17β-雌二醇对低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响
作者：马丽萍 张国元 吴宗贵 侯健 丁思奇
单位：马丽萍(第二军医大学长海医院心内科，上海200433)；张国元(第二军医大学长征医院心内科)；吴宗贵(第二军医大学长征医院心内科)；侯健(血液科，上海200003)；丁思奇(血液科，上海200003)
关键词：
基础医学与临床000224
中图分类号：Q513+.5 文献标识码：A
文章编号： 1001-6325(2000) 02-0082-01
绝经后妇女冠心病发病率较绝经前明显增加，绝经后予雌激素替代疗法，可减少冠心病发病率约50%。表明女性的这种优势与雌激素的保护作用有关。雌激素的抗动脉粥样硬化作用已得到证实，但其确切机制仍在探索之中。血管内皮细胞损伤是动脉粥样硬化的主要致病因素之一。高水平的血浆低密度脂蛋白(LDL)又是动脉粥样硬化的重要危险因素。本文旨在探讨LDL对血管内皮细胞的作用及17b-雌二醇对LDL 引起的血管内皮细胞损伤的影响。进一步探讨雌激素对血管的保护作用机制。
, http://www.100md.com
实验采用改进的Jaffe等方法。取新生儿脐带，用胶原酶消化。含20%小牛血清的RPMI-1640培养液培养。根据细胞呈单层铺路石状排列，及第Ⅷ因子阳性鉴定为内皮细胞。采用生长成融合状态的原代培养内皮细胞。(1)对照组：无血清RPMI-1640培养； (2)LDL组：LDL(50，100，200mg/mL)，无血清RPMI-1640培养液补足500mL/孔，培养24h、48h，收集上清液；(3)雌激素组：17b-雌二醇10-9mol/L 预处理内皮细胞24h后，再加LDL (50、100、200mg/mL)培养24h，取上清液。
取培养上清液测定血管紧张素转换酶(ACE微量比色法)和乳酸脱氢酶(LDH)水平(德国宝灵曼全自动生化分析仪)。结果以平均值±标准差(
±s)表示，以方差分析，SNK法两两比较进行分析。
结果：LDL可使内皮细胞培养液中ACE、LDH明显增加，且具有浓度依赖性，与作用时间成正相关(表1)。
, 百拇医药
表1 LDL对血管内皮细胞产生ACE、LDH的影响
Table 1 Effect of LDL on ACE and LDH of cultured HUVEC LDL(mg/mL)
ACE(u)
LDH(u/L)
24h
48h
24h
48h
control
15.55±1.61
15.39±1.73
, http://www.100md.com
5.67±2.31
5.67±2.08
50
18.32±3.65
18.20±2.74
9.00±2.00
9.67±4.04
100
23.02±2.13**
26.60±1.98*
16.67±4.51*
, 百拇医药
23.00±4.36*
200
25.16±2.32**
24.41±4.16*
22.00±4.36**
26.00±6.56**
Compared with control ：**P<0.01； *P<0.05
经17b-雌二醇预处理后，LDL对内皮细胞所引起的损伤有明显减轻，与LDL组相比，17b-雌二醇组的ACE、LDH水平明显下降(P<0.05)。
, http://www.100md.com
在血管内皮细胞损伤的定量分析法中，常用的有测定细胞内酶的释放量和预标同位素的释放量等多种。LDH是糖酵解酶，广泛存在于人体组织细胞内。当细胞受损时可释放出来，损伤越重，释放量越多。通过测定培养液中LDH释放量可反映细胞膜损伤程度。 ACE主要来源于血管内皮细胞。血管内皮细胞受损后，ACE便从血管内皮细胞表面脱落，使ACE水平增加。研究证实， ACE水平变化是血管内皮细胞损伤的一个可靠指标。
国外临床资料显示，绝经后妇女随着体内雌激素水平降低，脂蛋白代谢发生紊乱，血清总胆固醇、 LDL水平增加，高密度脂蛋白(HDL)降低。本实验结果显示，LDL对血管内皮细胞有损伤作用，且随着剂量加大及作用时间延长，培养液中LDH和ACE也随之增加。绝经妇女体内雌激素水平下降，血清脂代谢紊乱，LDL增加。增加的LDL可对血管内皮细胞产生直接损伤，导致动脉粥样硬化。这可能是绝经后妇女冠心病发生率增加的原因之一。
同时结果可看出，LDL对经17b-雌二醇预处理后的血管内皮细胞的损伤明显减轻。表明了雌激素对血管内皮细胞具有保护作用，具有明显抑制LDL损伤血管内皮细胞的能力，从而发挥其对血管的保护作用。雌激素减轻高浓度LDL对血管内皮细胞的损伤，起到对冠脉的保护作用。进一步探讨雌激素的心血管保护作用，对冠心病的防治具有一定意义。
收稿日期：1998-06-14；修订日期：1999-04-04, http://www.100md.com
单位：马丽萍(第二军医大学长海医院心内科，上海200433)；张国元(第二军医大学长征医院心内科)；吴宗贵(第二军医大学长征医院心内科)；侯健(血液科，上海200003)；丁思奇(血液科，上海200003)
关键词：
基础医学与临床000224
中图分类号：Q513+.5 文献标识码：A
文章编号： 1001-6325(2000) 02-0082-01
绝经后妇女冠心病发病率较绝经前明显增加，绝经后予雌激素替代疗法，可减少冠心病发病率约50%。表明女性的这种优势与雌激素的保护作用有关。雌激素的抗动脉粥样硬化作用已得到证实，但其确切机制仍在探索之中。血管内皮细胞损伤是动脉粥样硬化的主要致病因素之一。高水平的血浆低密度脂蛋白(LDL)又是动脉粥样硬化的重要危险因素。本文旨在探讨LDL对血管内皮细胞的作用及17b-雌二醇对LDL 引起的血管内皮细胞损伤的影响。进一步探讨雌激素对血管的保护作用机制。
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实验采用改进的Jaffe等方法。取新生儿脐带，用胶原酶消化。含20%小牛血清的RPMI-1640培养液培养。根据细胞呈单层铺路石状排列，及第Ⅷ因子阳性鉴定为内皮细胞。采用生长成融合状态的原代培养内皮细胞。(1)对照组：无血清RPMI-1640培养； (2)LDL组：LDL(50，100，200mg/mL)，无血清RPMI-1640培养液补足500mL/孔，培养24h、48h，收集上清液；(3)雌激素组：17b-雌二醇10-9mol/L 预处理内皮细胞24h后，再加LDL (50、100、200mg/mL)培养24h，取上清液。
取培养上清液测定血管紧张素转换酶(ACE微量比色法)和乳酸脱氢酶(LDH)水平(德国宝灵曼全自动生化分析仪)。结果以平均值±标准差(
±s)表示，以方差分析，SNK法两两比较进行分析。结果：LDL可使内皮细胞培养液中ACE、LDH明显增加，且具有浓度依赖性，与作用时间成正相关(表1)。
, 百拇医药
表1 LDL对血管内皮细胞产生ACE、LDH的影响
Table 1 Effect of LDL on ACE and LDH of cultured HUVEC LDL(mg/mL)
ACE(u)
LDH(u/L)
24h
48h
24h
48h
control
15.55±1.61
15.39±1.73
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5.67±2.31
5.67±2.08
50
18.32±3.65
18.20±2.74
9.00±2.00
9.67±4.04
100
23.02±2.13**
26.60±1.98*
16.67±4.51*
, 百拇医药
23.00±4.36*
200
25.16±2.32**
24.41±4.16*
22.00±4.36**
26.00±6.56**
Compared with control ：**P<0.01； *P<0.05
经17b-雌二醇预处理后，LDL对内皮细胞所引起的损伤有明显减轻，与LDL组相比，17b-雌二醇组的ACE、LDH水平明显下降(P<0.05)。
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在血管内皮细胞损伤的定量分析法中，常用的有测定细胞内酶的释放量和预标同位素的释放量等多种。LDH是糖酵解酶，广泛存在于人体组织细胞内。当细胞受损时可释放出来，损伤越重，释放量越多。通过测定培养液中LDH释放量可反映细胞膜损伤程度。 ACE主要来源于血管内皮细胞。血管内皮细胞受损后，ACE便从血管内皮细胞表面脱落，使ACE水平增加。研究证实， ACE水平变化是血管内皮细胞损伤的一个可靠指标。
国外临床资料显示，绝经后妇女随着体内雌激素水平降低，脂蛋白代谢发生紊乱，血清总胆固醇、 LDL水平增加，高密度脂蛋白(HDL)降低。本实验结果显示，LDL对血管内皮细胞有损伤作用，且随着剂量加大及作用时间延长，培养液中LDH和ACE也随之增加。绝经妇女体内雌激素水平下降，血清脂代谢紊乱，LDL增加。增加的LDL可对血管内皮细胞产生直接损伤，导致动脉粥样硬化。这可能是绝经后妇女冠心病发生率增加的原因之一。
同时结果可看出，LDL对经17b-雌二醇预处理后的血管内皮细胞的损伤明显减轻。表明了雌激素对血管内皮细胞具有保护作用，具有明显抑制LDL损伤血管内皮细胞的能力，从而发挥其对血管的保护作用。雌激素减轻高浓度LDL对血管内皮细胞的损伤，起到对冠脉的保护作用。进一步探讨雌激素的心血管保护作用，对冠心病的防治具有一定意义。
收稿日期：1998-06-14；修订日期：1999-04-04, http://www.100md.com