DNA图像定量分析对星形胶质细胞瘤的预后判定
作者：王占祥 章翔 易声禹 张传山 晏培松 张志文
单位：第四军医大学西京医院，西安710032
关键词：
基础医学与临床990519 星形细胞瘤的病理形态表现复杂，仅从形态学角度判断预后较困难。本研究采用定量图像分析和流式细胞光度术，对80例星形细胞瘤的保留标本进行了DNA定量分析，辅以对患者临床资料的随访调查，以探讨星形细胞瘤的DNA含量与其预后的相关性。
1 材料与方法
1.材料：石蜡包埋瘤组织80例，男49例，女31例；年龄23～72岁；肿瘤位于大脑半球56例，小脑13例，其余部位11例，正常对照10例。2.FCM检测：50μm厚切片脱蜡水化后胃蛋白酶作用，然后过滤、离心调整单个细胞数在2×105/mL，RNA酶作用30min，溴化乙锭染色，然后流式细胞仪定量检测DNA含量，并计算DNA指数(DI)和细胞增殖指数(PI)。3.QFIA检测：5μm厚切片行Feulgen染色，进行图像分析，每张片子随机测定100个肿瘤细胞，同时测定50个间质淋巴细胞作为二倍体对照。4.80例中先后对53例病人进行了2～10年随访，t检验进行统计学分析。
, http://www.100md.com
2 结果
1.星形细胞瘤分级与FCM分析结果及DNA倍性的关系(见表1)。2.患者存活时间与DI、PI值的关系(见表2)。3.患者复发状况与DNA倍性的关系(见表3)。
表1 星形细胞瘤分级与DI、PI值及DNA倍性的关系
Table1 Correlations between grade of astrocytoma and DI, PI and ploidy of DNA
Grade
n
DI
PI
Diploid
, 百拇医药
Aneuploid
Percent of Aneuploid
Ⅰ
18
1.08±0.12
36.2±4.87
8
10
55.56
Ⅱ
23
1.10±0.14
, http://www.100md.com 39.8±5.14
10
13
56.52
Ⅲ
22
1.39±0.18*
49.7±6.08*
5
17
77.27*
Ⅳ
, 百拇医药
17
1.41±0.17*
51.2±6.72*
3
14
82.35*
*P<0.01,compared with grade Ⅰand Ⅱ.
表2 DI、PI值与术后存活时间及病理分级的关系
Table2 Correlations between grade of astrocytoma and DI, PI and survival time
, http://www.100md.com
Grade
n
DI
PI
Survival time(month)
Ⅰ
14
1.18±0.11
37.24±3.20
71.40±23.18
Ⅱ
19
1.20±0.08
, http://www.100md.com
39.71±4.27
64.17±20.42
Ⅲ
12
1.37±1.10*
48.20±5.78*
21.87±15.62*
Ⅳ
8
1.39±0.12*
51.00±7.01*
, http://www.100md.com
19.88±14.17*
*P<0.01,compared with grade Ⅰand Ⅱ.
表3 复发况状与DNA倍性及病理学分极的关系
Table3 Correlations between grade of astrocytoma and ploidy of DNA and recurrence
Situation of recurrence
Diploid
Aneuplid
Ⅰ
Ⅱ
, 百拇医药
Ⅲ
Ⅳ
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Surival and no recurrence
87
6
0
0
2
3
, http://www.100md.com
0
0
Survival and recurrence
1
4
4
1
7
10
8
5
Death and no recurrence
0
, 百拇医药
0
0
0
0
0
0
0
Death and recurrence
0
0
1
2
0
, 百拇医药 0
1
9
3 讨论
随星形细胞瘤病理分级的增加，DI、PI值及异倍体发生率亦增加，而患者生存时间则明显缩短；各级二倍体肿瘤的预后均优于异倍体，高分极的异倍体肿瘤预后最差，死亡率明显较其它组别高。结合以往研究结果，我们认为：DNA倍性及DNA的DI、PI值不失为一种实用的预测星形细胞瘤复发机率的参数，如将组织病理学与DNA测定综合运用，无疑是对星形细胞瘤生物学特征更为精确的描述。分级高的星形细胞瘤在病理学、细胞学及DNA分析结果等方面的相关性较分级低者好，提示DNA分析的预后价值更适用于临床上分期分级较高的肿瘤。
对患者复发前后的观察发现，一般在星形细胞瘤复发后DNA含量偏离二倍体程度增加，细胞分化程度更差，表现为组织病理学分级的增高。结合实际随访结果我们认为，对于二倍体的低级星形细胞瘤，可在严密随访的前提下给予适度的手术切除(不应影响功能活动)，辅以全身或局部放化疗，可望有较好的疗效和预后；而对于异倍体星形细胞瘤，DNA测定能够提供更重要的信息，异倍体肿瘤中分级较高者，在初次治疗时即给予根治性手术切除，可以延长生存时间，减少复发后对患者的重复手术治疗。同时对于初次诊治时已有浸润的分级较高的星形胶质细胞瘤患者，可以利用DNA测定判断哪些患者可望有较好的治疗效果。, 百拇医药
单位：第四军医大学西京医院，西安710032
关键词：
基础医学与临床990519 星形细胞瘤的病理形态表现复杂，仅从形态学角度判断预后较困难。本研究采用定量图像分析和流式细胞光度术，对80例星形细胞瘤的保留标本进行了DNA定量分析，辅以对患者临床资料的随访调查，以探讨星形细胞瘤的DNA含量与其预后的相关性。
1 材料与方法
1.材料：石蜡包埋瘤组织80例，男49例，女31例；年龄23～72岁；肿瘤位于大脑半球56例，小脑13例，其余部位11例，正常对照10例。2.FCM检测：50μm厚切片脱蜡水化后胃蛋白酶作用，然后过滤、离心调整单个细胞数在2×105/mL，RNA酶作用30min，溴化乙锭染色，然后流式细胞仪定量检测DNA含量，并计算DNA指数(DI)和细胞增殖指数(PI)。3.QFIA检测：5μm厚切片行Feulgen染色，进行图像分析，每张片子随机测定100个肿瘤细胞，同时测定50个间质淋巴细胞作为二倍体对照。4.80例中先后对53例病人进行了2～10年随访，t检验进行统计学分析。
, http://www.100md.com
2 结果
1.星形细胞瘤分级与FCM分析结果及DNA倍性的关系(见表1)。2.患者存活时间与DI、PI值的关系(见表2)。3.患者复发状况与DNA倍性的关系(见表3)。
表1 星形细胞瘤分级与DI、PI值及DNA倍性的关系
Table1 Correlations between grade of astrocytoma and DI, PI and ploidy of DNA
Grade
n
DI
PI
Diploid
, 百拇医药
Aneuploid
Percent of Aneuploid
Ⅰ
18
1.08±0.12
36.2±4.87
8
10
55.56
Ⅱ
23
1.10±0.14
, http://www.100md.com 39.8±5.14
10
13
56.52
Ⅲ
22
1.39±0.18*
49.7±6.08*
5
17
77.27*
Ⅳ
, 百拇医药
17
1.41±0.17*
51.2±6.72*
3
14
82.35*
*P<0.01,compared with grade Ⅰand Ⅱ.
表2 DI、PI值与术后存活时间及病理分级的关系
Table2 Correlations between grade of astrocytoma and DI, PI and survival time
, http://www.100md.com
Grade
n
DI
PI
Survival time(month)
Ⅰ
14
1.18±0.11
37.24±3.20
71.40±23.18
Ⅱ
19
1.20±0.08
, http://www.100md.com
39.71±4.27
64.17±20.42
Ⅲ
12
1.37±1.10*
48.20±5.78*
21.87±15.62*
Ⅳ
8
1.39±0.12*
51.00±7.01*
, http://www.100md.com
19.88±14.17*
*P<0.01,compared with grade Ⅰand Ⅱ.
表3 复发况状与DNA倍性及病理学分极的关系
Table3 Correlations between grade of astrocytoma and ploidy of DNA and recurrence
Situation of recurrence
Diploid
Aneuplid
Ⅰ
Ⅱ
, 百拇医药
Ⅲ
Ⅳ
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Surival and no recurrence
87
6
0
0
2
3
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0
0
Survival and recurrence
1
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4
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10
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Death and no recurrence
0
, 百拇医药
0
0
0
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Death and recurrence
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, 百拇医药 0
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9
3 讨论
随星形细胞瘤病理分级的增加，DI、PI值及异倍体发生率亦增加，而患者生存时间则明显缩短；各级二倍体肿瘤的预后均优于异倍体，高分极的异倍体肿瘤预后最差，死亡率明显较其它组别高。结合以往研究结果，我们认为：DNA倍性及DNA的DI、PI值不失为一种实用的预测星形细胞瘤复发机率的参数，如将组织病理学与DNA测定综合运用，无疑是对星形细胞瘤生物学特征更为精确的描述。分级高的星形细胞瘤在病理学、细胞学及DNA分析结果等方面的相关性较分级低者好，提示DNA分析的预后价值更适用于临床上分期分级较高的肿瘤。
对患者复发前后的观察发现，一般在星形细胞瘤复发后DNA含量偏离二倍体程度增加，细胞分化程度更差，表现为组织病理学分级的增高。结合实际随访结果我们认为，对于二倍体的低级星形细胞瘤，可在严密随访的前提下给予适度的手术切除(不应影响功能活动)，辅以全身或局部放化疗，可望有较好的疗效和预后；而对于异倍体星形细胞瘤，DNA测定能够提供更重要的信息，异倍体肿瘤中分级较高者，在初次治疗时即给予根治性手术切除，可以延长生存时间，减少复发后对患者的重复手术治疗。同时对于初次诊治时已有浸润的分级较高的星形胶质细胞瘤患者，可以利用DNA测定判断哪些患者可望有较好的治疗效果。, 百拇医药