有机硒防治镉中毒的实验研究
作者：贺宝芝 徐臻 王淑青 郝文
单位：266033 青岛市卫生防疫站
关键词：
有机硒防治镉中毒的实验研究 我们观察了用富硒蚯蚓制品(FCQY，含有机硒)预防和治疗染镉大白鼠的镉中毒效果，旨在为防治镉中毒提供更有效的药物。
一、材料与方法
1.动物实验：将健康成年Wistar大鼠80只(♂、♀各40只)，体重190～220 g，青岛市药品检验所提供，普通饲料喂养。随机分成4组(每组20只)：①正常对照组；②染镉组；③无机硒治疗组；④有机硒治疗组。大鼠均用氯化镉20 mg/kg间日灌胃染毒，染毒翌日，无机硒和有机硒治疗组分别给亚硒酸钠(含硒20 mg/kg)、有机硒溶液(含硒5.0 mg的富硒蚯蚓粉50 mg，加入500 ml水混匀)4 ml灌胃。染毒与给药均隔日交替进行。②、③、④组均染毒8天。染毒及给药结束后，除②、④组各留10只外，各组大鼠断头处死，取静脉血(每ml血加150 μg肝素钠抗凝)，测定血硒、镉含量；取肝脏、肾脏，测定硒、镉含量；同时测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。④组所留10只大鼠继续用有机硒溶液(含硒2.5 mg的富硒蚯蚓粉25 g，加入500 ml水混匀)灌胃，每只每天4 ml，连续灌胃8天；②组的10只大鼠不治疗，自然排镉作对照。每天测定两组尿镉、粪镉含量，观察排镉效果。
, http://www.100md.com
2.测定方法：(1)GSH-Px活力测定。(2)SOD活力用黄嘌呤氧化酶法测定。(3)用硫代巴比妥酸(TBA)法测定血清MDA含量。以上各项测定均使用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒。(4)二苯氨基萘荧光法[1]测定血、肝、肾中含硒量。(5)用微分电位溶出法测定肝、肾、血、尿、粪中镉含量[2]。尿镉含量用肌酐校正[3]。(6)取染毒及给药结束后的②、④组大鼠各10只断头处死，立即取肝、肾组织各2 mm3，用2.5%戊二醛溶液固定，1%锇酸再固定，乙醇脱水，Epon812包埋，Ultracute超薄片机切片，醋酸双氧铀和柠檬酸染色，日产JEM-1200 EX型透射电镜观察超微结构的变化。
3.结果均采用t检验进行统计学处理。
二、结果
1.各组大鼠肝硒、肝镉、血镉、肾镉含量测定结果见表1、表2；质过氧化指标测定结果见表3。
, 百拇医药
表1 各组大鼠肝中硒、镉含量变化(
±s)
组别
动物数(只)
硒(μg/g)
镉(μg/g)
染镉
10
0.05±0.01
10.82±0.86
无机硒
, 百拇医药
20
0.09±0.03
5.62±0.39
有机硒
10
0.11±0.03
3.47±0.21
对照
20
0.06±0.01
, 百拇医药
0.03±0.01
与染镉组比较，**P<0.01；与对照组比较，△△P<0.01；与无机硒组比较，##P<0.01 表2 各组大鼠肾脏和血中镉含量变化(±s)
组别
动物数(只)
肾镉(μg/g)
血镉(μg/g)
对照
20
, 百拇医药
0.06±0.01
0.07±0.01
染镉
10
41.20±3.78
0.32±0.06
无机硒
20
20.20±3.26
3.82±1.10
有机硒
10
, 百拇医药 14.87±2.81
5.26±1.15
与染镉组比较，**P<0.01；与对照组比较，△△ P<0.01；与无机硒组比较，##P<0.01 表3 各组大鼠血硒、全血GSH-Px和血清SOD、MDA的变化(±s)
组别
动物 (只)
, 百拇医药
Se
(μg/ml)
SOD
(NU/ml)
MDA
(nmol/ml)
GSH-Px
(U/L)
对照
20
0.10±0.02
103.5±15.5
4.05±0.52
, 百拇医药
14.92±2.3
染镉
10
0.09±0.02
65.2±15.2
7.35±1.16
8.86±1.3
无机硒
20
0.25±0.03
87.3±10.9
4.85±0.75
, http://www.100md.com
13.11±1.6
有机硒
10
0.29±0.03
99.8±12.6
4.13±0.61
14.65±1.8
, 百拇医药
与染镉组比较，**P<0.01；与无机硒治疗组比较，#P<0.05
2.排镉实验结果：有机硒治疗组大鼠用有机硒溶液灌胃后，尿镉排出量为(47.5±3.12)μg/g肌酐，粪镉排出量可达到(550±46.3)μg/g。用FCQY灌胃治疗第7天后达到排镉高峰。染镉组尿镉排出量为(26.6±3.15)μg/g肌酐；粪镉为(350±28.7)μg/g。
3.超微结构变化：(1)肾脏：染镉组可见肾小管微绒毛脱落、部分肾小管管腔有堵塞、基底膜不完整并伴有空泡化、肾小管上皮细胞内线粒体脊膜减少或不清晰。有机硒治疗组可见肾小管管腔微绒毛完整，肾小管上皮细胞线粒体结构正常、核膜完整、核仁明显。(2)肝脏：染镉组可见肝细胞形态不规则；核膜皱折、核质分布不均匀；肝线粒体成堆排列或聚集、形状不规则、脊模糊。有机硒治疗组可见肝细胞形状规整；核膜清晰、核质均匀；肝线粒体分布均匀、形状规则、脊清晰，内质网上颗粒分布均匀。
, 百拇医药
三、讨论
本实验结果表明：肝硒含量以有机硒治疗组上升最高；肝镉、肾镉含量有机硒治疗组明显低于无机硒治疗组(P<0.01)，说明有机硒比无机硒更容易吸收，且对肝、肾中镉的清除能力更强。本研究中，有机硒治疗组SOD、GSH-Px活力及MDA含量与染镉组的差异均有显著性(P<0.01)，提示：有机硒可拮抗镉所造成的脂质过氧化作用。有机硒治疗组大鼠尿镉排出量比染镉后不治疗的大鼠同期增加1.8倍，表明有机硒制品具有促使镉从尿中排出的作用。FCQY制品含钙3639mg/kg、含磷10314mg/kg，高钙、高磷亦可减少镉的消化道吸收，故有机硒治疗组粪排镉量明显高于对照组。
本课题受青岛市科委科研基金资助
参 考 文 献
[1] GB/T12399-1996中华人民共和国国家标准.
[2] 线引林主编.生物材料中有毒物质分析方法手册.北京：人民卫生出版社，1993.148-152.
[3] 徐伯洪主编.作业场所空气和生物材料检测推荐方法.北京：人民卫生出版社，1996.293-295.
(收稿：1998-01-22 修回：1998-09-24), http://www.100md.com
单位：266033 青岛市卫生防疫站
关键词：
有机硒防治镉中毒的实验研究 我们观察了用富硒蚯蚓制品(FCQY，含有机硒)预防和治疗染镉大白鼠的镉中毒效果，旨在为防治镉中毒提供更有效的药物。
一、材料与方法
1.动物实验：将健康成年Wistar大鼠80只(♂、♀各40只)，体重190～220 g，青岛市药品检验所提供，普通饲料喂养。随机分成4组(每组20只)：①正常对照组；②染镉组；③无机硒治疗组；④有机硒治疗组。大鼠均用氯化镉20 mg/kg间日灌胃染毒，染毒翌日，无机硒和有机硒治疗组分别给亚硒酸钠(含硒20 mg/kg)、有机硒溶液(含硒5.0 mg的富硒蚯蚓粉50 mg，加入500 ml水混匀)4 ml灌胃。染毒与给药均隔日交替进行。②、③、④组均染毒8天。染毒及给药结束后，除②、④组各留10只外，各组大鼠断头处死，取静脉血(每ml血加150 μg肝素钠抗凝)，测定血硒、镉含量；取肝脏、肾脏，测定硒、镉含量；同时测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。④组所留10只大鼠继续用有机硒溶液(含硒2.5 mg的富硒蚯蚓粉25 g，加入500 ml水混匀)灌胃，每只每天4 ml，连续灌胃8天；②组的10只大鼠不治疗，自然排镉作对照。每天测定两组尿镉、粪镉含量，观察排镉效果。
, http://www.100md.com
2.测定方法：(1)GSH-Px活力测定。(2)SOD活力用黄嘌呤氧化酶法测定。(3)用硫代巴比妥酸(TBA)法测定血清MDA含量。以上各项测定均使用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒。(4)二苯氨基萘荧光法[1]测定血、肝、肾中含硒量。(5)用微分电位溶出法测定肝、肾、血、尿、粪中镉含量[2]。尿镉含量用肌酐校正[3]。(6)取染毒及给药结束后的②、④组大鼠各10只断头处死，立即取肝、肾组织各2 mm3，用2.5%戊二醛溶液固定，1%锇酸再固定，乙醇脱水，Epon812包埋，Ultracute超薄片机切片，醋酸双氧铀和柠檬酸染色，日产JEM-1200 EX型透射电镜观察超微结构的变化。
3.结果均采用t检验进行统计学处理。
二、结果
1.各组大鼠肝硒、肝镉、血镉、肾镉含量测定结果见表1、表2；质过氧化指标测定结果见表3。
, 百拇医药
表1 各组大鼠肝中硒、镉含量变化(
±s)组别
动物数(只)
硒(μg/g)
镉(μg/g)
染镉
10
0.05±0.01
10.82±0.86
无机硒
, 百拇医药
20
0.09±0.03
5.62±0.39
有机硒
10
0.11±0.03
3.47±0.21
对照
20
0.06±0.01
, 百拇医药
0.03±0.01
与染镉组比较，**P<0.01；与对照组比较，△△P<0.01；与无机硒组比较，##P<0.01 表2 各组大鼠肾脏和血中镉含量变化(
±s)组别
动物数(只)
肾镉(μg/g)
血镉(μg/g)
对照
20
, 百拇医药
0.06±0.01
0.07±0.01
染镉
10
41.20±3.78
0.32±0.06
无机硒
20
20.20±3.26
3.82±1.10
有机硒
10
, 百拇医药 14.87±2.81
5.26±1.15
与染镉组比较，**P<0.01；与对照组比较，△△ P<0.01；与无机硒组比较，##P<0.01 表3 各组大鼠血硒、全血GSH-Px和血清SOD、MDA的变化(
±s)组别
动物 (只)
, 百拇医药
Se
(μg/ml)
SOD
(NU/ml)
MDA
(nmol/ml)
GSH-Px
(U/L)
对照
20
0.10±0.02
103.5±15.5
4.05±0.52
, 百拇医药
14.92±2.3
染镉
10
0.09±0.02
65.2±15.2
7.35±1.16
8.86±1.3
无机硒
20
0.25±0.03
87.3±10.9
4.85±0.75
, http://www.100md.com
13.11±1.6
有机硒
10
0.29±0.03
99.8±12.6
4.13±0.61
14.65±1.8
, 百拇医药
与染镉组比较，**P<0.01；与无机硒治疗组比较，#P<0.05
2.排镉实验结果：有机硒治疗组大鼠用有机硒溶液灌胃后，尿镉排出量为(47.5±3.12)μg/g肌酐，粪镉排出量可达到(550±46.3)μg/g。用FCQY灌胃治疗第7天后达到排镉高峰。染镉组尿镉排出量为(26.6±3.15)μg/g肌酐；粪镉为(350±28.7)μg/g。
3.超微结构变化：(1)肾脏：染镉组可见肾小管微绒毛脱落、部分肾小管管腔有堵塞、基底膜不完整并伴有空泡化、肾小管上皮细胞内线粒体脊膜减少或不清晰。有机硒治疗组可见肾小管管腔微绒毛完整，肾小管上皮细胞线粒体结构正常、核膜完整、核仁明显。(2)肝脏：染镉组可见肝细胞形态不规则；核膜皱折、核质分布不均匀；肝线粒体成堆排列或聚集、形状不规则、脊模糊。有机硒治疗组可见肝细胞形状规整；核膜清晰、核质均匀；肝线粒体分布均匀、形状规则、脊清晰，内质网上颗粒分布均匀。
, 百拇医药
三、讨论
本实验结果表明：肝硒含量以有机硒治疗组上升最高；肝镉、肾镉含量有机硒治疗组明显低于无机硒治疗组(P<0.01)，说明有机硒比无机硒更容易吸收，且对肝、肾中镉的清除能力更强。本研究中，有机硒治疗组SOD、GSH-Px活力及MDA含量与染镉组的差异均有显著性(P<0.01)，提示：有机硒可拮抗镉所造成的脂质过氧化作用。有机硒治疗组大鼠尿镉排出量比染镉后不治疗的大鼠同期增加1.8倍，表明有机硒制品具有促使镉从尿中排出的作用。FCQY制品含钙3639mg/kg、含磷10314mg/kg，高钙、高磷亦可减少镉的消化道吸收，故有机硒治疗组粪排镉量明显高于对照组。
本课题受青岛市科委科研基金资助
参 考 文 献
[1] GB/T12399-1996中华人民共和国国家标准.
[2] 线引林主编.生物材料中有毒物质分析方法手册.北京：人民卫生出版社，1993.148-152.
[3] 徐伯洪主编.作业场所空气和生物材料检测推荐方法.北京：人民卫生出版社，1996.293-295.
(收稿：1998-01-22 修回：1998-09-24), http://www.100md.com