059 大鼠睾丸小分子镉结合蛋白的纯化及性质
作者：周雍 胡惠民 杨志峰 冯伟华 印木泉
单位：周 雍 杨志峰 (第二军医大学基础部卫生毒理教研室 上海 200433)； 胡惠民 冯伟华 印木泉 (第二军区大学基础部生物化学教研室)
关键词：
睾丸是机体对镉毒性最敏感的器官之一 睾丸是机体对镉毒性最敏感的器官之一。低剂量的急性镉中毒即可引起睾丸出血、生精过程短时间破坏，而敏感机理一直未能阐明。有报道认为，尽管有免疫组化实验阳性结果的支持，睾丸内无法诱导产生对镉的解毒起重要作用的金属硫蛋白(Metallothionein,MT)很可能是睾丸对镉敏感的原因。本实验通过分离、纯化经镉诱导的大鼠睾丸内小分子镉结合蛋白，与肝MT相比较，以探究两者的差异，为从细胞保护机制的角度阐明睾丸对镉敏感的机理提供依据。
目的：纯化经CdCl2诱导雄性SD大鼠的睾丸小分子镉结合蛋白(CdBP)与肝金属硫蛋白，并对两者性质进行初步鉴定，以明确正常大鼠睾丸中特异的小分子镉结合蛋白是否就是MT。方法：CdCl2诱导的大鼠睾丸、肝匀浆经85℃高温处理及丙酮分段沉淀初步纯化后，分别上Sephacryl S-200柱分离。对镉结合的蛋白组分进行Tricine-SDS-PAGE分子量测定及氨基酸组成分析；原子吸收法检测两者蛋白镉结合量。结果：(1)睾丸与肝脏均分离得到单个镉结合的蛋白峰，SDS-PAGE分子量分析为6.4kD；(2)睾丸CdBP在氨基酸组成上与肝MT有很大差别，特别是作为MT特征的Cys几乎没有。(3)睾丸CdBP镉结合量明显低于肝MT，仅为后者的十分之一左右。结论：可以初步认为大鼠睾丸小分子镉结合蛋白与肝MT并不是同一蛋白。, http://www.100md.com
单位：周 雍 杨志峰 (第二军医大学基础部卫生毒理教研室 上海 200433)； 胡惠民 冯伟华 印木泉 (第二军区大学基础部生物化学教研室)
关键词：
睾丸是机体对镉毒性最敏感的器官之一 睾丸是机体对镉毒性最敏感的器官之一。低剂量的急性镉中毒即可引起睾丸出血、生精过程短时间破坏，而敏感机理一直未能阐明。有报道认为，尽管有免疫组化实验阳性结果的支持，睾丸内无法诱导产生对镉的解毒起重要作用的金属硫蛋白(Metallothionein,MT)很可能是睾丸对镉敏感的原因。本实验通过分离、纯化经镉诱导的大鼠睾丸内小分子镉结合蛋白，与肝MT相比较，以探究两者的差异，为从细胞保护机制的角度阐明睾丸对镉敏感的机理提供依据。
目的：纯化经CdCl2诱导雄性SD大鼠的睾丸小分子镉结合蛋白(CdBP)与肝金属硫蛋白，并对两者性质进行初步鉴定，以明确正常大鼠睾丸中特异的小分子镉结合蛋白是否就是MT。方法：CdCl2诱导的大鼠睾丸、肝匀浆经85℃高温处理及丙酮分段沉淀初步纯化后，分别上Sephacryl S-200柱分离。对镉结合的蛋白组分进行Tricine-SDS-PAGE分子量测定及氨基酸组成分析；原子吸收法检测两者蛋白镉结合量。结果：(1)睾丸与肝脏均分离得到单个镉结合的蛋白峰，SDS-PAGE分子量分析为6.4kD；(2)睾丸CdBP在氨基酸组成上与肝MT有很大差别，特别是作为MT特征的Cys几乎没有。(3)睾丸CdBP镉结合量明显低于肝MT，仅为后者的十分之一左右。结论：可以初步认为大鼠睾丸小分子镉结合蛋白与肝MT并不是同一蛋白。, http://www.100md.com