/25) 68
软肝丸
10
23
22
21
(2/23) 8.7△△**
软肝丸
5
24
21
19
(5/24) 20.8△△**
, http://www.100md.com
软肝丸
2.5
25
21
14
(11/25) 44.0
与秋水仙碱组相比 △△ P<0.01
肝指数及血清生化检测结果见表5，软肝丸大剂量组ALT与模型组比较有显著性差异，总蛋白和白蛋白变化不明显。
表5 血清生化检测 组 别
动物
(只)
, http://www.100md.com
剂量
(g/kg)
AST
(karU)
ALT
(karU)
TP
(g/L)
ALB
(g/L)
肝指数
(g/100g)
空白对照
, 百拇医药
8
113.8±33.5
29.3±8.03
72.83±8.03
52.18±9.17
3.42±0.51
模型对照
12
190.0±92.3
45.8±29.2
71.51±5.42
48.87±11.35
, 百拇医药
4.32±0.60
秋水仙碱
8
125μg
201.9±86.9
30.6±20.5
67.74±8.68
52.04±15.89
3.99±0.87
软肝丸
10
10
, 百拇医药
156.0±48.8
23.0±14.8
66.51±11.07
56.46±11.28
4.14±0.43
软肝丸
10
5
182.0±45.6
30.5±18.02
67.80±4.29
51.35±10.63
, 百拇医药
4.21±0.86
软肝丸
10
2.5
171.0±77.2
54.0±25.7
60.11±5.36
55.81±14.96
3.94±0.36
病理组织学检测结果见表6，由表6可见软肝丸各剂量组，特别是中剂量组对浊肝、炎症、坏死、脂肪变性均有一定效果。
表6 病理组织学镜检 组 别
, 百拇医药
动物
(只)
剂量
(g/kg)
浊 肿
脂肪变性
坏 死
炎性细胞
纤维组织增生
±
+
, 百拇医药
平均
±
+
平均
±
+
, 百拇医药
平均
±
+
平均
±
+
, 百拇医药
平均
空白对照
8
8
0
0
0
0
8
0
0
0
0
8
, 百拇医药
0
0
0
0
8
0
0
0
0
8
0
0
0
0
, 百拇医药
模型对照
12
0
0
7
5
2.42
0
0
5
7
2.58
0
0
, 百拇医药
6
6
2.50
0
0
6
6
2.5
0
0
4
8
2.67
秋水仙碱
, 百拇医药
8
125μg
0
1
5
2
2.12
0
2
2
4
2.25
0
0
, http://www.100md.com
5
3
2.38
0
2
6
0
1.75
0
0
4
4
2.50
软肝丸
, 百拇医药
10
10
0
1
3
6
2.50
0
2
4
4
2.2
0
0
, http://www.100md.com
4
6
2.40
0
1
7
2
2.1
0
0
4
6
2.6
软肝丸
, http://www.100md.com
10
5
0
1
7
2
2.10
0
1
6
3
2.2
0
0
, http://www.100md.com
6
4
2.4
0
2
6
2
2.0
0
0
4
6
2.6
软肝丸
, 百拇医药
10
2.5
0
0
6
4
2.40
0
0
6
4
2.4
0
0
, http://www.100md.com
6
4
2.4
0
0
7
3
2.3
0
0
3
7
2.7
病理损害程度分4组：“±”表示无或极少病理变化；“+”轻度损害；“
”中度损害，坏死及纤维组织增生；“”重度损害，假小叶形成。, 百拇医药
肝脏羟脯氨酸和PCⅢ测定结果见表7，软肝丸能降低肝脏羟脯氨酸和PCⅢ的含量。
表7 对肝脏羟脯氨酸、血清PCⅢ的影响(
±s) 组 别动物
(只)
剂量
(g/kg)
肝羟脯氨酸含量
(mg/干重)
PCⅢ
(μg/L)
, http://www.100md.com
空白对照
8
39.79±2.90
16.31±5.87
模型对照
12
55.95±15.01
26.00±7.73
秋水仙碱
8
125μg
46.78±8.84
, http://www.100md.com 20.00±2.52
软肝丸
10
10
36.01±14.17**
14.95±6.67**
软肝丸
10
5
37.18±3.29**
17.70±3.38**
, http://www.100md.com
软肝丸
10
2.5
44.02±8.10*
18.70±9.05*
2.5 对巨噬细胞吞噬功能的影响 昆明种小鼠50只雌雄各半分5组，ig给药连续4天，末次给药后45min尾iv印度墨汁0.1ml/kg，注射后30s和11min从眼眶取血20μl，加入0.1% Na2CO3溶液2ml中，650nm测定OD值，计算吞噬指数K，结果对照组为0.0346±0.0086，软肝丸1、3、9g/kg分别为0.0442±0.0099(P<0.05)、0.0363±0.0064和0.0349±0.0058，云芝多糖50mg/kg ip为0.0471±0.0101(P<0.01)。
, 百拇医药
2.6 对迟发型超敏反应的影响 昆明种小鼠50只分5组，ig给药每日1次，首次给药后24h于每鼠颈背部sc 0.6%DNCB丙酮麻油液30μl，两天后重复致敏1次。连续给药8天后以1%DNCB丙酮麻油液20μl均匀涂于小鼠左耳，16h后处死，用8mm打孔器取下左右耳片，精密扭力天平称重，以二者重量差的mg数表示迟发超敏反应强度，结果对照为3.64±0.69，软肝丸1、3、9g/kg分别为4.64±1.77、2.98±1.04和2.60±0.65(P<0.05)，强的松25mg/kg为2.07±1.24(P<0.01)，表明大剂量软肝丸能明显抑制小鼠迟发型超敏反应。
2.7 对鸡红细胞所致溶血素抗体生成的影响 昆明种小鼠60只雌雄各半，分6组，ig给药，在给药第2天起用环磷酰胺(Cy) ip 20mg/kg间日1次造成免疫功能低下，在给药第3天时每鼠ip 2%鸡红细胞0.2ml/20g免疫，并继续给药，于免疫后7日每鼠眼眶取血20μl测HC50(OD值)，结果对照组为345±242，Cy组为36.9±16.9，Cy加软肝丸1、3、9g/kg分别为50±33、56±31及65±41，Cy加人参皂甙(ip 60mg/kg)为85±35，后二组与Cy组相比P值小于0.05。表明软肝丸大剂量和人参皂甙均能显著增加环磷酰胺造成免疫功能低下的小鼠溶血素抗体的生成。
, http://www.100md.com
2.8 对免疫性肝损伤的影响 C57BL/6J小鼠60只雌雄各半，分6组，ig给药每天1次，预防给药2d时剪去小鼠腹毛，将1%的DNCB丙酮麻油液30μl涂于腹部致敏，3天后同法加强1次，于末次致敏后6d，用2%DNCB 20μl进行肝穿刺诱发DTH反应(诱发肝损伤)，攻击18h后取血测定血清ALT的活性(u/dl)，结果正常对照组为43.7±5.2，模型组为133±38，软肝丸1、3、9g/kg分别为102±33.9、78.4±18.7(P<0.01)和87.6±41.5(P<0.05)，而强的松25mg/kg为65.7±20.2，表明小鼠肝脏诱发的DTH模型ALT水平显著升高，软肝丸3g/kg、9g/kg组血清中ALT明显低于模型组，说明软肝丸对免疫性肝损伤有保护作用。
2.9 对大鼠胆汁分泌的影响 雄大鼠32只，体重226.8±25.7克，分4组，实验前12h禁食不禁水。实验时ig生理盐水1ml/100g，ip 30mg/kg戊巴比妥钠麻醉，大鼠仰位固定，腹部正中切口2厘米，找到总胆管，将导管插入总胆管并固定，稳定20min开始收集30min的胆汁，作为药前对比值，然后各组大鼠分别由十二指肠给各受试药1ml/100g，给药后分别于30、60、90min量取一次胆汁分泌量，结果给药后软肝丸10g/kg、5g/kg组胆汁分泌量略有下降，但无统计意义，去氧胆酸钠1.0g/kg给药30min胆汁分泌量明显增加。
3 小结
软肝丸对CCl4、D-氨基半乳糖所致大、小鼠急性肝损伤血清中AST、ALT升高有降低作用，对CCl4诱发大鼠的慢性肝损伤于攻毒期动物死亡率明显降低，AST、ALT、PCⅢ、肝羟脯氨酸含量等指标均有降低，组织学检测表明其对抑制肝纤维化组织增生的进一步形成有一定作用，可减轻浊肿、脂肪变性、坏死、炎症；此外尚能抑制迟发超敏反应，增强免疫功能低下小鼠溶血素抗体的生成，降低免疫肝损伤ALT水平的升高，但对大鼠胆汁分泌无影响。
综上认为软肝丸有保肝降酶、抑制肝纤维化组织增生，减轻肝组织浊肿、坏死、炎症等作用。, http://www.100md.com