两种猕猴桃果汁对60Co-γ照射小鼠骨髓细胞的保护作用
作者：杨业鹏 高广花 薛宏伟 徐厚恩 贾凤兰 尚兰琴
单位：杨业鹏(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)；高广花(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)；薛宏伟(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)；徐厚恩(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)；贾凤兰(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)
关键词：
卫生研究990623 选用两种不同品种的猕猴桃果汁，观察并比较了其对60Co-γ 射线照射后小鼠骨髓有核细胞数量、骨髓细胞DNA合成及染色体畸变的影响。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 猕猴桃品种及果汁制备
实验选用的猕猴桃A为从新西兰选种、国内某地出产的Fruiting Male猕猴桃；猕猴桃B为江西农科院育种、浙江临海市出产的魁蜜种猕猴桃。果实制成匀浆，经4℃、8000r/min离心15分钟制得果汁。
1.2 动物及分组处理
选用昆明种雄性小鼠，体重18～22g，北京医科大学动物部提供。实验分8组，染色体畸变试验分4组。阴性对照和照射对照组以蒸馏水灌胃；两种猕猴桃汁低、中、高剂量+照射组分别以10%原汁、50%原汁和2.5倍原汁浓度的桃汁(以原汁加蒸馏水稀释或浓缩制得)灌胃，灌胃容量均为0.2ml/10g体重。桃汁剂量按灌胃桃汁浓度换算成每公斤体重给予的原汁体积表示。各组每天灌胃1次，连续7天。最后一次灌胃后1小时，阴性对照组不做处理，其余各组以60Co-γ射线一次性全身照射，照射剂量5.0Gy，剂 量率153.7cGy/min。照射后24小时处死动物，取材实验。
, 百拇医药
1.3 观察指标及方法
1.3.1 骨髓有核细胞计数 小鼠断髓处死，取股骨。用1ml预冷的RPMI1640全培养液将一条股骨的全部骨髓冲出，血球计数板计数骨髓有核细胞数量。
1.3.2 DNA合成检测 于1ml骨髓细胞悬液中，加入3H-TdR 3. 7kBq(0.1μCi)37℃温育4小时。而后将细胞收集在玻璃纤维滤膜上，以冷生理盐水、5%三氯乙酸和无水乙醇依次冲洗。滤膜干燥后，用液闪仪测量其放射性(cpm)。
1.3.3 染色体畸变分析 按本室常规方法制备小鼠骨髓细胞染色体标本，盲法阅片，观察染色体畸变细胞率和染色体畸变率。
2 结果
见表1、表2显示，5.0Gy γ照射可使小鼠骨髓有核细胞数量明显减少，DNA合成总量和单位数量细胞的DNA合成量显著下降，染色体畸变细胞率和染色体畸变率显著增高。饮用猕猴桃汁+照射组与照射对照组相比，有核细胞数量增多，DNA合成增加，染色体畸变率降低，呈现显著性差异且具有剂量-反应关系。其中，饮用桃汁高剂量组DNA合成总量可比照射对照组提高约2～3倍；染色体畸变率较照射对照组减少约20%～30%。两种桃汁的比较结果显示，在相同的饮用剂量下，猕猴桃B果汁较A果汁抗辐射损伤的作用更加显著，对DNA合成的增强作用和对染色体畸变的降低作用二者均具显著性差异。
, http://www.100md.com
表1 两种猕猴桃果汁对60Co-γ照射后小鼠骨髓有核细胞数量和DNA合成状况的影响 组别
剂量
(ml/kg)
n
骨髓有核细胞数(1)
3H-TdR参入总量(1)
3H-TdR参入量/106细胞
±s细胞数 ×105
相对值
, 百拇医药
cpm
相对值
cpm
相对值
阴性对照
0
10
116.5±13.0
43564±5358
3742±258
照射对照
0
10
, 百拇医药
28.0±3.8(2)
1.00
1948±397(2)
1.00
695±95(2)
1.00
猕猴桃A
2
10
28.9±3.0
1.03
2385±417(3)
, http://www.100md.com
1 .22
822±91(3)
1.18
+照射
10
10
32.3±3.6(3)
1.15
3048±557(3)
1.56
942±77(3)
, http://www.100md.com
1.36
50
10
37.3±4.7(3)
1.33
4223±491(3)
2.17
1140±97(3)
1.64
猕猴桃B
2
10
, http://www.100md.com
31.1±3.3
1.11
3008±310(3，4)
1.54
970±78(3，4)
1.40
+照射
10
10
35.3±4.4(3)
1.26
4047±440(3，4)
, http://www.100md.com
2.08
1153±116(3，4)
1.66
50
10
39.9±4.7(3)
1.43
5491±634(3，4)
2.82
1380±106(3，4)
1.99
, 百拇医药
注：(1)一条股骨的骨髓有核细胞数量或3H-TdR参入量(2)与阴性对照组比较，P<0.05(3)与照射对照组比较，P<0.05(4)与同剂量猕猴桃A+照射组比较，P<0.05表2 两种猕猴桃果汁对60Co-γ照射后小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响 组别
剂量
(ml/kg)
n
观察细
胞数
畸变细胞数
/100细胞
相对值
, 百拇医药 染色体畸变数
/100细胞
相对值
阴性对照
0
12
1200
0.4±0.5
0.4±0.5
照射对照
0
11
1100
, 百拇医药
52.0±3.5(1)
1.00
88.8±4.8(1)
1.00
猕猴桃A
+照射
10
11
1100
44.9±3.6(2)
0.86
72.3±3.8(2)
, 百拇医药
0.81
猕猴桃B
+照射
10
11
1100
41.8±3.3(2，3)
0.80
61.9±4.4(2，3)
0.70
注：(1)与阴性对照组比较，P<0.05(2)与照射对照组比较，P<0.0 5(3)与同剂量猕猴桃A+照射组比较，P<0.053 讨论
, 百拇医药
实验结果显示，猕猴桃果汁具有明显的抗辐射损伤作用。考虑到我国具有丰富的猕猴桃资源，且猕猴桃尚具有广谱的抗化学致突变[1]和降血浆总胆固醇及过氧化脂质含量的作用[2]，实验结果还表明，不同品种的猕猴桃抗辐射损伤的能力具有 显著差异。因此，在猕猴桃选种育种时，应将抗辐射损伤能力强弱作为判断品种优劣的重要 依据，仅仅关注其口感 好坏是片面不可取的。我们对两种猕猴桃果汁中还原型维生素C含量的测定结果表明，具有较强抗辐射损伤能力的猕猴桃B的还原型维生素C含量(0.57g/kg)反而低于猕猴桃A(0.86g/kg)，说明维生素C并非猕猴桃果汁中发挥抗辐射损伤作用的唯一活性成分。猕猴桃抗辐射损伤作用的有效成分和确切机制有待于深 入探讨。
杨业鹏，男，硕士，副教授
作者单位：尚兰琴(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)
4 参考文献
1，徐厚恩，周宗灿，宋延均，等.健力宝猕猴桃运动饮料的防癌效果观察.中国 运动医学杂志，1990，9(3)：129-131
2，陈吉棣，李可基，曹国华，等.健力宝猕猴桃饮料对人体血脂及脂质过氧化物含量的影响.中国运动医学杂志，1992，11(2)：109-110
(1999-05-31收稿), http://www.100md.com
单位：杨业鹏(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)；高广花(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)；薛宏伟(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)；徐厚恩(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)；贾凤兰(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)
关键词：
卫生研究990623 选用两种不同品种的猕猴桃果汁，观察并比较了其对60Co-γ 射线照射后小鼠骨髓有核细胞数量、骨髓细胞DNA合成及染色体畸变的影响。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 猕猴桃品种及果汁制备
实验选用的猕猴桃A为从新西兰选种、国内某地出产的Fruiting Male猕猴桃；猕猴桃B为江西农科院育种、浙江临海市出产的魁蜜种猕猴桃。果实制成匀浆，经4℃、8000r/min离心15分钟制得果汁。
1.2 动物及分组处理
选用昆明种雄性小鼠，体重18～22g，北京医科大学动物部提供。实验分8组，染色体畸变试验分4组。阴性对照和照射对照组以蒸馏水灌胃；两种猕猴桃汁低、中、高剂量+照射组分别以10%原汁、50%原汁和2.5倍原汁浓度的桃汁(以原汁加蒸馏水稀释或浓缩制得)灌胃，灌胃容量均为0.2ml/10g体重。桃汁剂量按灌胃桃汁浓度换算成每公斤体重给予的原汁体积表示。各组每天灌胃1次，连续7天。最后一次灌胃后1小时，阴性对照组不做处理，其余各组以60Co-γ射线一次性全身照射，照射剂量5.0Gy，剂 量率153.7cGy/min。照射后24小时处死动物，取材实验。
, 百拇医药
1.3 观察指标及方法
1.3.1 骨髓有核细胞计数 小鼠断髓处死，取股骨。用1ml预冷的RPMI1640全培养液将一条股骨的全部骨髓冲出，血球计数板计数骨髓有核细胞数量。
1.3.2 DNA合成检测 于1ml骨髓细胞悬液中，加入3H-TdR 3. 7kBq(0.1μCi)37℃温育4小时。而后将细胞收集在玻璃纤维滤膜上，以冷生理盐水、5%三氯乙酸和无水乙醇依次冲洗。滤膜干燥后，用液闪仪测量其放射性(cpm)。
1.3.3 染色体畸变分析 按本室常规方法制备小鼠骨髓细胞染色体标本，盲法阅片，观察染色体畸变细胞率和染色体畸变率。
2 结果
见表1、表2显示，5.0Gy γ照射可使小鼠骨髓有核细胞数量明显减少，DNA合成总量和单位数量细胞的DNA合成量显著下降，染色体畸变细胞率和染色体畸变率显著增高。饮用猕猴桃汁+照射组与照射对照组相比，有核细胞数量增多，DNA合成增加，染色体畸变率降低，呈现显著性差异且具有剂量-反应关系。其中，饮用桃汁高剂量组DNA合成总量可比照射对照组提高约2～3倍；染色体畸变率较照射对照组减少约20%～30%。两种桃汁的比较结果显示，在相同的饮用剂量下，猕猴桃B果汁较A果汁抗辐射损伤的作用更加显著，对DNA合成的增强作用和对染色体畸变的降低作用二者均具显著性差异。
, http://www.100md.com
表1 两种猕猴桃果汁对60Co-γ照射后小鼠骨髓有核细胞数量和DNA合成状况的影响 组别
剂量
(ml/kg)
n
骨髓有核细胞数(1)
3H-TdR参入总量(1)
3H-TdR参入量/106细胞
±s细胞数 ×105相对值
, 百拇医药
cpm
相对值
cpm
相对值
阴性对照
0
10
116.5±13.0
43564±5358
3742±258
照射对照
0
10
, 百拇医药
28.0±3.8(2)
1.00
1948±397(2)
1.00
695±95(2)
1.00
猕猴桃A
2
10
28.9±3.0
1.03
2385±417(3)
, http://www.100md.com
1 .22
822±91(3)
1.18
+照射
10
10
32.3±3.6(3)
1.15
3048±557(3)
1.56
942±77(3)
, http://www.100md.com
1.36
50
10
37.3±4.7(3)
1.33
4223±491(3)
2.17
1140±97(3)
1.64
猕猴桃B
2
10
, http://www.100md.com
31.1±3.3
1.11
3008±310(3，4)
1.54
970±78(3，4)
1.40
+照射
10
10
35.3±4.4(3)
1.26
4047±440(3，4)
, http://www.100md.com
2.08
1153±116(3，4)
1.66
50
10
39.9±4.7(3)
1.43
5491±634(3，4)
2.82
1380±106(3，4)
1.99
, 百拇医药
注：(1)一条股骨的骨髓有核细胞数量或3H-TdR参入量(2)与阴性对照组比较，P<0.05(3)与照射对照组比较，P<0.05(4)与同剂量猕猴桃A+照射组比较，P<0.05表2 两种猕猴桃果汁对60Co-γ照射后小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响 组别
剂量
(ml/kg)
n
观察细
胞数
畸变细胞数
/100细胞
相对值
, 百拇医药 染色体畸变数
/100细胞
相对值
阴性对照
0
12
1200
0.4±0.5
0.4±0.5
照射对照
0
11
1100
, 百拇医药
52.0±3.5(1)
1.00
88.8±4.8(1)
1.00
猕猴桃A
+照射
10
11
1100
44.9±3.6(2)
0.86
72.3±3.8(2)
, 百拇医药
0.81
猕猴桃B
+照射
10
11
1100
41.8±3.3(2，3)
0.80
61.9±4.4(2，3)
0.70
注：(1)与阴性对照组比较，P<0.05(2)与照射对照组比较，P<0.0 5(3)与同剂量猕猴桃A+照射组比较，P<0.053 讨论
, 百拇医药
实验结果显示，猕猴桃果汁具有明显的抗辐射损伤作用。考虑到我国具有丰富的猕猴桃资源，且猕猴桃尚具有广谱的抗化学致突变[1]和降血浆总胆固醇及过氧化脂质含量的作用[2]，实验结果还表明，不同品种的猕猴桃抗辐射损伤的能力具有 显著差异。因此，在猕猴桃选种育种时，应将抗辐射损伤能力强弱作为判断品种优劣的重要 依据，仅仅关注其口感 好坏是片面不可取的。我们对两种猕猴桃果汁中还原型维生素C含量的测定结果表明，具有较强抗辐射损伤能力的猕猴桃B的还原型维生素C含量(0.57g/kg)反而低于猕猴桃A(0.86g/kg)，说明维生素C并非猕猴桃果汁中发挥抗辐射损伤作用的唯一活性成分。猕猴桃抗辐射损伤作用的有效成分和确切机制有待于深 入探讨。
杨业鹏，男，硕士，副教授
作者单位：尚兰琴(北京医科大学卫生毒理学教研室，北京 100083现工作单位：北京医科大学放射医学基础教研室)
4 参考文献
1，徐厚恩，周宗灿，宋延均，等.健力宝猕猴桃运动饮料的防癌效果观察.中国 运动医学杂志，1990，9(3)：129-131
2，陈吉棣，李可基，曹国华，等.健力宝猕猴桃饮料对人体血脂及脂质过氧化物含量的影响.中国运动医学杂志，1992，11(2)：109-110
(1999-05-31收稿), http://www.100md.com