钩端螺旋体不含兔血清培养基的应用研究
作者：蒋秀高 聂一新 肖玉春 时曼华
单位：中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所 北京 102206
关键词：
中华流行病学杂志990206 【摘要】 目的 了解山东省HGV感染状况，探讨HG V感染与HCV或HBV感染的关系。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA )对1 082例病毒性肝炎患者、77例非甲至戊型肝炎患者和361名献血员进行了血清抗-HG V检测。结果 共检出血清抗-HGV阳性者53例，阳性率3.49%。丙型肝炎患者血清抗-HGV阳性率(8.93%)显著高于乙型肝炎患者(3.32%)(χ2＝8.80，P<0.01)。慢性肝炎患者血清抗-HGV阳性率(4.82%)显著 高于急性肝炎患者(0.79%)(χ2＝10.79，P<0.01)。重型肝炎患者血清 抗-HGV阳性率(8.00%)显著高于急性肝炎患者(χ2＝10.23，P<0.01 )。 结论 HGV感染可表现为病毒携带状态、亚临床型和不同临床类型，丙型肝炎患者较乙型肝炎患者更易重叠感染HGV，HGV与HCV或HBV重叠感染可能与病情加重和 慢性化的形成有关
, 百拇医药
Study on Hepatitis G Virus infection CHEN Xianru i*,XUAN Meixiang,WU Duowen,et al. * Taishan Medical College, Taian 271000
【Abstract】 Objective To find out the situation of HGV in fection in Shandong Province, and to explore the relations between HGV infection and HCV or HBV infection.Methods Enzyme linked immunoso rbent assay (ELISA) was used to determine the serum anti-HGV in 1 082 patien ts with viral hepatitis, 77 patients with non A-E hepatitis and 361 blood donors . Results 53 patients whose serum anti-HGVs were positive (positive rate:3.49%) were noticed. The anti-HGV positive rate (8.93%) in patients with Hepatitis C was remarkably higher than that (3.32%) in pati ents with Hepatitis B (χ2＝8.80,P<0.01). The anti-HGV positive rate (4.82%) in patients with chronic hepatitis was significantly higher than tha t (0.79%) in patients with acute hepatitis (χ2＝10.79, P<0.01 ). The anti-HGV positive rate (8.00%) in patients with severe hepatitis wa s obviously higher than that in patients with acute hepatitis (χ2＝10.23, P<0.01).Conclusion The manifestations of HGV i nfection can be expressed as virus-carriers, subclinical infection or various cl inical types. Patients with Hepatitis C were more subjective to be overlapped wi th HGV than the patients with Hepatitis B; moreover, HCV or HBV infection superi nfected with HGV is associated with exacerbation of patients' condition and the formation of chronic infection.
, 百拇医药
【Key words】 Hepatitis G Hepatitis G virus Anti-HG V
庚型肝炎病毒(Hepatitis G Virus,HGV)是Simons[1，2]等1995年在非甲至戊型 肝炎患者血浆中发现的一种与输血有关的新型肝炎病毒。许多学者对HGV的分子生物学及其 所致的临床病理进行了一些研究[3，4]，取得了一些研究进展。1996年10月至1998 年10月，我们在山东省7个地市进行了HGV感染研究。现报告如下。
材料与方法
一、研究对象：在山东省的泰山医学院附属医院、泰安市中心医院、临沂地 区人民医院、济宁市传染病医院、新汶矿务局中心医院、莱芜市医院、淄博市人民医院、聊 城地区人民医院和枣庄市立医院随机选取1 082例病毒性肝炎患者、77例非甲至戊型肝 炎患者和361名献血员作为研究对象。在1 082例病毒性肝炎患者中，男776例，女306例 ，年龄11～63岁，平均34.5岁，全部病例均符合1995年北京第五次全国传染病寄生虫病 学术会议讨论修订的诊断标准[5]。按临床诊断分型为：急性肝炎381例，慢性肝炎 602例，重型肝炎50例，肝炎肝硬变49例。按病原学诊断为甲型肝炎149例，乙型肝炎693例 ，丙型肝炎168例，戊型肝炎72例。
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二、标本采集：抽取病毒性肝炎患者、非甲至戊型肝炎患者和献血员静脉 血5ml，分离血清后置-70℃保存待检。
三、检测方法：血清抗-HGV检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA)，试剂盒由 北京医科大学肝炎试剂研究中心提供，实验操作程序和结果判定均按试剂盒使用说明书进行。
结 果
一、不同病原病毒性肝炎患者、非甲至戊型肝炎患者和献血员血清抗-HGV检测结果：1 082例不同病原病毒性肝炎患者、77例非甲至戊型肝炎患者和361名献血员血清抗-HGV检测结果见表1。经卡方检验，χ2＝20.42，P<0.001。 其中，丙型肝炎患者血清抗-HGV阳性率显著高于乙型肝炎患者，χ2＝8.80，P <0.01，其差异有非常显著性。
表1 不同病原病毒性肝炎患者、非甲至戊型肝炎
, 百拇医药
患者和 献血员血清抗-HGV检测结果 分 组
检测例数
阳性例数
阳性率(%)
甲型肝炎
149
0
0.00
乙型肝炎
693
23
3.32
丙型肝炎
, 百拇医药
168
15
8. 93
戊型肝炎
72
0
0.00
非甲至戊型肝炎
77
4
5.19
献 血 员
361
, http://www.100md.com
11
3.05
合 计
1520
53
3.49
χ2＝20.42 P<0.001
二、不同临床类型病毒性肝炎患者血清抗-HGV检测结果：不同临床类型病毒性肝炎患者血清抗-HGV检测结果见表2。经卡方检验，慢性肝炎患者与急性肝炎患者血清抗- HGV阳性率之间，χ2＝10.79 P<0.01，其差异有非常显著性。重型肝炎患 者与急性肝炎患者血清抗-HGV阳性率之间，χ2＝10.23，P<0.01，其差异 有非常显著性。肝炎肝硬变患者与急性肝炎、慢性肝炎和重型肝炎患者血清抗-HGV阳性率之 间的差异均无显著意义。慢性肝炎与重型肝炎患者血清抗-HGV阳性率之间，χ2＝0.42，P>0.05，差异无显著意义。
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表2 不同临床类型病毒性肝炎患者血清抗-HGV检测结果 临床类型
检测例数
阳性例数
阳性率(%)
急性肝炎
3 81
3
0.79
慢性肝炎
602
29
4.82
, http://www.100md.com 重型肝炎
50
4
8.00
肝炎肝硬变
49
2
4.08
合 计
1082
38
3.51
χ2＝14.39 P<0.01
, http://www.100md.com
讨 论
自1995年Simons等[1]发现HGV以来，HGV和庚型肝炎已成为国内外的研究热 点。国内周玉森[3]等报告了中国人庚型肝炎病毒全基因cDNA克隆及序列测定的结 果，杨志国等[4]报告了庚型肝炎肝脏免疫组化研究。我们以1 082例病毒性肝 炎患者、77例非甲至戊型肝炎患者和361名献血员作为研究对象，对其进行了血清抗-HGV检 测，共检出53例抗-HGV阳性者，甲型肝炎和戊型肝炎患者中未检出抗-HGV阳性者，丙型肝炎 患者血清抗-HGV阳性率显著高于乙型肝炎患者。丙型肝炎患者血清抗-HGV阳性率较高的原因 可能有两个方面，一是HCV和HGV有经血传播的共同途径，二是HGV和HCV是黄热病病毒科的不 同成员，其基因组序列的同源性较高，为29%。所以易构成HGV和HCV重叠感染。而乙型 肝炎病毒的传播途径复杂，经血传播仅是传播途径之一，故乙型肝炎患者血清抗-HGV阳性率 显著低于丙型肝炎。在我们所检测的42例HGV感染的肝炎患者中，有15例重叠感染HCV，有23 例重叠感染HBV，只有4例肝炎患者为单纯HGV感染。
, 百拇医药
以往认为HGV感染一般不引起重型肝炎[6]，临床表现一般较丙型肝炎为轻，黄疸出 现较少，ALT水平较低，预后较好，有些为亚临床型或无症状的病毒携带状态。但Yoshiba 7]以6例非甲至戊型重型肝炎患者作为研究对象，在其中3例患者血清中发现了HGV R NA。舒波等[8]也报告在49例重型肝炎患者中有8例血清中检测到HGV RNA，其中7例 重叠感染HCV或HBV，1例为单纯HGV感染。我们在50例重型肝炎患者中发现有4例患者血清抗- HGV阳性，其中3例为HGV和HCV重叠感染，1例为HGV和HBV重叠感染。
在不同临床类型的甲型至戊型病毒性肝炎患者中有38例血清抗-HGV阳性，重型肝炎和慢性肝 炎患者血清抗-HGV阳性率较高。在从非甲至戊型肝炎患者中确诊的4例庚型肝炎患者中，1例 为重型肝炎，2例为慢性肝炎，有1例为急性肝炎。重型肝炎和慢性肝炎患者血清抗-HGV阳性 率显著高于急性肝炎患者，显示HGV感染易引起重型肝炎和慢性肝炎。
, http://www.100md.com
在献血员中国内外均有较高的检出率。我们在361名献血员中检出11名血清抗-HGV阳性者， 阳性率为3.05%，其中9名无症状，血清ALT正常，表现为无症状的病毒携带状态，2名为 亚临床型，有轻微的临床表现，血清ALT轻度升高，但血清总胆红素均在正常范围。提示必 须对献血员进行严格筛选，以阻断输血引起的HGV感染。
综上所述，在献血员中血清抗-HGV阳性率为3.05%，在甲型至戊型肝炎患者中，丙型肝 炎患者重叠感染HGV的比例显著高于乙型肝炎患者。在不同临床类型的病毒性肝炎患者中， 重型肝炎、慢性肝炎患者HGV感染率均显著高于急性肝炎患者，以重型肝炎患者HGV感染率为 最高。HGV感染可表现为病毒携带状态、亚临床型和不同临床类型。提示丙型肝炎患者较乙 型肝炎患者更易重叠感染HGV。HGV与HCV或HBV重叠感染可能与病情加重和慢性化的形成有关。
本项研究为山东省教委资助 项目
, 百拇医药 参考文献 1 Simons JN,Pilot-Matia TJ,Leary TP,et al.Identification of two fla vivirus-like genomes in the GB hepatitis agent.Proc Natl Acad Sci USA,1995,92∶ 3401-3404.
2 Linnen J,Wages J,Zhang ZY,et al.Molecular cloning and disease ass ociation of hepatitis G virus:A transfusion-transmissible agent.Science,1996,271 ∶505-508.
3 周玉森，陈薇，赵秋敏，等.中国人庚型肝炎病毒全基因cDNA克隆及序列测 定.军事医学科学院院刊，1996，20∶249-251.
, 百拇医药
4 杨志国，许家璋，陈万荣，等.庚型肝炎肝脏免疫组化研究.中华传染病杂 志，1998，16∶91-92.
5 1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议.病毒性肝炎防治方案(试 行).中华传染病杂志，1995，13∶241-247.
6 彭宜红.庚型肝炎研究进展.国外医学流行病学传染病学分册，1996，23∶7 2-73.
7 Yoshiba M,Okamoto H,Mishiro S,et al.Detection of the GBV-C hepati tis virus genome in serum from patients with fulminent of unknown etiology. Lan cet,1995,346∶1131-1132.
8 舒波，窦晓光，李颖，等.沈阳地区重型肝炎血清中庚型肝炎病毒核酸的 检测.中华流行病学杂志，1998，19∶168-169.
(收稿：1998-11-21 修回：1998-12-24), 百拇医药
单位：中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所 北京 102206
关键词：
中华流行病学杂志990206 【摘要】 目的 了解山东省HGV感染状况，探讨HG V感染与HCV或HBV感染的关系。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA )对1 082例病毒性肝炎患者、77例非甲至戊型肝炎患者和361名献血员进行了血清抗-HG V检测。结果 共检出血清抗-HGV阳性者53例，阳性率3.49%。丙型肝炎患者血清抗-HGV阳性率(8.93%)显著高于乙型肝炎患者(3.32%)(χ2＝8.80，P<0.01)。慢性肝炎患者血清抗-HGV阳性率(4.82%)显著 高于急性肝炎患者(0.79%)(χ2＝10.79，P<0.01)。重型肝炎患者血清 抗-HGV阳性率(8.00%)显著高于急性肝炎患者(χ2＝10.23，P<0.01 )。 结论 HGV感染可表现为病毒携带状态、亚临床型和不同临床类型，丙型肝炎患者较乙型肝炎患者更易重叠感染HGV，HGV与HCV或HBV重叠感染可能与病情加重和 慢性化的形成有关
, 百拇医药
Study on Hepatitis G Virus infection CHEN Xianru i*,XUAN Meixiang,WU Duowen,et al. * Taishan Medical College, Taian 271000
【Abstract】 Objective To find out the situation of HGV in fection in Shandong Province, and to explore the relations between HGV infection and HCV or HBV infection.Methods Enzyme linked immunoso rbent assay (ELISA) was used to determine the serum anti-HGV in 1 082 patien ts with viral hepatitis, 77 patients with non A-E hepatitis and 361 blood donors . Results 53 patients whose serum anti-HGVs were positive (positive rate:3.49%) were noticed. The anti-HGV positive rate (8.93%) in patients with Hepatitis C was remarkably higher than that (3.32%) in pati ents with Hepatitis B (χ2＝8.80,P<0.01). The anti-HGV positive rate (4.82%) in patients with chronic hepatitis was significantly higher than tha t (0.79%) in patients with acute hepatitis (χ2＝10.79, P<0.01 ). The anti-HGV positive rate (8.00%) in patients with severe hepatitis wa s obviously higher than that in patients with acute hepatitis (χ2＝10.23, P<0.01).Conclusion The manifestations of HGV i nfection can be expressed as virus-carriers, subclinical infection or various cl inical types. Patients with Hepatitis C were more subjective to be overlapped wi th HGV than the patients with Hepatitis B; moreover, HCV or HBV infection superi nfected with HGV is associated with exacerbation of patients' condition and the formation of chronic infection.
, 百拇医药
【Key words】 Hepatitis G Hepatitis G virus Anti-HG V
庚型肝炎病毒(Hepatitis G Virus,HGV)是Simons[1，2]等1995年在非甲至戊型 肝炎患者血浆中发现的一种与输血有关的新型肝炎病毒。许多学者对HGV的分子生物学及其 所致的临床病理进行了一些研究[3，4]，取得了一些研究进展。1996年10月至1998 年10月，我们在山东省7个地市进行了HGV感染研究。现报告如下。
材料与方法
一、研究对象：在山东省的泰山医学院附属医院、泰安市中心医院、临沂地 区人民医院、济宁市传染病医院、新汶矿务局中心医院、莱芜市医院、淄博市人民医院、聊 城地区人民医院和枣庄市立医院随机选取1 082例病毒性肝炎患者、77例非甲至戊型肝 炎患者和361名献血员作为研究对象。在1 082例病毒性肝炎患者中，男776例，女306例 ，年龄11～63岁，平均34.5岁，全部病例均符合1995年北京第五次全国传染病寄生虫病 学术会议讨论修订的诊断标准[5]。按临床诊断分型为：急性肝炎381例，慢性肝炎 602例，重型肝炎50例，肝炎肝硬变49例。按病原学诊断为甲型肝炎149例，乙型肝炎693例 ，丙型肝炎168例，戊型肝炎72例。
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二、标本采集：抽取病毒性肝炎患者、非甲至戊型肝炎患者和献血员静脉 血5ml，分离血清后置-70℃保存待检。
三、检测方法：血清抗-HGV检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA)，试剂盒由 北京医科大学肝炎试剂研究中心提供，实验操作程序和结果判定均按试剂盒使用说明书进行。
结 果
一、不同病原病毒性肝炎患者、非甲至戊型肝炎患者和献血员血清抗-HGV检测结果：1 082例不同病原病毒性肝炎患者、77例非甲至戊型肝炎患者和361名献血员血清抗-HGV检测结果见表1。经卡方检验，χ2＝20.42，P<0.001。 其中，丙型肝炎患者血清抗-HGV阳性率显著高于乙型肝炎患者，χ2＝8.80，P <0.01，其差异有非常显著性。
表1 不同病原病毒性肝炎患者、非甲至戊型肝炎
, 百拇医药
患者和 献血员血清抗-HGV检测结果 分 组
检测例数
阳性例数
阳性率(%)
甲型肝炎
149
0
0.00
乙型肝炎
693
23
3.32
丙型肝炎
, 百拇医药
168
15
8. 93
戊型肝炎
72
0
0.00
非甲至戊型肝炎
77
4
5.19
献 血 员
361
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11
3.05
合 计
1520
53
3.49
χ2＝20.42 P<0.001
二、不同临床类型病毒性肝炎患者血清抗-HGV检测结果：不同临床类型病毒性肝炎患者血清抗-HGV检测结果见表2。经卡方检验，慢性肝炎患者与急性肝炎患者血清抗- HGV阳性率之间，χ2＝10.79 P<0.01，其差异有非常显著性。重型肝炎患 者与急性肝炎患者血清抗-HGV阳性率之间，χ2＝10.23，P<0.01，其差异 有非常显著性。肝炎肝硬变患者与急性肝炎、慢性肝炎和重型肝炎患者血清抗-HGV阳性率之 间的差异均无显著意义。慢性肝炎与重型肝炎患者血清抗-HGV阳性率之间，χ2＝0.42，P>0.05，差异无显著意义。
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表2 不同临床类型病毒性肝炎患者血清抗-HGV检测结果 临床类型
检测例数
阳性例数
阳性率(%)
急性肝炎
3 81
3
0.79
慢性肝炎
602
29
4.82
, http://www.100md.com 重型肝炎
50
4
8.00
肝炎肝硬变
49
2
4.08
合 计
1082
38
3.51
χ2＝14.39 P<0.01
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自1995年Simons等[1]发现HGV以来，HGV和庚型肝炎已成为国内外的研究热 点。国内周玉森[3]等报告了中国人庚型肝炎病毒全基因cDNA克隆及序列测定的结 果，杨志国等[4]报告了庚型肝炎肝脏免疫组化研究。我们以1 082例病毒性肝 炎患者、77例非甲至戊型肝炎患者和361名献血员作为研究对象，对其进行了血清抗-HGV检 测，共检出53例抗-HGV阳性者，甲型肝炎和戊型肝炎患者中未检出抗-HGV阳性者，丙型肝炎 患者血清抗-HGV阳性率显著高于乙型肝炎患者。丙型肝炎患者血清抗-HGV阳性率较高的原因 可能有两个方面，一是HCV和HGV有经血传播的共同途径，二是HGV和HCV是黄热病病毒科的不 同成员，其基因组序列的同源性较高，为29%。所以易构成HGV和HCV重叠感染。而乙型 肝炎病毒的传播途径复杂，经血传播仅是传播途径之一，故乙型肝炎患者血清抗-HGV阳性率 显著低于丙型肝炎。在我们所检测的42例HGV感染的肝炎患者中，有15例重叠感染HCV，有23 例重叠感染HBV，只有4例肝炎患者为单纯HGV感染。
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以往认为HGV感染一般不引起重型肝炎[6]，临床表现一般较丙型肝炎为轻，黄疸出 现较少，ALT水平较低，预后较好，有些为亚临床型或无症状的病毒携带状态。但Yoshiba 7]以6例非甲至戊型重型肝炎患者作为研究对象，在其中3例患者血清中发现了HGV R NA。舒波等[8]也报告在49例重型肝炎患者中有8例血清中检测到HGV RNA，其中7例 重叠感染HCV或HBV，1例为单纯HGV感染。我们在50例重型肝炎患者中发现有4例患者血清抗- HGV阳性，其中3例为HGV和HCV重叠感染，1例为HGV和HBV重叠感染。
在不同临床类型的甲型至戊型病毒性肝炎患者中有38例血清抗-HGV阳性，重型肝炎和慢性肝 炎患者血清抗-HGV阳性率较高。在从非甲至戊型肝炎患者中确诊的4例庚型肝炎患者中，1例 为重型肝炎，2例为慢性肝炎，有1例为急性肝炎。重型肝炎和慢性肝炎患者血清抗-HGV阳性 率显著高于急性肝炎患者，显示HGV感染易引起重型肝炎和慢性肝炎。
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在献血员中国内外均有较高的检出率。我们在361名献血员中检出11名血清抗-HGV阳性者， 阳性率为3.05%，其中9名无症状，血清ALT正常，表现为无症状的病毒携带状态，2名为 亚临床型，有轻微的临床表现，血清ALT轻度升高，但血清总胆红素均在正常范围。提示必 须对献血员进行严格筛选，以阻断输血引起的HGV感染。
综上所述，在献血员中血清抗-HGV阳性率为3.05%，在甲型至戊型肝炎患者中，丙型肝 炎患者重叠感染HGV的比例显著高于乙型肝炎患者。在不同临床类型的病毒性肝炎患者中， 重型肝炎、慢性肝炎患者HGV感染率均显著高于急性肝炎患者，以重型肝炎患者HGV感染率为 最高。HGV感染可表现为病毒携带状态、亚临床型和不同临床类型。提示丙型肝炎患者较乙 型肝炎患者更易重叠感染HGV。HGV与HCV或HBV重叠感染可能与病情加重和慢性化的形成有关。
本项研究为山东省教委资助 项目
, 百拇医药 参考文献 1 Simons JN,Pilot-Matia TJ,Leary TP,et al.Identification of two fla vivirus-like genomes in the GB hepatitis agent.Proc Natl Acad Sci USA,1995,92∶ 3401-3404.
2 Linnen J,Wages J,Zhang ZY,et al.Molecular cloning and disease ass ociation of hepatitis G virus:A transfusion-transmissible agent.Science,1996,271 ∶505-508.
3 周玉森，陈薇，赵秋敏，等.中国人庚型肝炎病毒全基因cDNA克隆及序列测 定.军事医学科学院院刊，1996，20∶249-251.
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4 杨志国，许家璋，陈万荣，等.庚型肝炎肝脏免疫组化研究.中华传染病杂 志，1998，16∶91-92.
5 1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议.病毒性肝炎防治方案(试 行).中华传染病杂志，1995，13∶241-247.
6 彭宜红.庚型肝炎研究进展.国外医学流行病学传染病学分册，1996，23∶7 2-73.
7 Yoshiba M,Okamoto H,Mishiro S,et al.Detection of the GBV-C hepati tis virus genome in serum from patients with fulminent of unknown etiology. Lan cet,1995,346∶1131-1132.
8 舒波，窦晓光，李颖，等.沈阳地区重型肝炎血清中庚型肝炎病毒核酸的 检测.中华流行病学杂志，1998，19∶168-169.
(收稿：1998-11-21 修回：1998-12-24), 百拇医药