筋骨宁搽剂对小鼠实验性微循环障碍的影响
作者：刘剑刚1 许秀森1 崔艳英2 李 璐2
单位：1 中国中医研究院西苑医院, 邮政编码 北京100091； 1 中国医药研究开发中心
关键词：筋骨宁搽剂/中药；肾上腺素；微循环, 耳廓；小鼠
筋骨宁搽剂对小鼠实验性微循环障碍的影响
为观察筋骨宁搽剂对小鼠实验性微循环障碍的作用, 应用肾上腺素造成小鼠微循环障碍血瘀证模型模拟应激, 肾上腺素造成广泛的微动脉收缩、 血流减慢或停止。 造成模型后, 观察筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微循环的影响。 结果表明筋骨宁搽剂对肾上腺素造成的小鼠微动脉收缩有抑制作用, 并抑制血流的减慢, 使血流状态得到改善, 并可扩张血管、 促进血流, 对用肾上腺素引起的微循环障碍有良好的预防和改善的作用。
, 百拇医药
Effect on Jinguning Lotion in Rats Auricle with Experimental Distubance of Microcirculation/
Liu Jiangang, Xu Xiusen, Cui Yanying, et al
Xiyuan Hospital, China Academy of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100091
Jinguning lotion is compostion of the repies to active blood circulation and remove stasis traditional Chinese herbs. To study the effects of Jinguning on experimental distubance of microcirculation. Using the inject adrenaline into abdominal cavity of rat, simulated test of contingency, bring about widespread for vasocontraction of arteriole, blood flow has stopped or weakend cavity, it postponed for blood flow has stopped or weakend of rats auricle. put the Jinguning lotion on rats auricle, the ratio of recover from diameter of rats blood vessel was better than control group. The results showed that the Jinguning lotion can markedly improved disturbance of the rats auricles microcirulation.
, 百拇医药
Key words:Jinguning lotion/traditional Chinese medicine; Adrenaline; Microcirulation, auricle; Rat
筋骨宁搽剂是以活血化瘀为治则, 由红花、 元胡、 鸡血藤等活血化瘀、 消肿止痛药配制而成的中药复方制剂。 临床用于治疗软组织损伤、 骨质增生所引起的肿胀、 疼痛等症, 为进一步探讨该药对皮肤微循环的影响, 我们应用肾上腺素造成小鼠实验性微循环障碍模型, 观察筋骨宁搽剂的药理作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物
实验用昆明种小鼠40只, 体重18～22 g, 雌雄各半, 由北京医科大学实验动物科学部提供, 动物合格证号: 医动字01-3049。
, http://www.100md.com 1.2 实验药物
(1) 筋骨宁搽剂: 由中国医药研究开发中心提供, 批号: 960627。 (2) 骨友灵搽剂: 由辽宁省本溪市第三制药厂生产, 批号: 940801。 (3) 肾上腺素: 由北京制药厂生产, 批号: 9612021。
1.3 实验方法
小鼠共40只, 实验分为四组, 每组各用动物10只。 (1) 生理盐水对照组: 0.9% NaCl注射液; (2) 阳性药物对照组: 骨友灵搽剂[1.0 g(生药)/ml]; (3) 筋骨宁搽剂: 大剂量组[0.6 g(生药)/ml]; (4) 筋骨宁搽剂: 小剂量组[0.2 g(生药)/ml]。
小鼠以10%氨基甲酸乙酯0.018 ml/g(体重)腹腔麻醉, 然后将小白鼠侧卧于玻璃板上, 耳廓涂液体石蜡, 轻轻固定于玻璃板上, 置SONY显微电视录像系统下观察, 实验过程用录像磁带记录。 观察血液及用镜下标尺测量血管管径, 实验后统一换算成μm。 每组测定记录给药前的管径、 血流情况, 腹腔注射肾上腺素1 μg/g(体重), 观察小鼠耳廓血流及微动脉血管变化, 10 min后, 在耳廓上局部涂筋骨宁搽剂0.2 ml, 观察15 min内血管管径及血流恢复时间, 阳性药对照组用骨友灵搽剂, 模型组用生理盐水代替筋骨宁搽剂, 其余方法相同[1]。
, 百拇医药
实验室温度为25 ℃。
1.4 评判标准
血流速度共分五级: 0级, 微血管可见, 但无血液细胞通过; Ⅰ级, 微血管内可见血细胞, 有时出现血细胞聚集成团, 数量较少, 逐渐向前推进, 时停时进; Ⅱ级, 微血管内血细胞充满管腔, 慢慢向前流动; Ⅲ级, 血细胞充满管腔, 流动呈线型, 但镜下可分出流动中的血细胞; Ⅳ级, 微血管中血细胞分辨不出来, 流动极快[2]。
实验统计采用LKAT统计软件包, t检验法, 在IBM PC计算机上进行统计。
2 结 果
2.1 筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微循环微动脉血管管径的影响
结果见表1、 2, 四组的小鼠注射肾上腺素前, 微动脉和微静脉管径均无明显差异。 注射肾上腺素后, 微动脉管径均显著收缩, 与注射肾上腺素前比较有非常显著差异(P<0.01); 涂抹筋骨宁搽剂后, 管径开始恢复, 15 min时测量血管管径, 筋骨宁搽剂大、 小剂量明显好于生理盐水对照组(P<0.01)。 筋骨宁搽剂大剂量组还具有一定的扩张血管作用, 但经统计学处理尚不显著。
, 百拇医药
表 1 筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微动脉血管
管径的影响(n均=10,
±s)
组 别
管径(μm)
给药前
注射肾上
腺素后
给药15 min时
生理盐水组
12.85±0.82
, http://www.100md.com
7.15±0.641)
6.54±0.55
骨友灵组
11.62±0.94
6.54±0.711)
12.23±0.382)
筋骨宁大剂量组
12.70±0.90
7.40±0.591)
13.47±0.542)
, 百拇医药
筋骨宁小剂量组
12.02±0.84
7.10±0.421)
11.47±0.622)
注: 1) 与注射肾上腺素前比较: P<0.01; 2) 与生理盐水组比较: P<0.01 表 2 筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微静脉血管
管径的影响(n均=10,±s)
组 别
, 百拇医药
管径(μm)
给药前
注射肾上
腺素后
给药15 min时
生理盐水组
34.45±5.23
22.14±6.221)
23.81±5.78
骨友灵组
35.79±4.33
23.67±4.381)
, http://www.100md.com
32.62±6.102)
筋骨宁大剂量组
34.56±4.83
24.24±6.421)
36.31±5.192)
筋骨宁小剂量组
33.47±4.91
24.23±7.311)
31.38±7.972)
注: 1) 与注射肾上腺素前比较: P<0.01; 2) 与生理盐水组比较: P<0.01
, 百拇医药
四组的小鼠注射肾上腺素后, 微静脉管径也均显著收缩, 与注射肾上腺素前比较有非常显著差异(P<0.01), 涂抹筋骨宁搽剂后, 管径开始恢复, 15 min时测量血管管径, 筋骨宁搽剂大、 小剂量明显好于生理盐水对照组(P<0.01)。
阳性药骨友灵也显示出良好的作用, 与生理盐水组比较, 微动脉与微静脉的管径明显好转(P均<0.01)。
2.2 筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微循环血流速度和管径恢复时间的影响
结果见表3、4,注射肾上腺素前,四组小鼠的耳廓微循环血流状态无显著差异。注射肾上腺素后,血流状态均显著变慢、血细胞团聚;涂抹筋骨宁搽剂后,血流开始恢复,血流恢复时间和血管管径恢复时间与涂抹生理盐水组相比明显缩短(P<0.01)。
表 3 注射肾上腺素(Ad)后筋骨宁搽剂对血流
, http://www.100md.com
与血管管径的影响(n均=10,±s)
组 别
注射Ad后 血流变慢或
停止时间(s)
注射Ad后
管径开始收
缩时间(s)
给药后血
流恢复
时间(s)
, 百拇医药
给药后管
径恢复
时间(s)
生理盐水组
246.00±
75.49
162.50±
48.07
627.49±
43.10
525.95±
45.47
骨友灵组
, http://www.100md.com
224.50±
68.87
152.70±
29.50
229.02±
33.501)
226.08±
43.981)
筋骨宁
大剂量组
262.92±
33.70
, 百拇医药
164.52±
31.30
227.33±
44.381)
241.36±
36.651)
筋骨宁
小剂量组
218.32±
45.16
157.13±
29.24
, http://www.100md.com
232.45±
34.151)
224.56±
39.121)
注: 1) 与生理盐水组比较: P<0.01
注射肾上腺素前, 四组小鼠的耳廓微循环血流速度分级无显著差异。 注射肾上腺素后, 血流状态均显著变慢、 血细胞团聚; 涂抹筋骨宁搽剂后, 血流开始恢复, 15 min时血流分级数和涂抹生理盐水组相比明显好转(P<0.01)。
阳性药骨友灵具有同样的作用, 与生理盐水组比较, 血流速度和管径恢复时间的明显缩短(P均<0.01)。
表 4 筋骨宁搽剂对血流速度的影响(n均=10)
, 百拇医药
组 别
分级(n)
给药前
给药后
0
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
0
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
, http://www.100md.com
生理盐水组
2
8
3
7
骨友灵组
1
9
2
2
5
12)
筋骨宁大剂量组
, 百拇医药
1
1
8
1
2
5
22)
筋骨宁小剂量组
2
8
2
3
51)
, 百拇医药
注: 与生理盐水组比较: 1) P<0.05, 2) P<0.01 3 讨 论
应用肾上腺素给小鼠腹腔注射形成微循环障碍, 表现为血流减慢、 血细胞团聚、 血管管径收缩, 造成了血瘀证动物模型。 对照组小鼠耳廓涂抹生理盐水后, 血流速度、 血细胞团聚、 血管管径收缩均未见好转; 而涂抹筋骨宁搽剂后, 小鼠耳廓血管管径开始恢复, 管径恢复正常时间缩短, 血细胞团聚减轻, 血流速度恢复时间较快。 这一结果提示筋骨宁搽剂可轻度扩张血管、 促进血流, 对应用肾上腺素引起的微循环障碍有良好的预防和改善作用。
《素问
阴阳应象大论》认为:“气伤痛, 形伤肿(瘀血)”, 并提出“在外以筋骨受伤多见, 在内以气滞血瘀为主”, 筋骨宁搽剂以花为君药, 辅佐以鸡血藤、 元胡为主要成分, 活血化瘀、 通经走络。 红花具有破瘀活血、 通经止痛的作用, 现代研究表明红花含有红花黄花素、 红花甙、 脂肪油, 具有明显消除肾上腺素及去甲肾上腺素收缩外周血管的功能, 还具有镇痛、 抗炎的药理作用。 元胡的主要成分为生物碱, 具有镇痛、 镇静、 抗菌的功效[3]。 本实验进一步证明由红花、 鸡血藤、 元胡等配伍而成的筋骨宁搽剂对肾上腺素造成小鼠微动脉收缩具有抑制作用, 并可抑制血流减慢, 使血流状态得到改善, 血细胞团聚得到缓解, 亦表明筋骨宁搽剂是通过改善微循环从而起到治疗作用。
参考文献
1.刘剑刚, 崔晶, 刘昭强, 等. 宽心止痛膏对实验性微循环障碍的作用. 微循环学杂志, 1994, 5(2):43.
2.陈奇主编.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1993. 1 134.
3.陈可冀, 张之南, 梁子钧, 等主编. 血瘀证与活血化瘀研究. 上海: 上海科学技术出版社, 1990. 539～578.
收稿日期：本文1998-09-30收到,1999-01-22接受, 百拇医药(刘剑刚1 许秀森1 崔艳英2 李 璐2)
单位：1 中国中医研究院西苑医院, 邮政编码 北京100091； 1 中国医药研究开发中心
关键词：筋骨宁搽剂/中药；肾上腺素；微循环, 耳廓；小鼠
筋骨宁搽剂对小鼠实验性微循环障碍的影响
为观察筋骨宁搽剂对小鼠实验性微循环障碍的作用, 应用肾上腺素造成小鼠微循环障碍血瘀证模型模拟应激, 肾上腺素造成广泛的微动脉收缩、 血流减慢或停止。 造成模型后, 观察筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微循环的影响。 结果表明筋骨宁搽剂对肾上腺素造成的小鼠微动脉收缩有抑制作用, 并抑制血流的减慢, 使血流状态得到改善, 并可扩张血管、 促进血流, 对用肾上腺素引起的微循环障碍有良好的预防和改善的作用。
, 百拇医药
Effect on Jinguning Lotion in Rats Auricle with Experimental Distubance of Microcirculation/
Liu Jiangang, Xu Xiusen, Cui Yanying, et al
Xiyuan Hospital, China Academy of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100091
Jinguning lotion is compostion of the repies to active blood circulation and remove stasis traditional Chinese herbs. To study the effects of Jinguning on experimental distubance of microcirculation. Using the inject adrenaline into abdominal cavity of rat, simulated test of contingency, bring about widespread for vasocontraction of arteriole, blood flow has stopped or weakend cavity, it postponed for blood flow has stopped or weakend of rats auricle. put the Jinguning lotion on rats auricle, the ratio of recover from diameter of rats blood vessel was better than control group. The results showed that the Jinguning lotion can markedly improved disturbance of the rats auricles microcirulation.
, 百拇医药
Key words:Jinguning lotion/traditional Chinese medicine; Adrenaline; Microcirulation, auricle; Rat
筋骨宁搽剂是以活血化瘀为治则, 由红花、 元胡、 鸡血藤等活血化瘀、 消肿止痛药配制而成的中药复方制剂。 临床用于治疗软组织损伤、 骨质增生所引起的肿胀、 疼痛等症, 为进一步探讨该药对皮肤微循环的影响, 我们应用肾上腺素造成小鼠实验性微循环障碍模型, 观察筋骨宁搽剂的药理作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物
实验用昆明种小鼠40只, 体重18～22 g, 雌雄各半, 由北京医科大学实验动物科学部提供, 动物合格证号: 医动字01-3049。
, http://www.100md.com 1.2 实验药物
(1) 筋骨宁搽剂: 由中国医药研究开发中心提供, 批号: 960627。 (2) 骨友灵搽剂: 由辽宁省本溪市第三制药厂生产, 批号: 940801。 (3) 肾上腺素: 由北京制药厂生产, 批号: 9612021。
1.3 实验方法
小鼠共40只, 实验分为四组, 每组各用动物10只。 (1) 生理盐水对照组: 0.9% NaCl注射液; (2) 阳性药物对照组: 骨友灵搽剂[1.0 g(生药)/ml]; (3) 筋骨宁搽剂: 大剂量组[0.6 g(生药)/ml]; (4) 筋骨宁搽剂: 小剂量组[0.2 g(生药)/ml]。
小鼠以10%氨基甲酸乙酯0.018 ml/g(体重)腹腔麻醉, 然后将小白鼠侧卧于玻璃板上, 耳廓涂液体石蜡, 轻轻固定于玻璃板上, 置SONY显微电视录像系统下观察, 实验过程用录像磁带记录。 观察血液及用镜下标尺测量血管管径, 实验后统一换算成μm。 每组测定记录给药前的管径、 血流情况, 腹腔注射肾上腺素1 μg/g(体重), 观察小鼠耳廓血流及微动脉血管变化, 10 min后, 在耳廓上局部涂筋骨宁搽剂0.2 ml, 观察15 min内血管管径及血流恢复时间, 阳性药对照组用骨友灵搽剂, 模型组用生理盐水代替筋骨宁搽剂, 其余方法相同[1]。
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实验室温度为25 ℃。
1.4 评判标准
血流速度共分五级: 0级, 微血管可见, 但无血液细胞通过; Ⅰ级, 微血管内可见血细胞, 有时出现血细胞聚集成团, 数量较少, 逐渐向前推进, 时停时进; Ⅱ级, 微血管内血细胞充满管腔, 慢慢向前流动; Ⅲ级, 血细胞充满管腔, 流动呈线型, 但镜下可分出流动中的血细胞; Ⅳ级, 微血管中血细胞分辨不出来, 流动极快[2]。
实验统计采用LKAT统计软件包, t检验法, 在IBM PC计算机上进行统计。
2 结 果
2.1 筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微循环微动脉血管管径的影响
结果见表1、 2, 四组的小鼠注射肾上腺素前, 微动脉和微静脉管径均无明显差异。 注射肾上腺素后, 微动脉管径均显著收缩, 与注射肾上腺素前比较有非常显著差异(P<0.01); 涂抹筋骨宁搽剂后, 管径开始恢复, 15 min时测量血管管径, 筋骨宁搽剂大、 小剂量明显好于生理盐水对照组(P<0.01)。 筋骨宁搽剂大剂量组还具有一定的扩张血管作用, 但经统计学处理尚不显著。
, 百拇医药
表 1 筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微动脉血管
管径的影响(n均=10,
±s)组 别
管径(μm)
给药前
注射肾上
腺素后
给药15 min时
生理盐水组
12.85±0.82
, http://www.100md.com
7.15±0.641)
6.54±0.55
骨友灵组
11.62±0.94
6.54±0.711)
12.23±0.382)
筋骨宁大剂量组
12.70±0.90
7.40±0.591)
13.47±0.542)
, 百拇医药
筋骨宁小剂量组
12.02±0.84
7.10±0.421)
11.47±0.622)
注: 1) 与注射肾上腺素前比较: P<0.01; 2) 与生理盐水组比较: P<0.01 表 2 筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微静脉血管
管径的影响(n均=10,
±s)组 别
, 百拇医药
管径(μm)
给药前
注射肾上
腺素后
给药15 min时
生理盐水组
34.45±5.23
22.14±6.221)
23.81±5.78
骨友灵组
35.79±4.33
23.67±4.381)
, http://www.100md.com
32.62±6.102)
筋骨宁大剂量组
34.56±4.83
24.24±6.421)
36.31±5.192)
筋骨宁小剂量组
33.47±4.91
24.23±7.311)
31.38±7.972)
注: 1) 与注射肾上腺素前比较: P<0.01; 2) 与生理盐水组比较: P<0.01
, 百拇医药
四组的小鼠注射肾上腺素后, 微静脉管径也均显著收缩, 与注射肾上腺素前比较有非常显著差异(P<0.01), 涂抹筋骨宁搽剂后, 管径开始恢复, 15 min时测量血管管径, 筋骨宁搽剂大、 小剂量明显好于生理盐水对照组(P<0.01)。
阳性药骨友灵也显示出良好的作用, 与生理盐水组比较, 微动脉与微静脉的管径明显好转(P均<0.01)。
2.2 筋骨宁搽剂对小鼠耳廓微循环血流速度和管径恢复时间的影响
结果见表3、4,注射肾上腺素前,四组小鼠的耳廓微循环血流状态无显著差异。注射肾上腺素后,血流状态均显著变慢、血细胞团聚;涂抹筋骨宁搽剂后,血流开始恢复,血流恢复时间和血管管径恢复时间与涂抹生理盐水组相比明显缩短(P<0.01)。
表 3 注射肾上腺素(Ad)后筋骨宁搽剂对血流
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与血管管径的影响(n均=10,
±s)组 别
注射Ad后 血流变慢或
停止时间(s)
注射Ad后
管径开始收
缩时间(s)
给药后血
流恢复
时间(s)
, 百拇医药
给药后管
径恢复
时间(s)
生理盐水组
246.00±
75.49
162.50±
48.07
627.49±
43.10
525.95±
45.47
骨友灵组
, http://www.100md.com
224.50±
68.87
152.70±
29.50
229.02±
33.501)
226.08±
43.981)
筋骨宁
大剂量组
262.92±
33.70
, 百拇医药
164.52±
31.30
227.33±
44.381)
241.36±
36.651)
筋骨宁
小剂量组
218.32±
45.16
157.13±
29.24
, http://www.100md.com
232.45±
34.151)
224.56±
39.121)
注: 1) 与生理盐水组比较: P<0.01
注射肾上腺素前, 四组小鼠的耳廓微循环血流速度分级无显著差异。 注射肾上腺素后, 血流状态均显著变慢、 血细胞团聚; 涂抹筋骨宁搽剂后, 血流开始恢复, 15 min时血流分级数和涂抹生理盐水组相比明显好转(P<0.01)。
阳性药骨友灵具有同样的作用, 与生理盐水组比较, 血流速度和管径恢复时间的明显缩短(P均<0.01)。
表 4 筋骨宁搽剂对血流速度的影响(n均=10)
, 百拇医药
组 别
分级(n)
给药前
给药后
0
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
0
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
, http://www.100md.com
生理盐水组
2
8
3
7
骨友灵组
1
9
2
2
5
12)
筋骨宁大剂量组
, 百拇医药
1
1
8
1
2
5
22)
筋骨宁小剂量组
2
8
2
3
51)
, 百拇医药
注: 与生理盐水组比较: 1) P<0.05, 2) P<0.01 3 讨 论
应用肾上腺素给小鼠腹腔注射形成微循环障碍, 表现为血流减慢、 血细胞团聚、 血管管径收缩, 造成了血瘀证动物模型。 对照组小鼠耳廓涂抹生理盐水后, 血流速度、 血细胞团聚、 血管管径收缩均未见好转; 而涂抹筋骨宁搽剂后, 小鼠耳廓血管管径开始恢复, 管径恢复正常时间缩短, 血细胞团聚减轻, 血流速度恢复时间较快。 这一结果提示筋骨宁搽剂可轻度扩张血管、 促进血流, 对应用肾上腺素引起的微循环障碍有良好的预防和改善作用。
《素问
阴阳应象大论》认为:“气伤痛, 形伤肿(瘀血)”, 并提出“在外以筋骨受伤多见, 在内以气滞血瘀为主”, 筋骨宁搽剂以花为君药, 辅佐以鸡血藤、 元胡为主要成分, 活血化瘀、 通经走络。 红花具有破瘀活血、 通经止痛的作用, 现代研究表明红花含有红花黄花素、 红花甙、 脂肪油, 具有明显消除肾上腺素及去甲肾上腺素收缩外周血管的功能, 还具有镇痛、 抗炎的药理作用。 元胡的主要成分为生物碱, 具有镇痛、 镇静、 抗菌的功效[3]。 本实验进一步证明由红花、 鸡血藤、 元胡等配伍而成的筋骨宁搽剂对肾上腺素造成小鼠微动脉收缩具有抑制作用, 并可抑制血流减慢, 使血流状态得到改善, 血细胞团聚得到缓解, 亦表明筋骨宁搽剂是通过改善微循环从而起到治疗作用。参考文献
1.刘剑刚, 崔晶, 刘昭强, 等. 宽心止痛膏对实验性微循环障碍的作用. 微循环学杂志, 1994, 5(2):43.
2.陈奇主编.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1993. 1 134.
3.陈可冀, 张之南, 梁子钧, 等主编. 血瘀证与活血化瘀研究. 上海: 上海科学技术出版社, 1990. 539～578.
收稿日期：本文1998-09-30收到,1999-01-22接受, 百拇医药(刘剑刚1 许秀森1 崔艳英2 李 璐2)