微波溶样—氢化物发生—原子吸收光谱法测定人发中微量硒的方法研究
作者：郭鹤鸣 孙利群
单位：黑龙江省齐齐哈尔铁路中心卫生防疫站，齐齐哈尔 161000
关键词：
卫生研究000626
文章编号：1000-8020(2000)06-0411-01
硒是人体必需的微量元素之一，人体发硒含量的测定对于病理研究和临床诊断具有重大的意义。过去对发硒含量的测定多采用2，3-二氨基萘荧光比色法，此法虽具有较高的灵敏度和准确度，但样品消化时易损失，操作步骤繁琐、费时，药品昂贵。为此，我们进行了微波溶样、氢化物发生装置与原子吸收分光光度计联用测定人发硒含量的方法实验，取得了满意结果[1，2]。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 仪器
WPX-1B 原子吸收分光光度计(北京第二光学仪器厂)；VA-90 氢化物发生装置(同济医科大学研制)；硒空心阴极灯(北京有色金属研究学院特种光源厂)；微波炉(青岛海尔制冷集团公司)；聚四氟乙烯高压消化罐(中国科学院成都有机化学研究所)。
1.2 仪器工作条件
灯电流6mA，吸收波长196.0nm，光谱通带0.2nm；信号方式：峰高；载气：高纯氮0.8L/min；火焰：空气-乙炔贫焰。
1.3 试剂
盐酸、硝酸、高氯酸、氢氧化钠、硼氢化钠(进口分装)均为GR级；实验用水为亚沸水。硼氢化钠溶液(6g/L)：称取0.6g硼氢化钠和0.5g氢氧化钠用水溶解并稀释至100ml；盐酸溶液：6%(V/V)；硒标准贮备液：1mg/ml，国家标准62029-90；硒标准应用液：1μg/ml(用6%HCl稀释)。
, 百拇医药
1.4 测定方法
1.4.1 标准系列的制备 取洁净的100ml容量瓶5个，分别吸取硒标准应用液0、0.5、1.0、2.0和4.0ml，用6%HCl稀释至刻度，硒的浓度依次为0、5.00、10.00、20.00和40.00μg/L，充分摇匀后备用。
1.4.2 样品的采集与处理 取头枕部近根部发样1～2g，剪至1cm左右，置于250ml烧杯中，用洗洁精洗净，用自来水冲洗至无泡沫，再用亚沸水冲洗3次，80℃烘干至恒重。准确称取发样0.2g置于聚四氟乙烯高压消化罐中，加入5ml混酸(HNO3+HClO4=4+1)，1.0ml H2O2，加盖拧紧后放入微波炉中，依次采用下列消化程序：420W 6min；490W 6min;560W 5min;即可将样品消化完全。将消化好的样品用6%HCl洗至10ml比色管中定容至刻度，备用。
, 百拇医药
1.4.3 测定步骤
连接VA-90装置，调整好工作条件，开始进样。每次进样3ml，进样后通载气排净空气，加入6g/L硼氢化钠溶液2.1ml进行测定。每次进样后6%HCl冲洗反应瓶，排尽空气后开始下次进样。用微机测试数据，并报告结果。
2 结果
2.1 标准曲线线性关系及特征浓度
根据上述方法进行测定，标准溶液浓度在0.00～40.00μg/L范围内线性关系良好，r=0.9999。特征浓度：0.25μg/L(1%)。
2.2 精密度的测试
分别对10μg/L、20μg/L硒的标准溶液及任意一份发样重复进行测定，每次测定均为双份，结果见表1。
, 百拇医药
表1 精密度实验 (n=10) 样品
含硒量
(
±s,μg/L)
变异
10μg/L标样
10.148±0.264
2.6
20μg/L标样
20.320±0.437
2.1
人发(μg/g)
, http://www.100md.com
0.2254±0.0067
3.0
2.3 准确度的测试
向发样(硒含量25.09ng)中准确加入含硒50、100ng的标准溶液，测定硒的回收率分别为(%)95.8±1.9和100.8±1.3。
2.4 质控标准
采用国家技术监督局批准，地质矿产部地球物理化学勘察研究所制作的GBW 07601(GHS-1)人发标准物质作为质控标准。按上述方法进行样品处理，测定结果均值为0.61μg/g，在标准值0.57～0.63μg/g范围内。
2.5 最佳测试条件的选择
采用人发标样，按上述方法进行样品处理后分别对溶液酸度、还原剂用量、载气流量进行了最佳测试条件的筛选实验，结果见表2。表2 溶液酸度及还原剂用量的选择 (n=6) HCl酸度
, 百拇医药
(V/V)
平均测得值
(μg/g)
硼氢化钠加入量
(ml)
平均测得值
4
0.510
1.5
0.545
5
0.568
2.0
, 百拇医药
0.608
6
0.612
3.0
0.590
7
0.571
8
0.570
当盐酸浓度从4%增加到6%时发样测得值有明显的提高，而后随着盐酸浓度的增高测得值趋于稳定。实验表明选择盐酸浓度为6%，既能使6价硒充分还原为4价硒，又能满足测定过程中要求的酸性条件。硼氢化钠在酸性溶液中将4价硒还原为硒化氢，它的用量直接影响测定的灵敏度。若加入量过高反应非常激烈并伴有轻微爆鸣声，为此选择加入2.0ml的硼氢化钠溶液满足测定的要求。选择盐酸浓度为6%的体系，还原剂加入量为2.0ml，调节载气流量从0.6L/min增加到1.0L/min，当载气流量为0.8L/min时测得值在标准值范围内，连续测定6次，结果较为稳定，为此选择载气流量为0.8L/min。
, 百拇医药
3 小结
实验结果表明，用微波消化，氢化物发生装置与原子吸收分光光度计联用测定人发硒，具有灵敏度高、准确性好、操作方便、试剂与样品用量少、样品消化速度快、少污染、低能耗等优点，由于采用高压消化罐消化样品解决了在消化过程中硒的挥发损失问题，能够满足科研与临床的需要，是检验人发中微量硒值得采用的一种分析方法。
作者简介：郭鹤鸣，女，大学，主管技师
4 参考文献
1，罗方若.湿法消化试样的新技术—微波溶样.四川分析测试通报，1989，(1)：21
2，米瑞华.硒的原子吸收分析进展.光谱学与光谱分析，1993，13(4)：105
(2000-02-24收稿), http://www.100md.com
单位：黑龙江省齐齐哈尔铁路中心卫生防疫站，齐齐哈尔 161000
关键词：
卫生研究000626
文章编号：1000-8020(2000)06-0411-01
硒是人体必需的微量元素之一，人体发硒含量的测定对于病理研究和临床诊断具有重大的意义。过去对发硒含量的测定多采用2，3-二氨基萘荧光比色法，此法虽具有较高的灵敏度和准确度，但样品消化时易损失，操作步骤繁琐、费时，药品昂贵。为此，我们进行了微波溶样、氢化物发生装置与原子吸收分光光度计联用测定人发硒含量的方法实验，取得了满意结果[1，2]。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 仪器
WPX-1B 原子吸收分光光度计(北京第二光学仪器厂)；VA-90 氢化物发生装置(同济医科大学研制)；硒空心阴极灯(北京有色金属研究学院特种光源厂)；微波炉(青岛海尔制冷集团公司)；聚四氟乙烯高压消化罐(中国科学院成都有机化学研究所)。
1.2 仪器工作条件
灯电流6mA，吸收波长196.0nm，光谱通带0.2nm；信号方式：峰高；载气：高纯氮0.8L/min；火焰：空气-乙炔贫焰。
1.3 试剂
盐酸、硝酸、高氯酸、氢氧化钠、硼氢化钠(进口分装)均为GR级；实验用水为亚沸水。硼氢化钠溶液(6g/L)：称取0.6g硼氢化钠和0.5g氢氧化钠用水溶解并稀释至100ml；盐酸溶液：6%(V/V)；硒标准贮备液：1mg/ml，国家标准62029-90；硒标准应用液：1μg/ml(用6%HCl稀释)。
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1.4 测定方法
1.4.1 标准系列的制备 取洁净的100ml容量瓶5个，分别吸取硒标准应用液0、0.5、1.0、2.0和4.0ml，用6%HCl稀释至刻度，硒的浓度依次为0、5.00、10.00、20.00和40.00μg/L，充分摇匀后备用。
1.4.2 样品的采集与处理 取头枕部近根部发样1～2g，剪至1cm左右，置于250ml烧杯中，用洗洁精洗净，用自来水冲洗至无泡沫，再用亚沸水冲洗3次，80℃烘干至恒重。准确称取发样0.2g置于聚四氟乙烯高压消化罐中，加入5ml混酸(HNO3+HClO4=4+1)，1.0ml H2O2，加盖拧紧后放入微波炉中，依次采用下列消化程序：420W 6min；490W 6min;560W 5min;即可将样品消化完全。将消化好的样品用6%HCl洗至10ml比色管中定容至刻度，备用。
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1.4.3 测定步骤
连接VA-90装置，调整好工作条件，开始进样。每次进样3ml，进样后通载气排净空气，加入6g/L硼氢化钠溶液2.1ml进行测定。每次进样后6%HCl冲洗反应瓶，排尽空气后开始下次进样。用微机测试数据，并报告结果。
2 结果
2.1 标准曲线线性关系及特征浓度
根据上述方法进行测定，标准溶液浓度在0.00～40.00μg/L范围内线性关系良好，r=0.9999。特征浓度：0.25μg/L(1%)。
2.2 精密度的测试
分别对10μg/L、20μg/L硒的标准溶液及任意一份发样重复进行测定，每次测定均为双份，结果见表1。
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表1 精密度实验 (n=10) 样品
含硒量
(
±s,μg/L)变异
10μg/L标样
10.148±0.264
2.6
20μg/L标样
20.320±0.437
2.1
人发(μg/g)
, http://www.100md.com
0.2254±0.0067
3.0
2.3 准确度的测试
向发样(硒含量25.09ng)中准确加入含硒50、100ng的标准溶液，测定硒的回收率分别为(%)95.8±1.9和100.8±1.3。
2.4 质控标准
采用国家技术监督局批准，地质矿产部地球物理化学勘察研究所制作的GBW 07601(GHS-1)人发标准物质作为质控标准。按上述方法进行样品处理，测定结果均值为0.61μg/g，在标准值0.57～0.63μg/g范围内。
2.5 最佳测试条件的选择
采用人发标样，按上述方法进行样品处理后分别对溶液酸度、还原剂用量、载气流量进行了最佳测试条件的筛选实验，结果见表2。表2 溶液酸度及还原剂用量的选择 (n=6) HCl酸度
, 百拇医药
(V/V)
平均测得值
(μg/g)
硼氢化钠加入量
(ml)
平均测得值
4
0.510
1.5
0.545
5
0.568
2.0
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0.608
6
0.612
3.0
0.590
7
0.571
8
0.570
当盐酸浓度从4%增加到6%时发样测得值有明显的提高，而后随着盐酸浓度的增高测得值趋于稳定。实验表明选择盐酸浓度为6%，既能使6价硒充分还原为4价硒，又能满足测定过程中要求的酸性条件。硼氢化钠在酸性溶液中将4价硒还原为硒化氢，它的用量直接影响测定的灵敏度。若加入量过高反应非常激烈并伴有轻微爆鸣声，为此选择加入2.0ml的硼氢化钠溶液满足测定的要求。选择盐酸浓度为6%的体系，还原剂加入量为2.0ml，调节载气流量从0.6L/min增加到1.0L/min，当载气流量为0.8L/min时测得值在标准值范围内，连续测定6次，结果较为稳定，为此选择载气流量为0.8L/min。
, 百拇医药
3 小结
实验结果表明，用微波消化，氢化物发生装置与原子吸收分光光度计联用测定人发硒，具有灵敏度高、准确性好、操作方便、试剂与样品用量少、样品消化速度快、少污染、低能耗等优点，由于采用高压消化罐消化样品解决了在消化过程中硒的挥发损失问题，能够满足科研与临床的需要，是检验人发中微量硒值得采用的一种分析方法。
作者简介：郭鹤鸣，女，大学，主管技师
4 参考文献
1，罗方若.湿法消化试样的新技术—微波溶样.四川分析测试通报，1989，(1)：21
2，米瑞华.硒的原子吸收分析进展.光谱学与光谱分析，1993，13(4)：105
(2000-02-24收稿), http://www.100md.com